刘新平
- 作品数：234 被引量：894H指数：16
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 临床医学八年制生物化学教学的体会被引量：1
- 2009年
- 八年制医学教育旨在培养高层次、高素质的医学人才。通过对生物化学八年制教学的总结,从教学形式,教学内容和教学大纲各方面进行探讨,以增强教学效果,提高八年制医学生的培养质量,适应现代社会对医学人才的需求。
- 沈岚刘新平药立波
- 关键词：生物化学教学改革
- 人骨形成蛋白－2AcDNA基因工程产物诱骨活性的形态学证明被引量：3
- 1995年
- 人骨形成蛋白２Ａ（ｈｕｍａｎｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎ２Ａ，ｈＢＭＰ２Ａ）ｃＤＮＡ３′端５６７个核苷酸插入表达载体ＰＳＧ４Ｔ－２中，在大肠杆菌中获得１５％的表达，表达产物为２１ＫＤ的蛋白质，经包涵体洗涤，尿素变性和复性后，取１ｉｎｇ表达产物，植入小鼠股四头肌中，２１天后取植入区进行组织切片观察，证实这种基因工程产物具有良好的异位骨诱导活性。
- 刘新平张远强陈南春陈苏民
- 关键词：人骨形成蛋白基因工程产物骨诱导活性
- NDRG家族成员酵母双杂交诱饵载体的构建,表达及自激活检测被引量：3
- 2005年
- 目的:构建NDRG家族4个成员的酵母双杂交诱饵 载体,验证其在酵母中的表达并检测其自激活作用,为用酵母 双杂交方法寻找与NDRG家族相互作用的分子奠定实验基 础.方法:用PCR方法获得NDRG家族4个成员cDNA全长,将4个片段按正确读框插入酵母表达质粒PGBKT7中,经限 制性酶切鉴定正确后,PEG/LiAc法转化酵母菌株AH109, Western验证4个分子的正确表达,用表型筛选法及颜色筛选 法检测其自激活作用.结果:构建了NDRG家族4个成员的 酵母双杂交诱饵载体,并在酵母中正确表达,除NDRG4 B外 NDRG1,2,3均无自激活作用.结论:NDRG1,2,3可以用酵母 双杂交方法钓取与之相互作用的分子.NDRG4 B由于有自激 活作用不能用于酵母双杂交的筛选.
- 张璟张健刘娜王立峰李霞刘新平药立波
- 关键词：诱饵载体酵母双杂交自激活作用
- 地高辛标记寡核苷酸探针检测大鼠胰岛素mRNA
- 1995年
- 本实验采用地高辛标记前胰岛素寡核苷酸探针原位杂交组织化学技术，研究了Ｗｉｓｔａｒ大鼠胰腺组织胰岛素基因的表达。实验用Ｗｉｓｔａｒ大鼠５只，胰腺经４％多聚甲醛灌注固定，并在同一固定液中后固定２４ｈ，常规石蜡包埋切片。结果表明，经前胰岛素寡核苷酸探针杂交的胰腺切片中，胰岛Ｂ细胞呈蓝色。杂交反应物位于Ｂ细胞的细胞质和部分核仁中，胞核无色。胰岛其它细胞及胰腺外分泌部腺泡细胞无杂交反应物。对照切片中均无阳性信号出现。结果表明地高辛标记寡核苷酸探针不仅具备非同位素标记探针的优点而且能精确检测特异性ｍＲＮＡ的表达。本研究方法操作便利，可靠精确，重复性好。
- 张远强张舒华刘新平
- 关键词：原位杂交胰腺
- OS-9基因的融合表达、纯化及多克隆抗体制备被引量：14
- 2003年
- OS 9基因广泛表达于人体多种组织 ,该基因的表达产物可能与肿瘤的发生相关 .为获得可溶性表达的OS 9蛋白 ,制备多克隆抗体 ,深入了解OS 9基因的功能 ,将OS 9基因片段克隆入组氨酸标签融合的表达载体pET2 8a中 ,IPTG诱导 ,利用金属螯合亲和层析 (MCAC)进行纯化 ,薄层扫描及Bradford法检测纯化蛋白的纯度与含量 .免疫家兔制备多克隆抗体 ,利用间接ELISA法检测抗体效价 ,Western印迹检测抗体特异性 .经表达形式分析证明 ,融合蛋白大部分可溶 .薄层扫描分析纯度可达 90 %以上 ,Bradford法检测蛋白浓度约 0 1mg ml.抗血清效价可达 1∶32 0 0以上 ,Western印迹检测证明抗体特异性良好 .经诱导表达及纯化制备出可溶的纯度较高的OS 9蛋白产物 。
- 韩月恒张文红沈岚季少平刘新平药立波
- 关键词：纯化多克隆抗体肿瘤
- 人牙周膜成纤维细胞增殖与压力关系的初步观察被引量：20
- 2001年
