粟盛梅
- 作品数：48 被引量：95H指数：5
- 供职机构：南华大学医学院病原生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 日本血吸虫ATP合酶脂结合蛋白样蛋白基因结构与功能分析被引量：1
- 2005年
- 目的 利用生物信息学技术对已登录的日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)中国大陆株 (chinesestrain)新基因 -ATP合酶脂结合蛋白样蛋白 (ATPsynthaselipid -bindingprotein -likeprotein)基因结构和功能进行分析。 方法 使用NCBI ,SAPS ,TMHMM 2 .0 ,PsortII ,Protscale和Scanprosite等软件对新基因的结构和功能进行分析。 结果 通过Internet在线分析和生物信息学软件分析 ,对新基因的结构和功能有了进一步的认识 ,日本血吸虫ATP合酶脂结合蛋白样蛋白基因编码 12 2个氨基酸 ,分子量为 12 .7kDa ,等电点为 9.41,为一跨膜蛋白 ,含有磷酸化位点和烷基化位点。 结论 生物信息学技术有利于日本血吸虫新基因的结构和功能研究。
- 粟盛梅肖建华胡永轩曾桥黄家芳
- 关键词：日本血吸虫生物信息学
- hDaxx与12型腺病毒E1B 55KD癌蛋白在体内外的结合反应
- 2002年
- 目的 研究 12型腺病毒 (Adenovirus12 ,Ad12 ) E1B5 5 KD癌蛋白 (Ad12 E1B5 5 KD)打破 h Daxx与急性早幼粒细胞性白血病蛋白 (promyelocytic leukemia protein,PML)在细胞核共定位的机制。 方法 构建 h Daxx原核细胞表达质粒 p QE30 / h Daxx,并在大肠杆菌 (E.coli) BL2 1中诱导表达 ,用镍—氮基三乙酸 (Ni- NTA)琼脂糖加以纯化。通过体内外共免疫沉淀反应 ,Western blot方法研究 h Daxx与 Ad12 E1B5 5 KD直接结合反应。 结果 质粒 p QE30 / h Daxx在E.coli BL2 1中成功诱导表达了 h Daxx,其 N端有 6个组氨酸分子附着 (6 His- h Daxx)。Western blot结果显示 h Daxx在体内外与 Ad12 E1B5 5 KD发生直接结合反应。 结论 表达并获得纯化的 6 His- h Daxx,h Daxx能在体内外与 Ad12 E1B5 5 KD直接结合。
- 万艳平吴移谋粟盛梅余敏君尹卫国杨长顺
- 关键词：HDAXX急性早幼粒细胞性白血病
- 沙眼衣原体pORF5蛋白致炎症反应作用及机制初步研究
- 目的：分析沙眼衣原体pORF5蛋白对炎症反应的影响,并初步探讨其分子机制。方法：构建pORF5原核表达重组体pGEX-6p/pORF5、重组体经IPTG诱导表达GST-pORF5融合蛋白,融合蛋白经蛋白酶酶切制备不含GS...
- 何战胜粟盛梅龚思露邹燕雷文波李忠玉
- 关键词：沙眼衣原体P38MAPK炎症反应
- 沙眼衣原体pORF5稳定转染HeLa细胞后宿主蛋白转录谱分析被引量：3
- 2017年
- 目的分析沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis，Ct）质粒蛋白pORF5基因对HeLa细胞蛋白质表达谱的影响，为深入研究Ct致病机制提供实验依据。方法构建pORF5基因慢病毒表达载体，与辅助质粒共转染293T细胞包装慢病毒颗粒，收集慢病毒后感染HeLa细胞，流式细胞术多次分选获得pORF5基因稳定转染的HeLa细胞系（pORF5-HeLa细胞系）和对照HeLa细胞系。采用同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术结合二维液相色谱串联质谱（2DLC-MS/MS）技术建立pORF5-HeLa细胞和对照HeLa细胞蛋白质表达谱，筛选并构建差异蛋白质表达数据库，采用qRT-PCR和Western blot方法对部分差异蛋白质进行验证。结果成功建立了稳定过表达pORF5基因的HeLa细胞系和对照细胞系；采用iTRAQ结合2D LC-MS/MS质谱技术共鉴定了314个差异表达的宿主蛋白质，其中有159个蛋白质表达上调，155个蛋白质表达下调。差异蛋白质主要涉及代谢过程、免疫应答、生物黏附等众多事件。pORF5基因转染的HeLa细胞中组蛋白H1.2C（HIST1H1C）、血红蛋白α亚基（HBA1）、帕金森蛋白（PARK7）、高迁移率族蛋白B1（HMGB1）、HMGB2的mRNA表达水平上调，而胞内氯离通道蛋白1（CLIC1）、细胞角蛋白7（KRT7）、SFN（14-3-3σ）、周期素依赖性刺激抑制因子2A（CDKN2A）的mRNA表达水平下调，Western blot证实PARK7、HMGB1蛋白表达水平增加，这些结果均与蛋白质组学结果一致。结论成功构建了pORF5基因稳定转染HeLa细胞的差异蛋白质表达谱，发现了一组受pORF5基因调控并与细胞代谢、增殖和黏附等生物学过程相关的差异表达蛋白质。提示pORF5可能通过改变宿主蛋白质的表达，影响宿主细胞生物学行为以促进Ct的生长发育。
