叶玉兰
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 供职机构：南京医科大学附属苏州医院更多>>
- 发文基金：南京医科大学科技发展基金江苏省自然科学基金江苏省基础研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 克罗恩病患者粪便具核梭杆菌与钙卫蛋白相关性研究被引量：4
- 2020年
- 背景:具核梭杆菌(Fn)是一种常见的肠道细菌,其可能作为条件致病菌参与了炎症性肠病(IBD)的发生。目前尚缺乏IBD患者肠道Fn的定量数据。目的:建立绝对定量real-time PCR方法,检测克罗恩病(CD)患者的粪便Fn,分析其与CD炎症指标的相关性。方法:收集苏州市立医院57例CD患者和41例健康体检者的粪便样本,提取基因组DNA。构建Fn菌株ATCC 25586特异的nusG(transcription antitermination protein)基因至pUC57质粒,作为标准品,以SYBR Green real-time PCR法检测梯度稀释的标准品质粒,建立绝对定量标准曲线。评价该检测方法的敏感性、特异性和稳定性,并以之检测CD患者和健康对照者的粪便Fn丰度,分析Fn丰度与粪便钙卫蛋白(FC)、C反应蛋白(CRP)和红细胞沉降率(ESR)的相关性。结果:本研究建立的粪便Fn绝对定量real-time PCR方法敏感性高、特异性强、稳定性好。CD患者粪便Fn检出率和丰度均显著高于健康对照者(P=0.034;P=0.039),且Fn丰度与FC水平呈显著正相关(r=0.459,P=0.011)。结论:本研究建立的绝对定量real-time PCR方法可用于人粪便样本Fn丰度检测。苏州地区CD患者粪便Fn检出率和丰度显著升高,Fn丰度与炎症活动度指标FC相关。
- 邢晔陈胡彤徐丽娟张丽平叶玉兰庞智尹娟
- 关键词：CROHN病具核梭杆菌粪便钙卫蛋白实时聚合酶链反应
- 血浆微小核糖核酸155在溃疡性结肠炎中的表达和意义被引量：4
- 2013年
- 目的探讨UC患者外周血血浆中微小核糖核酸（miRNA）155浓度的诊断价值，及其与UC临床特征的相关性。方法选取2010年10月至2012年8月确诊的UC患者136例，以同期170名健康体检者作为健康对照。抽取人选者全血，分离提取血浆，按照miRNeasy试剂盒说明用吸附柱提取RNA，用miSeript反转录试剂盒将其反转录为cDNA，用miScriptSYBRGreenPCR试剂盒以cDNA为模板进行miRNAl55实时荧光定量PCR。以2-法计算miRNAl55的相对表达量。组间均数比较行方差分析，miRNAl55浓度对UC诊断的价值行ROC曲线分析，miRNA155浓度与UC临床特征的关系行多元线性回归分析。结果UC患者的血浆miRNA155浓度[（1357．43±326．15）{mol／L]高于健康对照者[（1140．70±312．47）fmol／L]，差异有统计学意义（F=35．56，P〈0．01）。血浆miRNA155浓度的UCROC曲线下面积为0．847，95％CI为0．80640．888，P〈0．01。当血浆miRNA155浓度为1404．51fmol／I．时，其对UC诊断的特异度为94．7％，敏感度为40．4％。血浆miRNAl55浓度与UC患者疾病活动性有关（F：12．91，P〈0．05），与疾病严重程度和病变部位无关（P均〉O．05）。结论UC患者血浆中miRNA155高表达，其浓度与UC疾病活动性有关。
- 叶玉兰庞智周春立郑家驹
- 关键词：微RNAS结肠炎溃疡性聚合酶链反应ROC曲线
- 苏州地区初发克罗恩病患者粪便真菌菌群结构研究被引量：2
- 2020年
- 背景:克罗恩病(CD)的发病机制目前尚不明确,研究表明肠道微生物在其中起重要作用。目的:研究苏州地区CD患者粪便真菌菌群结构变化及其与疾病间的关联。方法:纳入苏州地区初发CD患者23例和健康对照者18例,采集粪便样本提取基因组DNA,PCR扩增ITS1片段构建克隆文库,HiSeq平台测序,基于OTU行样本物种多样性分析和组间物种差异分析,并进一步分析在CD患者中丰度上调的真菌与炎性指标CRP、ESR、粪便钙卫蛋白和CD活动指数(CDAI)的相关性。结果:CD患者粪便样本中的真菌物种多样性显著小于健康人。