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孔梅: 作品数：46 被引量：219H指数：8; 供职机构：天津市疾病预防控制中心更多>>; 发文基金：天津市卫生局科技基金中国博士后科学基金天津市自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>

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天津市新型冠状病毒肺炎确诊病例病原学检测结果及影响因素分析被引量：5: 2020年; 目的研究天津市新型冠状病毒肺炎确诊病例实验室检测结果特征及影响因素。方法按照标准操作流程完成患者样本采集,使用天隆自动磁珠核酸提取试剂完成核酸提取,使用4种已获得审批的新型冠状病毒核酸检测试剂盒进行实时荧光RT-PCR核酸检测,收集患者相关流行病学资料,使用SPSS25.0软件完成单因素方差分析和非参数检验进行组间差异性分析。结果共完成123例新型冠状病毒肺炎确诊病例的核酸检测,PCR检测次数共162次,11次单靶标阳性结果中有10次为核衣壳蛋白基因(nucleocapsid protein gene,N gene)单靶标阳性;同时使用2种试剂盒对19例确诊病例进行检测,结果显示不同试剂盒检测效果存在差异;采集多种样本类型对13例患者进行检测,痰样本Ct值普遍低于咽拭子样本。不同临床症状分型患者咽拭子Ct值之间差异无统计学意义(PCt-N=0.797;PCt-ORF1a/b=0.551)。根据发病日期与首次检测病毒核酸阳性日期之间的间隔时间分组,不同分组咽拭子Ct值之间差异无统计学意义(PCt-N=0.373;PCt-ORF1a/b=0.058)。结论痰液样本相比上呼吸道样本病毒核酸检测更易检出。N基因检测灵敏度更高,N基因单靶标阳性结果应重新采样检测。应根据实际需求选择合适的检测试剂盒,多时间点、多样本类型、多部位采集样本开展检测。; 李晓燕高鑫郭丽茹吕莉琨雷玥董晓春孔梅邹明李闻苏旭; 关键词：新型冠状病毒 RT-PCR

2010年-2013年天津市流感病原学监测分析被引量：38: 2013年; 目的分析天津市近3年流感活动情况及流行株构成特点,为流感防控提供参考。方法采集哨点医院流感样病例的咽拭子标本,流感病毒核酸检测阳性标本接种MDCK细胞进行病毒分离,以红细胞凝集及凝集抑制试验对分离的病毒进行鉴定和分型。结果共采集标本1867份,分离出流感毒株436株,新甲型H1N1、A(H3N2)和B型毒株均有发现。2011年-2012年以B型为流行优势株,其它两个监测周期的主要流行株则为A型,表现为A(H3N2)亚型及新甲型H1N1亚型毒株交替流行的特点。结论天津地区2010年4月-2013年3月流感流行表现为A(H3N2)、新甲型H1N1、B型流感病毒依次先后交替流行的特点。; 郭丽茹孔梅李晓燕邹明董晓春徐文体; 关键词：流感病毒病原学

天津市发热呼吸道症候群不同类型样本的病毒病原特征分析被引量：15: 2013年; 目的了解天津市发热呼吸道症候群的病毒病原谱构成,比较不同类型样本阳性检出率及病毒病原分布特征。方法选择天津市儿童医院和综合医院各1家,对2010年9月至2011年8月期间就诊的符合发热呼吸道症候群病例定义的122例患者同时采集咽拭子和下呼吸道分泌物样本,采用多重RT-PCR方法检测腺病毒(ADV)、副流感病毒(PIV)、流感病毒(Flu)、鼻病毒(RhinoV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、人偏肺病毒(HMPV)、冠状病毒(CoV),以及采用PCR法检测人博卡病毒(HBoV)。结果 122例患者的病毒阳性检出率为66.4%(81/122)。成人检出病毒以Flu为主,占病毒检出总数的80.6%(25/31);而儿童检出病毒以PIV、RhinoV、ADV为主,分别占21.8%(19/87)、21.8%(19/87)和20.7%(18/87);成人与儿童检出的病毒构成差异有统计学意义(P<0.01)。244份样本的阳性检出率为40.6%(99/244),其中鼻咽抽吸物、支气管肺泡灌洗液及咽拭子样本的阳性检出率分别为62.0%(67/108)、37.5%(3/8)和23.8%(29/122);不同类型样本的阳性检出率差异有统计学意义(P<0.01)。结论发热呼吸道症候群成人与儿童的主要致病病毒不同,检测样本应采集下呼吸道特别是鼻咽抽吸物样本。; 董晓春李琳李佳萌徐文体张颖孔梅; 关键词：病毒学病原聚合酶链反应