- 戴文婷何战胜粟盛梅周洲陈超群李忠玉
- 关键词：沙眼衣原体蛋白质组学技术差异蛋白质
- 沙眼衣原体pORF5质粒蛋白激活p38MAPK和NALP3信号通路调控THP-1细胞IL-1β分泌的研究被引量：3
- 2018年
- 目的研究沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)pORF5质粒蛋白诱导THP-1细胞产生IL-1β的分子机制,为阐明Ct致病机制提供实验依据。方法将原核表达重组体pGEX-6p/pORF5转化大肠埃希菌,表达并纯化GST-pORF5融合蛋白,融合蛋白经蛋白酶酶切后制备不含GST标签的pORF5蛋白;用不同浓度的pORF5蛋白体外刺激THP-1细胞,ELISA测定不同时间IL-1β水平;分别用NALP3siRNA、ASC siRNA、Caspase-1抑制剂和p38抑制剂预处理THP-1细胞,再用pORF5蛋白刺激THP-1细胞24h,ELISA测定IL-1β含量,Real-time PCR测定IL-1β和NALP3炎性体mRNA的表达,Western blot分析Caspase-1的表达及p38磷酸化水平。结果 pORF5蛋白以剂量和时间依赖的方式刺激THP-1细胞产生IL-1β,24μg/ml pORF5蛋白刺激24h时IL-1β的表达水平达到峰值(495.1±55.5pg/ml);pORF5蛋白能促进THP-1细胞中NALP3炎性体mRNA的表达;NALP3-siRNA、ASC-siRNA及Caspase-1抑制剂预处理THP-1细胞后,IL-1β分泌量分别降低37.7%、71.3%和40.1%;p38抑制剂能降低NALP3炎性体mRNA及IL-1β分泌量(P<0.01),但抑制NALP3炎性体后p38磷酸化水平未受影响(P>0.05)。结论 pORF5质粒蛋白通过激活p38MAPK和NALP3信号通路共同调控IL-1β的产生和分泌。
- 刘安元李群聂倩陶立坚粟盛梅周洲李忠玉
- 关键词：沙眼衣原体IL-1Β
- 沙眼衣原体质粒蛋白pORF5相互作用宿主蛋白的筛选及鉴定
- 目的筛选并鉴定与沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)质粒蛋白pORF5相互作用的宿主蛋白,为深入研究Ct的致病机制提供实验依据。方法构建pORF5基因慢病毒表达载体,与辅助质粒共转染293T细胞...
- 戴文婷粟盛梅龚思璐邹燕雷文波李忠玉
- 关键词：宿主蛋白沙眼衣原体细胞系
- 文献传递
- 沙眼衣原体pORF5质粒蛋白对HeLa细胞自噬的影响
- 目的探讨沙眼衣原体质粒蛋白pORF5对HeLa细胞自噬和凋亡的影响,为进一步阐明沙眼衣原体的致病机制提供实验依据。方法 PCR扩增沙眼衣原体pORF5质粒蛋白基因,克隆入DCE慢病毒质粒构建慢病组重组表达载体,慢病毒重组...
- 杨晓玉粟盛梅龚思璐邹燕雷文波周洲李忠玉
- 关键词：DCE细胞自噬沙眼衣原体
- 文献传递
- 沙眼衣原体pORF5质粒蛋白单克隆抗体2H4的纯化及其免疫学特性研究被引量：1
- 2011年
- 目的 纯化抗沙眼衣原体pORF5单克隆抗体2H4并鉴定其免疫学特性.方法 大量培养pORF5单克隆抗体阳性杂交瘤细胞株并收集培养上清,采用G蛋白免疫亲和层析法纯化2H4单克隆抗体；酶联免疫吸附试验（ELISA）测定2H4效价及抗体亚类；Western blot鉴定其特异性；免疫荧光试验（IFA）检测2H4单克隆抗体的衣原体种属特异性.结果 纯化后2H4抗体的纯度高达93％；效价为1：1024,免疫球蛋白类型为IgG2a;2H4抗体不仅能特异性识别pORF5融合蛋白,而且能特异性识别Ct血清型A、D、L2、鼠农原体（MoPn）、鹦鹉热嗜农原体（6BC）质粒所编码的内源性pORF5蛋白,但不识别衣原体其他质粒蛋白和肺炎嗜衣原体（Cpn）.结论 获得了高纯度的能特异识别pORF5质粒蛋白的单克隆抗体,为进一步研究pORF5蛋白结构和功能以及沙眼衣原体诊断试剂盒的研制奠定了良好的基础.
- 李忠玉吴移谋黄秋林粟盛梅周洲陈超群周辉钟光明
- 关键词：沙眼衣原体单克隆抗体免疫学特性
- 沙眼衣原体质粒蛋白pORF5通过上调HMGB1诱导线粒体自噬抑制细胞凋亡
- 李忠玉雷文波卜继常粟盛梅周洲
- 沙眼衣原体pORF5蛋白激活NALP3炎性复合体和p38MAPK通路诱导THP-1细胞分泌IL-1β和IL-18
- 目的探讨沙眼衣原体pORF5蛋白对IL-1β和IL-1 8等促炎性细胞因子的诱生作用,并初步分析其分子机制。方法采用分子生物学方法制备、纯化沙眼衣原体pORF5蛋白,用3～36μg/mL不同浓度刺激THP-1细胞,并于0...
- 曹文娟杨晓玉戴文婷粟盛梅陆春雪周洲唐双阳刘良专李忠玉
- 关键词：IL-18THP-1NALP3细胞分泌沙眼衣原体
- 文献传递