从门、纲、目、科、属、种各水平分析,CD患者粪便中丰度显著上调的真菌为酵母纲(Saccharomycetes)、酵母目(Saccharomycetales)、位置未定科(Incertae_sedis)、念珠菌属(Candida)、白念珠菌(Candida albicans),新增真菌为丝孢酵母目(Trichosporonales)、丝孢酵母科(Trichosporonaceae),丰度显著下调的真菌为节担菌纲(Wallemiomycetes),缺失真菌为球囊菌门(Glomeromycota)、球囊菌纲(Glomeromycetes)、球囊霉科(Glomeraceae)、路德酵母属(Lodderomyces)、中间念珠菌(Candida intermedia)、念珠菌(Candida sp)。CD患者粪便白念珠菌丰度与粪便钙卫蛋白呈显著正相关(r=0.557,P=0.031)。结论:CD患者肠道真菌菌群与健康人相比发生显著结构变化,真菌物种多样性减小,条件致病真菌如白念珠菌丰度增加,可能参与了疾病进程。
- 尹娟胡彤徐丽娟张丽平叶玉兰庞智
- 关键词：CROHN病白念珠菌ITS1粪便钙卫蛋白
- 微小RNA-155在炎症性肠病中的表达及意义被引量：3
- 2017年
- 目的观察微小核糖核酸（microRNA）-155在炎症性肠病（IBD）患者组织及血浆中的表达，探讨其对该病的诊断价值及临床意义。方法采用实时定量PCR检测20例克罗恩病（CD）患者、21例溃疡性结肠炎（UC）患者、18例IBP类型待定（IBDU）患者和作为对照的25名健康人、12例感染性肠炎患者、19例缺血性肠病患者的肠黏膜组织及血浆循环microRNA-155的表达，用受试者工作特征（ROC）曲线下面积分析其对IBD的诊断价值。结果在CD组、UC组、IBDU组中，肠黏膜microRNA-155的表达均高于对照组，其中UC组的相对表达量高于CD组（35．4±3．0比18．6±5．9，P〈0．01），IBDU组的相对表达量高于CD组（23．0±3．7比18．6±5．9，P〈0．05），UC组的相对表达量高于IBDU组（35．4±3．0比23．0±3．7，P〈0．01）。血浆中microRNA．155的表达在UC组、IBDU组中高于对照组，两者的相对表达量分别为55．6±2．5、48．1±6．2（P〈0．05），而在CD组中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。在肠黏膜组织中microRNA-155表达的ROC曲线下面积为0．83（95％CI：0．679～0．986，P〈0．01）。肠黏膜组织中microRNA-155对IBD诊断的灵敏度为68．4％，特异度为78．6％。结论microRNA-155的表达在IBD患者的组织及血浆中均不同程度的高于对照组，可作为IBD诊断的分子标志物，并提示miRNA-155可能参与了IBD的发生、发展过程。
- 叶玉兰庞智顾頠郑家驹
- 关键词：炎症性肠病CROHN病核酸类
- MicroRNA570通过Wnt/β-catenin通路抑制人结肠癌HT-29细胞的增殖及调控机制
- 2014年
- 目的:探讨microRNA570(miR-570)对人结肠癌细胞株HT-29生物学特性的影响,并阐明其对Wnt/β-catenin通路的影响机制.方法:将miR-570 mimics转染人结肠癌细胞株HT-29后,采用cell counting(CCK-8)法检测细胞增殖变化,应用实时定量PCR技术检测转染后HT-29细胞中miR-570的表达,Western blot技术及实时定量PCR技术检测各组中胞核及胞浆内β-catenin的变化,及对Wnt/β-catenin通路下游基因c-myc、cyclinD1和survivin表达的影响.结果:HT-29细胞转染miR-570 mimics后,HT-29细胞增殖能力下降,72 h细胞增殖抑制率最为明显,约为53.23%±1.22%(P<0.05).实时定量PCR结果显示miR-570表达上调20倍(20.01±0.32)(P<0.05).Western blot技术及实时定量PCR技术检测显示,β-catenin、c-myc、cyclinD1和survivin蛋白表达和mRNA表达均下降(P<0.05),而空白对照组与阴性对照差异无统计学意义.Western blot结果进一步证实胞核内β-catenin的蛋白表达量下降明显,而胞浆内,β-catenin的蛋白表达量无明显变化.结论:miR-570能明显抑制人结肠癌细胞株HT-29的增殖,并下调Wnt相关基因的表达,其可能作为抑癌基因参与Wnt/β-catenin信号通路的调节.
