孙平杰
- 作品数：7 被引量：6H指数：2
- 供职机构：延边大学农学院更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 瑟氏泰勒虫p23与牛IL-18复合基因真核表达载体的构建与瞬时表达被引量：2
- 2015年
- 为构建瑟氏泰勒虫p23-IL-18复合基因真核表达质粒,以pMD-18T-p23和pMD-18T-IL-18克隆质粒为模板,应用重组PCR技术得到瑟氏泰勒虫p23-IL-18复合基因,将其先克隆到pMD-18-T载体,再亚克隆到真核表达载体pVAXⅠ中,得到重组质粒pVAXI-P23-IL-18。对该重组质粒进行PCR、酶切鉴定及测序后,采用脂质体法将其转染到BHK-21细胞,用RT-PCR和IFA进行鉴定。结果表明,瑟氏泰勒虫p23-IL-18复合基因真核表达质粒pVAXIP23-IL-18构建成功,可在BHK-21细胞中表达。本试验为p23-IL-18复合基因的免疫学研究奠定了基础。
- 孙平杰宋建臣李海峰许应天
- 关键词：瑟氏泰勒虫真核表达
- 牛瑟氏泰勒虫p23-IL-18融合基因的原核表达
- 制备牛瑟氏泰勒虫病基因工程亚单位疫苗,根据GenBank上发表的牛瑟氏泰勒虫P23表面蛋白基因序列及黄牛IL-18基因序列,设计两对特异性引物,通过重组PCR技术将两段基因拼接后克隆到pMD-18-T载体,经过PCR、酶...
- 孙平杰海旭南孙静许应天
- 关键词：基因疫苗融合基因原核表达
- 延边黄牛白细胞介素18基因的克隆及序列分析
- 2012年
- 本试验旨在扩增延边黄牛白细胞介素18(IL-18)全长cDNA,并对其序列进行进化分析。根据GenBank中已公布的牛IL-18cDNA序列设计1对引物,利用RT-PCR从刀豆蛋白(ConA)和植物分裂素(PHA)双重刺激36h活化的延边黄牛脾淋巴细胞中扩增出牛IL-18全长cDNA,进行PCR、酶切和测序鉴定,并做进化分析及二级结构预测。扩增出延边黄牛IL-18全长cDNA,大小为760bp,其中有两个氨基酸突变。进化分析结果显示,延边黄牛IL-18与牛、山羊、绵羊、马和猪的同源性较高,均大于90%,与同种群牛的同源性最高,而与原鸡的同源性最低,为51.1%。本研究确定了IL-18的种群差异,并预测了二级结构特性,为进一步研究延边黄牛IL-18的基因表达、生物活性及其作为佐剂的应用奠定了基础。
- 张立霞高旭宋建臣孙平杰夏晓辉许应天
- 关键词：RT-PCR进化分析
- 牛瑟氏泰勒虫套式PCR检测方法的建立及初步应用被引量：3
- 2010年
- 根据GenBank上发表的牛瑟氏泰勒虫P33基因序列设计2对特异性引物,建立套式PCR检测方法。该方法与弓形虫RH株、猪附红细胞体和犬新孢子虫均无交叉反应,能检测到的最低DNA量为15 fg。在75份临床样本检测中,62份为阳性,阳性率为82.7%。由此可见所建立的套式PCR检测方法具有较高的敏感性和特异性,可用于牛瑟氏泰勒虫急性感染和隐性感染的早期诊断,为该病的临床检测、流行病学调查、进出口检疫和实验室研究提供了新的技术手段。
- 杨兴许应天白雪梅沈岩孙平杰Ying-tianXue-meiPing-jie
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫套式PCR检测方法猪附红细胞体犬新孢子虫
- 牛瑟氏泰勒虫p33双拷贝基因的真核表达
- 2011年
- 为构建牛瑟氏泰勒虫p33双拷贝基因真核表达质粒,以牛瑟氏泰勒虫基因组DNA为模板,应用SOE-PCR技术得到牛瑟氏泰勒虫p33双拷贝基因,将其先克隆到pMD18-T-Simple载体,再亚克隆到真核表达载体pVAX1中,得到重组质粒pVAX1-2p33。对该重组质粒进行PCR、酶切鉴定及测序后,采用脂质体法将其转染到BHK-21细胞,用RT-PCR和IFA进行鉴定。结果表明,牛瑟氏泰勒虫p33双拷贝基因真核表达质粒pVAX1-2p33构建成功并可以在BHK-21细胞中表达。本试验结果为p33双拷贝基因的免疫学研究奠定了基础。
- 杨兴许应天严昌国高旭孙平杰张丽霞
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫真核表达
- 牛瑟氏泰勒虫双拷贝p23表面蛋白基因真核表达
- 2011年
- 为构建牛瑟氏泰勒虫双拷贝p23表面蛋白基因真核表达质粒,根据GenBank牛瑟氏泰勒虫p23表面蛋白基因序列(D84447),分别设计2对特异性引物,利用全血基因组DNA提取试剂盒提取牛瑟氏泰勒虫基因组DNA,采用SOE-PCR技术构建双拷贝p23基因,克隆到pMD-18一T载体上,经过PCR、酶切鉴定及测序后,亚克隆到pVAX-I真核表达载体上,经过鉴定后采用脂质体法将重组质粒pVA XI-2p23转染到BHK-21细胞,用IFA和RT-PCR来鉴定目的基因的表达情况.结果表明,成功构建了牛瑟氏泰勒虫双拷贝p23表面蛋白基因真核表达质粒,并在BHK-21细胞中获得表达.
- 孙平杰夏晓辉丁晓双许应天
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫
- 牛瑟氏泰勒虫p23表面蛋白基因与牛白细胞介素18基因在原核和真核细胞中的串联表达
- 牛瑟氏泰勒虫病是由泰勒科、泰勒属的瑟氏泰勒虫（Theileria sergenti）寄生于牛的红细胞以及淋巴细胞内，所引起的一种血液原虫病。近年来随着养牛业的不断发展，牛瑟氏泰勒虫病的发生也呈上升趋势，严重影响相关国家的...
- 孙平杰
- 关键词：牛瑟氏泰勒虫血液原虫病真核细胞
- 文献传递
