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文金生: 作品数：28 被引量：27H指数：3; 供职机构：温州医科大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金温州市科技计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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丙型肝炎病毒HLA-A*1101和A*2402限制性CD8^+T细胞表位的研究被引量：2: 2014年; 目的:鉴定出丙型肝炎病毒(HCV)特异性HLA-A*1101限制性和A*2402限制性CD8+T细胞表位。方法:采用T细胞表位预测软件SYFPEITHI预测HCV特异性CD8+T细胞表位,合成HLA-A*1101限制性、A*2402限制性候选表位;建立永生化的HLA-A*1101阳性、A*2402阳性B细胞株,采用竞争性肽结合实验检测候选表位与HLA-A*1101或A*2402分子的结合力;候选表位体外分别刺激HLA-A*1101阳性或A*2402阳性HCV感染者外周血单个核细胞(PBMCs)后,采用酶联免疫斑点(ELISPOT)和细胞内细胞因子染色(ICS)实验分别检测肽特异性分泌γ-干扰素(IFN-γ)的细胞的水平和肽特异性IFN-γ+CD8+T细胞的水平。结果:5条HLA-A*1101限制性候选表位中,NS3_609(ITLTHPITK)和NS2_165(VVFSDMETK)与HLA-A*1101分子具有高结合力。3条HLA-A*2402限制性候选表位中,NS3_373(KCDELASKL)和NS5b_382(YYLTRDPTI)与HLA-A*2402具有高结合力;在HLA-A*1101阳性HCV感染者PBMCs中存在NS3_609和NS2_165特异性分泌IFN-γ的CD8+T细胞,而在HLA-A*2402阳性HCV感染者PBMCs中存在NS3_373和NS5b_382特异性分泌IFN-γ的CD8+T细胞。结论:本研究证实NS3_609(ITLTHPITK)和NS2_165(VVFSDMETK)为全新的HCV特异性HLA-A*1101限制性CD8+T细胞表位,NS3_373(KCDELASKL)和NS5b_382(YYLTRDPTI)为全新的HCV特异性HLA-A*2402限制性CD8+T细胞表位。; 钟晓芝段志良郭江龙李强王思娜李静林荣文金生; 关键词：丙型肝炎病毒 CD8+T细胞表位

登革病毒特异性HLA-A*2402限制性表位肽及应用: 本发明首次揭示一组具有较高免疫原性的登革病毒特异性HLA‑A*2402限制性表位肽。所述表位肽是登革病毒来源的，可诱导高水平的细胞毒性T淋巴细胞反应。; 文金生段志良郭江龙王思娜李静; 文献传递

EB病毒潜伏膜蛋白2B细胞表位及应用: 本发明涉及EB病毒潜伏膜蛋白2B细胞表位重组蛋白的制备及应用。本发明公开了一种以全长的EB病毒潜伏膜蛋白2为基础筛选获得的3个B细胞表位。本发明还公开了所述B细胞表位的编码核苷酸和氨基酸序列。本发明还公开了所述B细胞表位...; 张丽芳朱珊丽薛向阳李文姝文金生; 文献传递

广州市登革1型病毒基因组测序及系统进化分析被引量：1: 2009年; 目的:对引起2002年广州登革热的登革1型病毒分离株(71/02GZ)进行全基因组测序和系统进化分析。方法:采用C6/36细胞培养71/02GZ,分别采用RT-PCR,5’RACE和3’RACE扩增基因组中编码区序列、5’和3’末端非编码区序列,PCR产物克隆到载体并测序,拼接成全基因组序列,分别基于E基因序列、E/NS1连接区240 nt、基因组中10 016 nt进行系统进化分析。结果:71/02GZ株基因组全长10 735 nt,两端非编码区(NCR)长度分别为94 nt和462 nt。基于E基因序列、E/NS1连接区240 nt、基因组中10 016 nt的进化分析结果显示71/02GZ株和2002年广州分离株(GZ01/02,GZ/218/2002),1995年广东分离株(GD23/95,GD01/95)、1995年广州分离株(GZ01/95)组成一个基因型;而1999年广东分离株(GD05/99),1997年广东分离株(GD14/97)和1980年广州分离株(GZ/80)属于另一个基因型;另外,71/02GZ株同1998年印度尼西亚分离株(98901530 DF DV-1-ID)的同源性最高。结论:71/02GZ株可能是印度尼西亚输入的。; 文金生江丽芳晏辉钧; 关键词：登革病毒测序系统进化分析

结核分枝杆菌抗原特异性HLA-A*0201限制性表位肽及应用: 首次揭示一组具有较高免疫原性的结核分枝杆菌抗原特异性HLA-A*0201限制性表位肽。所述表位肽是PPE68来源的、HLA-A*0201限制性的CTL表位肽，可诱导高水平的CTL反应。; 文金生李强郭江龙李静王思娜; 文献传递

一种登革病毒通用型CTL表位DNA疫苗制备和应用: 本发明公开了一种登革病毒通用型CTL表位DNA疫苗，其是以真核表达质粒pcDNA3.1(-)为载体骨架，以Igκ链信号肽为引导序列，包含有登革病毒1型中15个高度保守的免疫优势CTL表位和1个通用型辅助性T细胞表位，各表...; 文金生段志良王思娜黄曦李静刘慧芳杨金霖; 文献传递