新型冠状病毒核酸检测实验室消毒防护经验探讨被引量：2: 2021年; 新型冠状病毒肺炎(COVID-19)对世界人民健康造成威胁。目前,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法用于鼻咽拭子、痰和其他下呼吸道分泌物、血液及粪便等标本的核酸检测,是筛查和诊断COVID-19的重要手段。但随着检测活动的广泛开展,检测人员存在的潜在感染风险及消毒防护的问题被大家广泛关注。制定和实施核酸检测实验室规范的消毒防护方案,既可以有效地保护检测人员的健康安全,又可以避免实验室的相关污染,降低干扰因素,从而提升检测质量和效率。; 宁培勇于爱萍王源郭丽茹孔梅于凌琪吕莉琨邹明苏旭王百齐; 关键词：新型冠状病毒核酸实验室消毒防护

嵌合人偏肺病毒(hMPV)表位的重组流感病毒免疫保护效果被引量：3: 2020年; 目的评价重组嵌合表达人偏肺病毒(hMPV)表位的流感病毒的免疫应答及免疫保护效果。方法用8质粒系统拯救出的在NS基因中嵌合hMPV表位的重组流感病毒免疫BALB/c小鼠,检测其刺激机体产生的针对hMPV和流感病毒的抗体滴度,及脾细胞分泌细胞因子含量。免疫后小鼠用hMPV和流感病毒进行攻击,对攻击后小鼠肺组织和鼻甲骨中病毒含量采用数字PCR方法进行测定,同时对肺组织进行HE染色,评价其对肺部损伤的保护作用。结果重组流感病毒株rFLU/hMPV/B(嵌入了hMPV的B细胞表位)免疫小鼠后,产生了针对hMPV和流感病毒的特异性抗体。rFLU/hMPV/CTL+Th(嵌入了CTL表位/Th细胞表位)免疫小鼠后,产生了针对流感病毒的特异性抗体及hMPV特异的细胞毒性T淋巴细胞反应(IFN-γ分泌增多)。rFLU/hMPV/B和rFLU/hMPV/CTL+Th引起了平衡的Th1/Th2免疫应答。用hMPV和流感病毒攻击重组病毒免疫后小鼠,肺组织病理HE染色结果显示重组病毒免疫后小鼠肺病变明显减轻,肺组织和鼻甲骨中hMPV和流感病毒含量也明显减少。结论重组的2株嵌合有hMPV B细胞表位和CTL表位/Th细胞表位的重组流感病毒株,可刺激机体产生针对hMPV和/或流感病毒体液免疫应答,嵌合有hMPV CTL表位/Th细胞表位的重组流感病毒株还可刺激机体产生hMPV特异性的细胞免疫应答,对hMPV和流感病毒攻击也有一定保护作用,该重组病毒株有潜在疫苗应用价值。; 李晓燕朱丛中郭丽茹孔梅邹明庄志超苏旭; 关键词：人偏肺病毒抗原表位免疫保护

天津市儿童中人偏肺病毒的流行病学及分子特征分析: 2024年; 目的分析2020年10月—2021年3月以及2021年10月—2022年3月两个流感流行季天津地区人偏肺病毒(human metapneumovirus,hMPV)的流行病学特点及全基因组特征,丰富我国hMPV的全基因组数据库。方法收集流感样病例(influenza-like illness,ILI)患者的咽拭子样本共1040例,采用微流体芯片荧光定量PCR进行检测,对hMPV阳性样本采用RT-PCR扩增其全基因组,全基因组二代测序技术进行序列测定,使用CLC、DNAStar和MEGA等生物信息学软件进行序列组装,分析其核苷酸与氨基酸同源性并绘制系统发育树。结果1040例咽拭子样本中共检出25例hMPV阳性样本,检出率为2.40%,3~5岁年龄组的检出率最高,为3.71%(16/431)。在流感流行季中,hMPV流行高峰在12月份,其检出率为6.67%(12/180)。测序成功的12株序列中有7株为B2型、4株为A2b型、1株为B1型。其中G基因变异最大,有3株A2b型的G基因中存在111nt-dup的核苷酸重复。结论天津地区流感流行季中,hMPV的流行高峰为12月份,流行株以B2型为主,除G基因变异较大之外,其他基因较为稳定。; 李蕊郭丽茹孔梅邹明刘小畅王涛高梦雪李晓燕; 关键词：人偏肺病毒系统发育分析呼吸道感染

