祖立闯
- 作品数：25 被引量：65H指数：6
- 供职机构：山东省滨州畜牧兽医研究院更多>>
- 发文基金：现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金国家高技术研究发展计划山东省自主创新成果转化重大专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学金属学及工艺更多>>
- 猪瘟强毒与弱毒鉴别检测方法的研究进展被引量：1
- 2015年
- 猪瘟（Classical swine fever,CSF）以前又名烂肠瘟,是由黄病毒科黄病毒属的猪瘟病毒（Classical swine fever virus,CSFV）引起猪的一种高度接触性、致死性的传染病,临床上主要以稽留高热、皮肤和黏膜出现大量出血点为主要特征。猪瘟具有高度传染性,主要通过呼吸道和消化道传播,传播速度快、发病率和死亡率高,给养猪业造成了巨大的经济损失;
- 沈志强谢金文王金良曲光刚祖立闯
- 关键词：CSFV野毒株SWINE弱毒株
- 单克隆抗体在猪瘟诊断上的应用
- 猪瘟单克隆抗体以其敏感性高、特异性强、能够识别病毒抗原结构的微小差异，同时单抗特有的理化同质性使抗原抗体反应结果便于质量控制，利于标准化和规范化等优点，在猪瘟的诊断以及强、弱毒鉴别诊断中得到了广泛应用，显示出了良好的应用...
- 李娇祖立闯沈志强唐娜王金良
- 关键词：猪瘟单克隆抗体病毒抗原
- 牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的截短表达与鉴定被引量：10
- 2008年
- 利用牛病毒性腹泻病毒(BVDV)BA株接种MDBK细胞,提取病毒RNA。参照已发表的BVDV基因组序列,利用Oligo 6生物学软件设计扩增E2基因的1对引物,引入酶切位点并去掉E2蛋白的跨膜区及疏水区。通过RT-PCR扩增了长约1 000 bp的E2基因片段,克隆到pMD18-T载体上,酶切并测序鉴定。然后将目的片段进一步定向克隆到pET30a表达载体,转化BL21表达菌。取转化菌培养,并用IPTG诱导,获得了以包涵体形式表达的重组蛋白。将重组蛋白变性、纯化和复性后,用免疫印迹与间接ELISA检测表明纯化的重组蛋白具有良好的免疫原性,为牛病毒性腹泻病毒诊断试剂的研制奠定了基础。
- 李娇薛飞朱远茂祖立闯
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒E2蛋白截短表达
- 鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白截短表达及间接ELISA抗体检测方法的建立与应用被引量：8
- 2017年
- 参照IBV S1基因序列,RT-PCR扩增长约867bp的S1基因主要抗原区域,将目的片段定向克隆到pET30α原核表达载体,转化Rossetta表达菌,经IPTG诱导后获得了以包涵体形式表达的重组S1蛋白。重组蛋白纯化后,经免疫印迹检测证明具有良好的免疫活性。以该蛋白作为包被抗原,经间接ELISA反应条件的优化,建立了检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)抗体的间接ELISA检测方法。该方法与其他6种常见禽病病毒(H5亚型禽流感病毒(H5-AIV)、H9亚型禽流感病毒(H9-AIV)、新城疫病毒(NDV)、减蛋综合征病毒(EDSV)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、鸡法氏囊病毒(IBDV))阳性血清不发生交叉反应;批内和批间重复性试验的变异系数分别小于5%和10%;相对于HI试验的符合率、敏感性、特异性分别为91.58%、91.24%和92.31%;相对于IDEXX ELISA的符合率、敏感性、特异性分别为94.55%、95.42%和92.96%;应用该方法检测山东及周边地区2 685份免疫鸡和168份未免疫鸡血清样品,免疫合格率和阳性感染率分别为85.25%和17.26%。本试验截短表达的S1蛋白具有良好的免疫活性,建立的间接ELISA抗体检测方法具有良好的敏感性、特异性、重复性和临床适用性,将为IBV的免疫抗体监测、临床野毒感染快速诊断和流行病学调查提供了一种新的血清学诊断技术,具有良好的推广应用前景。
- 苗立中祖立闯王艳马秀丽亓丽红宋敏训沈志强韩文瑜
