张伟
- 作品数：7 被引量：8H指数：2
- 供职机构：广州市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市医药卫生科技项目广州市卫生局医药卫生科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 正交法探索平板离心构建无载体细胞片的可行性
- 2012年
- 背景:实体器官移植目前在实验室及临床已积极展开,具有良好的治疗效果,但实体组织器官供体来源的匮乏是世界性的难题之一。目的:用平板离心技术构建细胞片以探索一种新的实体组织构建方法。方法:首先用梯度离心力对人皮肤成纤维细胞进行离心力反应和细胞即时贴壁率的探索,设计出不同离心力水平、细胞浓度及离心时间,用正交实验优选最佳离心参数,用优选所得的最佳离心条件进行稳定重复实验。用最佳离心条件进行单层细胞离心实验,自然培养组为对照组,观察离心后单层细胞的活性及增殖活力。用离心法进行多层细胞片的构建,然后进行体外培养及苏木精-伊红染色切片以观察不同层数细胞片的形成情况。结果与结论:最佳构建参数为细胞浓度9×105cm-2,离心转速2200r/min,离心时间4min,细胞种植效率可达(93.75±9.58)%;单层对照显示离心贴壁细胞增殖活性良好;苏木精-伊红染色观察显示可快速形成活性良好的细胞片。提示离心速构法形成了无支架组织,可作为一种方便、快捷、高效的实体组织工程构建方法。
- 张伟张玉平许艳丽陈晓燕
- 角膜缘干细胞缺乏是否可导致归巢因子基质细胞衍生因子1水平变化
- 2016年
- 背景:如何提高细胞移植的效率,促进来源有限、数量稀缺的角膜缘干细胞走向组织修复的第一步即归巢,是提高移植效率的关键。在视网膜色素上皮细胞的损伤修复中基质细胞衍生因子1可发挥着重要作用。目的:观察大鼠及小鼠眼局部角膜缘干细胞缺乏是否会引起外周血中归巢因子基质细胞衍生因子1质量浓度的变化,以期明确角膜缘干细胞缺乏是否会启动外周血中该因子产生变化,从而吸引外周血干细胞向角膜方向归巢。方法:剖切法制作大鼠和小鼠角膜缘干细胞缺乏模型眼,在为期1个月的观察期内连续抽取外周血,ELISA法检测基质细胞衍生因子1质量浓度。结果与结论:1大鼠外周血基质细胞衍生因子1质量浓度:在建模后24 h即发生变化,呈增长态势,在建模后第3天达到增长峰值,其后逐渐下降,但在第25天又出现1个增长峰值,较第3天的峰值低,其后恢复至正常数值;2小鼠外周血中基质细胞衍生因子1质量浓度:在建模后12 h即发生变化,呈增长态势,在建模后第3天达到增长峰值,其后逐渐下降,但在第20天又出现1个增长峰值,较第3天的峰值低,其后恢复至正常数值;3结果说明:外周血中基质细胞衍生因子1水平与角膜缘干细胞缺乏造成的损伤刺激存在一定关联,可能在干细胞迁移修复角膜损伤中起重要的作用。
- 张伟黄文志张玉平
- 关键词：干细胞角膜角膜缘干细胞角膜缘干细胞缺乏基质细胞衍生因子1国家自然科学基金
- 一种新的角膜缘干细胞分选方法被引量：2
- 2012年
- 目的用平板离心法建立一种新的角膜缘干细胞分选方法。方法用人角膜缘组织块培养法培养出角膜上皮细胞,收获细胞后用转速1400r·min-1和1800r·min-1分别将细胞用平板离心法于未包被的六孔板上进行分选。ATC1为1400r·min-1贴壁的细胞,ATC2为1800r·min-1贴壁的细胞,NAC为1800r·min-1离心力作用下漂浮而不能贴壁的细胞。分选出的三群细胞采用免疫组织化学、克隆形成实验、Ki67流式细胞仪进行分析。结果细胞计数显示用转速1400r·min-1筛选出的ATC1占总体细胞量的(11.32±2.46)%。在离心速度为1800r·min-1时,筛选出ATC2为(18.55±2.79)%,而NAC则为(68.29±4.07)%。ATC1表达角膜缘干细胞标志ABCG2、p63,而不表达角膜上皮细胞分化标志K3。ATC2较少表达ABCG2和p63,大部分表达K3。NAC则不表达ABCG2、p63,而几乎完全表达K3。在这三群细胞中ATC1细胞群具有最强的细胞增殖活性,其克隆形成率和Ki67阳性细胞检测率分别为(3.90±0.17)%和(56.78±2.39)%。ATC2克隆形成率和Ki67阳性细胞检测率分别为(2.48±0.19)%和(9.67±1.88)%。NAC克隆形成率和Ki67阳性细胞检测率分别为(0.84±0.89)%和(4.76±0.57)%。结论平板离心法是一种新的角膜缘干细胞的分选方法。ATC1、ATC2和NAC可能分别为角膜缘干细胞、短暂扩充细胞和终末分化细胞。
- 张伟杨为中金敏高宗银陈晓燕许艳丽张玉平
- 关键词：人角膜上皮细胞角膜缘干细胞
- 广州市70岁以上体检者视力升高原因调查分析
- 2018年