人偏肺病毒多表位抗原的小鼠免疫应答被引量：3: 2015年; 目的：评价本实验室构建的人偏肺病毒多表位抗原（ MEA ）的免疫应答水平。方法4～6周龄雌性SPF级BALB／c小鼠分为7组：MEA＋含CpG基序的寡聚脱氧核苷酸（ oligodeoxynucle-otides containing CpG motifs ，CpG ODN）腹腔注射组i．p．，MEA＋Alum腹腔注射组i．p．，MEA＋Alum＋CpG ODN腹腔注射组i．p．，MEA＋CpG ODN滴鼻组i．n．，MEA＋Alum＋CpG ODN滴鼻组i．n．，以上5组分别于0 d、14 d、21 d免疫3次；MEA＋Quickantibody5W肌肉注射组i．m．，分别于0 d、21 d免疫2次，同时设未处理对照组，末次免疫后2周杀鼠进行相应检测。采用ELISA法检测血清IgG、IgG1、IgG2a和IgA抗体，MTS法进行淋巴细胞增殖试验，LDH法检测杀伤性T淋巴细胞杀伤活性，流式细胞仪检测CD4^＋／CD8^＋T细胞，悬浮芯片法检测脾细胞分泌细胞因子。结果 MEA免疫后除滴鼻免疫组外，其他组均产生了高滴度IgG抗体，抗体效价均＞10^4。除滴鼻免疫组外，其余各组IgG1与IgG2a抗体均显著存在。3组免疫动物血清中检测到了IgA，其中MEA＋Alum＋CpG ODN i．p．组IgA效价最高为2．15×10^3。与对照组相比，MEA＋Alum i．p．、MEA＋Alum＋CpG ODN i．p．和 MEA＋Quickantibody5W i．m．淋巴细胞增殖指数有明显增高（P＜0．05）。腹腔免疫组及MEA＋Quickantibody5W 肌肉免疫组CTL杀伤活性均明显增强（P＜0．05）。 MEA＋CpG ODN i．p组Th1型细胞因子均分泌增多，其中IL-2和IFN-γ增幅最明显，3种Th2型细胞因子分泌均明显增多。 MEA＋Alum i．p．组IFN-γ稍有增加， IL-4、IL-5、IL-10均明显增加，MEA＋Alum＋CpG ODN i．p．组IFN-γ增幅最明显，IL-4、IL-5、IL-10均明显增加。 MEA＋Quickantibody5W i．m组IFN-γ增幅最明显，IL-5、IL-10明显增加，GM-CSF也明显增加。除滴鼻免疫组外，其余各组脾细胞中CD4^＋／CD8^＋T细胞稍有增加（P＜0．05）。结论 MEA在不同佐剂作用下可产生高滴度的特异性�; 李晓燕郭丽茹孔梅邹明苏旭; 关键词：人偏肺病毒多表位抗原免疫应答

天津地区2005年甲1亚型流感病毒HA1区基因特性分析被引量：2: 2006年; 目的了解天津地区夏季一起小学校流感样暴发疫情中分离出2株甲1亚型流感病毒株HA1基因变异情况。方法MDCK细胞和鸡胚双腔法分离流感病毒,收获病毒液提取病毒的RNA,进行RT-PCR,扩增产物纯化后测序,用DNASTAR软件进行序列分析。结果新分离株HA1基因长度为325个氨基酸,与国际疫苗株A/NewCaledonia/20/99相比氨基酸同源性高于98%,氨基酸替换位点有5个,其中165位位于抗原决定簇Ca1区。结论天津地区新分离甲1亚型流感病毒抗原性发生进一步漂移,但变异程度不大。; 孔梅段卫平李晓燕李琳高璐陈锦英; 关键词：流感病毒 HA1基因

天津市2002年冬至2003年春流行性感冒病原学检测分析被引量：1: 2003年; 段卫平郭小华孔梅解晓华王世荣张晓娜周信芝路欣畅; 关键词：流行性感冒病原学流行病学

天津市520例儿童流感样病例病原谱以及流行病学特征分析被引量：3: 2022年; 目的了解2020年10月—2021年3月天津市儿童医院流感样病例的流行病学特征以及病原谱特征,为儿童流感样病例的防控以及临床诊治提供依据。方法采集哨点医院520例流感样病例患者的咽拭子标本,通过实时荧光定量PCR法对样本进行30种呼吸道病原体核酸检测,用描述性流行病学方法对病例和病原学结果进行统计学分析。结果520例样本中,共检出16种呼吸道病原体,阳性样本239份,病原体检出率为45.96%。检出率前3位的病原体依次为呼吸道合胞病毒(9.62%,50/520)、鼻病毒(9.62%,50/520)、巨细胞病毒(5.96%,31/520)。不同性别间的病原体检出率差异有统计学意义(χ2=3.919,P<0.05),男性中病原体检出率为49.67%(149/300),女性中病原体检出率为40.91%(90/220)。不同年龄组病原体检出率差异有统计学意义(χ2=6.182,P<0.05),<2岁组最高(52.91%,91/172),>4岁组最低(38.10%,40/105)。不同月份病原体检出率差异有统计学意义(χ2=15.358,P<0.05),12月(58.00%,58/100)、11月(52.50%,42/80)、1月(47.50%,38/80)检出率居于前3位。在阳性样本中,52例样本为混合感染,混合感染率为21.76%(52/239),其中鼻病毒合并其他病原体感染检出率最高(48.08%,25/52)。结论2020年10月—2021年3月天津市儿童医院流感样病例的主要病原体为呼吸道合胞病毒、鼻病毒、巨细胞病毒,混合感染率较高,易感人群为2岁以下儿童,不同月份病原体检出率不同。应加强对上述主要病原的监测及研究,为儿童呼吸道疾病的防控提供科学参考。; 刘晓曼郭丽茹孔梅邹明刘小畅李晓燕; 关键词：呼吸道病原体儿童病原谱

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