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白截短表达活性鉴定间接ELISA
- 表达牛呼吸道合胞体病毒G蛋白基因的重组Ⅰ型牛疱疹病毒的构建与鉴定被引量：8
- 2010年
- 为构建表达牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)G蛋白基因的牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)重组病毒,本研究将人工合成的BRSV全长G蛋白基因编码序列插入到巨细胞病毒(CMV)启动子之下构建TK基因缺失转移载体。利用磷酸钙-DNA沉淀法将该转移载体与亲本病毒BHV-1/TK-/LacZ+的基因组DNA共转染牛鼻甲细胞后收获增殖的病毒。通过反向蚀斑筛选,得到重组病毒BHV-1/TK-/G+。PCR检测结果证实G蛋白基因已经插入到了亲本病毒BHV-1/TK-/LacZ+的基因组中,间接免疫荧光试验和western blot证实BHV-1/TK-/G+中的G蛋白基因在感染的细胞中获得了表达。本研究为研制BRSV及其他重要牛传染病的BHV-1病毒活载体疫苗奠定了基础。
- 冯军科朱远茂任宪刚祖立闯李娇史鸿飞高欲燃童光志薛飞
- 关键词：牛呼吸道合胞体病毒
- 表达O型口蹄疫病毒VP1基因的牛疱疹病毒1型重组病毒的构建与鉴定
- 口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的偶蹄动物的一种高度接触性传染病。FMDV能感染包括猪、牛、羊等主要家畜及其它野生动物在内的80多种动物,并能形成全球大规模流行,造成巨大经
- 任宪刚薛飞朱远茂童光志王延辉冯军科祖立闯李娇
- 文献传递
- 牛传染性鼻气管炎病毒重组gD蛋白间接ELISA的建立与应用
- 牛传染性鼻气管炎(IBR)，是由牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)引起的牛的一种急性、热性、接触性传染病。IBR被世界动物卫生组织(OIE)列为B类传染病，也是我国进境动物和国际动物贸易中规定的重点检疫对象。因此，加强IB...
- 祖立闯
- 关键词：病毒重组基因表达
- 文献传递
- 兔病毒性出血症病毒间接ELISA抗体检测试剂盒的研制及其临床应用
- 为研制一种快速的兔病毒性出血症病毒抗体检测试剂盒,本研究利用原核表达技术获得了以包涵体形式表达的重组VP60蛋白。重组蛋白纯化后,经兔疫印迹检测证明具有良好的抗原性和特异性。以该蛋白作为诊断抗原,研制了检测兔病毒性出血症...
- 祖立闯沈志强王金良
- 关键词：兔病毒性出血症病毒原核表达间接ELISA诊断试剂盒
- 文献传递
- 鉴别鸭坦布苏病毒感染动物和灭活苗免疫动物的ELISA检测试剂盒
- 本发明公开了一种鉴别鸭坦布苏病毒感染动物和灭活苗免疫动物的ELISA检测试剂盒及其检测方法，属于检测试剂盒领域。本发明的试剂盒包括：鸭坦布苏病毒E重组蛋白包被酶标板、NS1重组蛋白包被酶标板、标准阳性对照血清、标准阴性对...
- 吕素芳郭广君沈志强李峰祖立闯董炳梅
- 文献传递
- 猪链球菌2型毒力因子研究进展被引量：7
- 2012年
- 猪链球菌2型(SS2)是一种重要的人兽共患病病原菌,其主要毒力因子包括荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白、溶血素、纤连蛋白结合蛋白、谷氨酸脱氢酶等,但是这些经典的毒力因子不足以解释猪链球菌病发病的临床症状,而且毒力表型往往与实际毒力及临床症状不符。近年来随着研究的深入,鉴定出一系列毒力相关元件,主要有Sao蛋白、存在于89K毒力岛的双信号转导系统(salk-salR)、dltA基因、pgdA基因、srtA基因、Ⅳ型二肽基肽酶(dipeptidyl peptidaseⅣ,DPPⅣ)、毒力调控子R(control of virulence R,CovR)、烯醇酶(enolase)、谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GlnA)等。论文对以上毒力因子研究进展进行综述,以期为SS2毒力因子及致病机制研究提供参考。
- 吴立志王金良肖跃强李书光祖立闯伍晓雄沈志强
- 关键词：猪链球菌2型毒力因子致病机制