温州地区62例HCV感染者的基因型特征研究被引量：5: 2009年; 目的:探讨温州地区丙型肝炎病毒(HCV)感染者的HCV的基因型特征。方法:采用RT巢式-PCR法,对62例HCV-IgG阳性者进行HCV-RNA的检测及基因分型。结果:62例研究者中,HCV基因型1b单阳性率为35.48%,基因型2a单阳性率为3.23%,1b和2a双阳性率为61.29%,1b总阳性率为96.77%,2a总阳性率为50%。结论:温州地区HCV的基因型以1b型占优势,并且基因型1b和2a混合感染率较高。; 文金生段志良陈俊林荣方佩佩孟锐峰; 关键词：丙型肝炎病毒基因型聚合酶链反应

登革病毒抗原肽免疫小鼠诱导特异性CD4^+ T细胞反应: 2009年; 目的:探讨4条登革病毒抗原肽在不同遗传背景小鼠中的免疫原性。方法:4条登革病毒抗原肽(C45-57KLV-MAFIAFLRFL,E396-408SSIGKMFEATARG,NS323-35YRILQRGLLGRSQ和NS3141-155NREGKIVGLYGNGVV)中每条肽分别免疫BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠;3周后,处死小鼠并制备脾细胞悬液;不刺激或同样抗原肽刺激脾细胞后,采用细胞内细胞因子染色流式细胞术(ICS)检测小鼠脾细胞CD4+ T细胞中肽特异性产生IFN-γ或IL-4的CD4+ T细胞的百分比。结果:肽C45-57可诱导BALB/c小鼠产生特异性的IFN-γ+ CD4+ T细胞(0.72%±0.04% vs 0.04%±0.02%,P<0.05)而肽E396-408则诱导产生特异性的IL-4+ CD4+ T细胞(0.09%±0.01%vs0.01%±0.01%,P<0.05);肽E396-408、NS323-35和NS3141-155均可诱导C57BL/6小鼠产生特异性的IFN-γ+ CD4+ T细胞(分别为0.31%±0.03%vs0.02%±0.01%,P<0.05;0.21%±0.03% vs 0.04%±0.01%,P<0.05;0.44%±0.04% vs 0.02%±0.01%,P<0.05),而肽C45-57可诱导产生特异性的IL-4+ CD4+ T细胞(0.45%±0.05% vs 0.02%±0.02%,P<0.05)。结论:肽C45-57和E396-408在BALB/c小鼠中具有免疫原性而肽C45-57、E396-408、NS323-35和NS3141-155在C57BL/6小鼠中具有免疫原性。; 段志良孟锐峰文金生; 关键词：登革病毒 CD4+T细胞

登革病毒HLA-A*0201限制性T细胞表位诱导免疫反应的研究: 2016年; 目的:探讨登革病毒(DENV)HLA-A*0201限制性T细胞表位诱导DENV血清型间交叉反应性T细胞的效应。方法:基于已鉴定DENV-1中HLA-A*0201限制性CD8+T细胞表位(NS4b40-48TLYAVATTI)序列,合成在其他血清型中相似的候选表位,采用MHC-肽复合物稳定性实验检测候选表位与HLA-A*0201结合力。采用酶联免疫斑点(ELISPOT)实验研究已鉴定表位及候选表位免疫HLA-A*0201转基因小鼠产生的CD8+T细胞识别相同及相似表位能力;采用ELISPOT实验研究不同DENV血清型感染HLA-A*0201转基因小鼠是否产生能识别已鉴定表位及候选表位的T细胞反应。结果:DENV-3中NS4b39-47TLYAVATTV与HLA-A*0201具高结合力,但DENV-2中NS4b39-47TLYAVATTF与HLA-A*0201结合力弱。DENV-1-NS4b40-48和DENV-3-NS4b39-47免疫的转基因小鼠脾、淋巴结和外周血中存在可识别DENV-1-NS4b40-48、DENV-2-NS4b39-47和DENV-3-NS4b39-47的交叉反应性CD8+T细胞。在DENV-1,-2,-3感染的转基因小鼠体内也存在类似的T细胞反应。结论:DENV-3中NS4b39-47TLYAVATTV为新的CD8+T细胞表位,该表位及已报道表位NS4b40-48TLYAVATTI均可诱导DENV血清型间交叉反应性CD8+T细胞反应,二者有助于我们研究DENV血清型间交叉反应性CD8+T细胞的功能以及用于评估DENV候选疫苗的T细胞免疫效应。; 段志良李德周徐娟娟贾庆军刘慧芳陈柏坤文金生; 关键词：登革病毒交叉反应性 CD8+T细胞

一种登革病毒四价CTL表位DNA疫苗的制备及应用: 本发明公开了一种登革病毒四价CTL表位DNA疫苗，其是以真核表达质粒pcDNA3.1(-)为载体骨架，以Igκ链信号序列为引导序列，包含有一个通用型辅助性T细胞表位和登革病毒四个血清型中15条高度保守的免疫优势CTL表位...; 文金生段志良王思娜杨金霖刘慧芳陈柏坤; 文献传递

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