- 目的本研究就70岁以上老年干部体检者视力提高原因展开调查分析,以期为老年人乃至广大普通人群的视力改善和视力维持方面的预防保健工作提供基础资料和理论依据。方法对2014—2015年我院接诊的广州市部分老年干部,分70~79岁、80~89岁、90~99岁这三个年龄组为研究对象,选择视力升高者进行回顾性调查分析。结果 375例70~79岁年龄段干部视力升高者62例,占16.53%,男性15.33%,女性19.8%;464例80~89岁年龄段干部视力升高者64人,占27.54%,男性13.84%,女性13.7%;34例90~99岁年龄段干部,视力升高3人,占20.15%,男性4.76%,女性15.39%。在视力升高原因上,运动保健法占据了三个年龄组的第一位,提示了运动保健的重要性。口服中药,保健品,局部滴用眼药水,保持身心愉快等也起到了非常重要的作用。老年女性较老年男性更注重眼部保养保健工作。结论视力提升方法在老年人和普通人眼科预防保健中意义重大,可以有预见性和针对性的维持乃至提高有用视力,提升老年人乃至广大人群的整体健康水平。
- 张伟陈金容李华平冉隆梅
- 关键词：体格检查干部保健视力
- 阻断促红细胞生成素抑制小鼠视网膜新生血管生成被引量：6
- 2015年
- 目的：建立C57BL/6小鼠氧致血管增生性视网膜病变模型（oxygen induced retinopathy,OIR）,探讨阻断促红细胞生成素（Erythropoietin,EPO）对视网膜新生血管的抑制作用。方法：取鼠龄7d（P7）的健康C57BL/6小鼠置于75%±2%氧气浓度的密闭氧舱中5d,鼠龄12d（P12）时返回正常空气环境以建立氧诱导鼠视网膜新生血管模型;新生小鼠于P12~P16隔日给予玻璃体腔内注射0.5μL含有25ng（A组）,50ng（B组）,250ng（C组）可溶性EPO受体的PBS液以及不含EPO受体的PBS液（D组）。于P17时分批处死各组小鼠,小鼠眼球以4%多聚甲醛固定,制成病理切片,进行视网膜组织形态病理学观察计数突破内界膜新生血管细胞核数,了解视网膜新生血管增生程度。结果：计数病理切片突破内界膜新生血管细胞核数目,各组玻璃体内EPO受体注射组较PBS注射组新生血管细胞核数明显减少,差异有统计学意义（P〈0.01）。并且各不同浓度EPO受体组间新生血管细胞核计数差异亦有统计学意义（P〈0.01）,随着EPO受体浓度增高,突破内界膜新生血管内皮细胞数减少。结论：可溶性EPO受体玻璃体腔内注射能够阻断EPO的促新生血管生成作用,有望成为治疗眼部新生血管性疾病的新方法。
- 黄文志李倩庆王露张伟
- 关键词：视网膜新生血管促红细胞生成素
- 归巢因子基质细胞衍生因子1/CXCR4在角膜上的分布
- 2015年
- 背景:基质细胞衍生因子1/CXCR4在介导骨髓移植等组织器官的干细胞归巢中起着重要的作用。对于角膜干细胞移植的归巢和目前角膜上基质细胞衍生因子1/CXCR4的具体分布及含量较为少见。目的:荧光定量PCR检测大鼠角膜组织中基质细胞衍生因子1/CXCR4基因mR NA的表达水平。方法:取完整正常大鼠角膜组织,细分为角膜中央区,角膜旁中央及角膜缘区,用荧光定量PCR法(染料法)检测相应部位基质细胞衍生因子1/CXCR4基因mR NA的表达水平。结果与结论:角膜中央区基质细胞衍生因子1及CXCR4基因mR NA的表达水平分别为0.213±0.015,0.189±0.02;角膜旁中央区基质细胞衍生因子1及CXCR4基因mR NA的表达水平分别为0.529±0.077,0.285±0.015;角膜缘区基质细胞衍生因子1及CXCR4基因mR NA的表达水平分别为0.666±0.069,0.258±0.067。结果表明,在大鼠角膜组织中,角膜中央区,周边区及边缘区相应基质细胞衍生因子1及CXCR4的基因mR NA的表达水平均存在着显著性的差异,这种差异性对于角膜缘干细胞缺乏症干细胞移植治疗中细胞的归巢及移行起着重要的作用。
- 张伟黄文志张玉平
- 关键词：角膜归巢SDF-1/CXCR4荧光定量PCR
- 原子力显微镜在平板离心法筛选的人角膜缘上皮细胞研究中的应用
- 2012年
- 目的用原子力显微镜研究平板离心法筛选出的三群角膜缘上皮细胞,确定细胞的类型。方法用人角膜缘组织块培养法原代培养出角膜缘上皮细胞,收获细胞后将细胞置于未包被的六孔板上1400r.min-1和1800r.min-1进行离心分群。ATC1为1400r.min-1离心后贴壁的细胞,ATC2为1800r.min-1离心后贴壁的细胞,NAC为1800r.min-1离心后漂浮而不能贴壁的细胞。用BrdU标记延迟实验和原子力显微镜来分析这三群细胞。结果在三群细胞中ATC1几乎全被BrdU标记延迟,占分选前总体细胞的10.14%±1.21%。原子力显微镜显示ATC1、ATC2和NAC的细胞形态和细胞膜表面有显著的差异。整体细胞粗糙度在ATC1、ATC2和NAC中分别为(20.91±1.42)nm、(80.37±3.43)nm和(102.94±4.52)nm,核部位膜的粗糙度分别为(33.79±1.66)nm、(13.12±0.79)nm和(8.48±0.64)nm。结论原子力显微镜是一种非常好的区分和观察三群细胞的方法。BrdU标记延迟实验和原子力显微镜分析参数表明ATC1、ATC2和NAC可能分别为角膜缘干细胞、短暂扩充细胞和终末分化细胞。
- 张伟杨为中金敏高宗银陈晓燕许艳丽张玉平
- 关键词：原子力显微镜人角膜缘干细胞