- 目的 :在体外培养环境下观察压力对人牙周膜成纤维细胞 (HPLF)增殖的影响。方法 :取第 4～ 6代培养的HPLF ,应用可控压力细胞加载装置分别间断性施加 3 0、60、90kPa的压力 ,分别在培养 3、5、7d后用MTT法测定各组的A值。结果 :HPLF在 3 0、60、90kPa的压力培养环境下MTT反应的A值显著小于对照组 ,压力值越大 ,A值越小。结论 :3 0、60、90kPa间断性压力可显著抑制HPLF细胞增殖 ,该抑制作用随压力值增大而增强。
- 张惠施生根宋应亮刘新平王吉村党平
- 关键词：牙周韧带成纤维细胞细胞增殖牙周膜
- EphB2受体N端结构域蛋白的纯化及其对胃癌细胞蛋白酪氨酸磷酸化的作用被引量：1
- 2001年
- EphB2受体在细胞生长、分化和信号转导过程中具有重要作用,为深入研究其在胃癌的信号转导中的作用及功能,检测了EphB2受体刺激胃癌细胞后的酪氨酸磷酸化的变化。利用Ni-NTA金属螯合亲和层析法将在E.coli中融合表达的重组蛋白EphB2受体的N端球状区进行纯化,并经Western印迹进行确证和ELISA方法检测该蛋白活性,得到纯度95％以上的融合蛋白,并有结合其天然配体的活性,EphB2受体诱导可以使胃癌细胞发生明显的蛋白质酪氨酸磷酸化的改变,即通过反向刺激其ephrinB配体引起了胃癌细胞信号转导通路中一些信号分子酪氨酸磷酸化的改变。
- 张晓光药立波俞强刘新平季少平韩炯苏成芝
- 关键词：胃癌细胞信号转导酪氨酸激酶N端结构域
- 酪氨酸激酶抑制剂STI571治疗慢性粒细胞白血病的研究被引量：1
- 2005年
- 目的:研究特异性酪氨酸激酶抑制剂STI571对慢性粒细胞白血病(简称慢粒)细胞增殖、凋亡、周期调控及bcr-abl融合基因表达的影响,为慢粒的基因治疗提供理论依据。方法:细胞培养慢粒急变细胞系K562细胞株,通过MTT检测STI571作用下细胞存活率,流式细胞仪检测周期变化,电镜及DNA电泳检测细胞凋亡,半定量RT-PCR检测STI571对bcr-abl融合基因表达的影响。结果:STI571作用后K562细胞中G1期细胞明显增加,S期细胞明显减少。流式细胞图中的二倍体峰前可见一明显亚二倍体峰———凋亡峰(apoptosispeak),提示STI571能明显诱导K562细胞凋亡。电镜发现STI571作用于K562细胞12～72h后,诱导出各期凋亡细胞及凋亡小体。半定量PCR灰度扫描结果显示bcr-abl基因的mRNA表达下降,电泳检测扩增产物,荧光亮度减弱。结论:STI571能明显抑制白血病细胞增殖,细胞阻滞于G0/G1期,且具有明显的诱导凋亡作用,反馈抑制bcr-abl融合基因的表达。
- 王玮孙秉中药立波刘新平
- 关键词：蛋白质酪氨酸激酶凋亡STI571BCR-ABL融合基因慢性粒细胞白血病酪氨酸激酶抑制剂K562细胞凋亡
- 生物化学实验教学的几点体会被引量：1
- 2006年
- 生物化学是联系基础医学与临床医学的重要学科，而生化实验则是生化教学的一个重要环节。其目的是培养学生思考问题、分析问题和解决问题的能力，激发学生对生物化学课程学习的兴趣。为了提高生物化学实验课的教学质量，对实验过程中所遇到的一些问题进行了一定的分析和探讨，并积极地应用于实验教学中去。
- 张健苏金刘新平药立波
- 关键词：生物化学实验教学教学质量
- 促甲状腺激素释放激素受体-2在大鼠生后睾丸不同发育阶段的表达和定位被引量：1
- 2005年
- 目的研究促甲状腺激素释放激素受体-2(TRH-R2)在大鼠睾丸出生后不同发育阶段的表达,探讨其在生殖发育调节中的作用。方法应用蛋白质免疫印迹杂交技术以及免疫组织化学ABC法检测8d、15d、20d、35d、60d和90d大鼠睾丸中TRH-R2的表达和定位,并结合图像分析技术对免疫组织化学结果进行统计学分析,观察其在发育过程中的变化。结果免疫印迹杂交发现TRH-R2蛋白表达于出生后15d以后各阶段的大鼠睾丸;而免疫组织化学在第8d以后的各个发育阶段均检测到TRH-R2的表达,TRH-R2定位于大鼠睾丸的间质细胞,TRH-R2免疫反应阳性物位于细胞膜和细胞质内,细胞核为阴性;图像分析结果显示随着大鼠睾丸的发育,TRH-R2表达量逐渐增多,35d达到最大值,此后维持稳定水平,表达量在35d同其他阶段之间具有统计学差异(P<0·01)。结论TRH-R2在大鼠睾丸发育过程中均有表达,定位于睾丸的间质细胞,其表达量随着增龄变化而变化,即同发育过程相关。
- 赵勇张远强张金山刘新平许若军
- 关键词：免疫组织化学睾丸