- 叶玉兰周春立庞智郑家驹
- 关键词：HT-29Β-CATENINWNT
- 血浆白细胞介素9对生物制剂治疗后炎性肠病患者黏膜愈合的诊断及评估价值被引量：3
- 2023年
- 目的探讨血浆白细胞介素9(IL9)对生物制剂治疗后的炎性肠病(IBD)患者黏膜愈合的诊断及评估价值。方法随访研究。前瞻性选取2019年9月至2022年1月在南京医科大学附属苏州医院(苏州市立医院)就诊的137例IBD患者,分别使用生物制剂英夫利昔单抗(IFX,56例)、阿达木单抗(ADA,20例)、乌司奴单抗(UST,18例)和维得利珠单抗(VDZ,43例)治疗;根据治疗药物不同,分为IFX组、ADA组、UST组和VDZ组。每8周评估1次(包括临床症状、炎症指标、影像学检查等),第54周时行内镜评估黏膜愈合程度。ELISA法检测入组时(W 0)和生物制剂治疗8周(W 8)后血浆IL9的表达量。受试者工作特征(ROC)曲线评估IL9对黏膜愈合的诊断效能。根据约登指数的最高值选择最佳ROC曲线阈值的截止值。Spearman等级相关分析IL9与克罗恩病简化内镜评分(SES⁃CD评分)、梅奥内镜评分(MES评分)间的相关性,以评估W 0和W 8时IL9对生物制剂治疗54周时的IBD患者黏膜愈合的预测价值。结果137例患者中,有97例克罗恩病(CD)患者,男53例,女44例,年龄(31.6±10.3)岁(18~60岁);有40例溃疡性结肠炎(UC)患者,男22例,女18例,年龄(37.5±14.7)岁(18~67岁)。CD患者中,42例患者(43.3%)第54周内镜检查提示黏膜愈合;60例(61.9%)获得临床缓解。UC患者中,22例(55.0%)达到黏膜愈合;30例(75.0%)获得临床缓解。W 0时,黏膜愈合的CD和UC患者的IL9相对表达量均低于未愈合的患者[x±s,分别为(127.42±34.43)比(146.82±45.64)ng/L,(113.01±44.88)比(146.12±48.66)ng/L,均P<0.05]。W 8时,黏膜愈合的CD和UC患者的IL9相对表达量均低于未愈合的患者(均P<0.05)。IFX治疗后黏膜愈合的患者的IL9相对表达量低于未达到黏膜愈合的患者(P<0.05);其他治疗组患者黏膜愈合与未愈合间的差异均无统计学意义(均P>0.05)。W 8时IL9对预测IBD黏膜愈合具有较高的预测价值[CD患者:ROC曲线下面积(AUC)=0.716(95%CI:0.616~0.817,P<0.001),灵敏度和�
- 叶玉兰胡彤徐丽娟张丽平尹娟余强庞智
- 关键词：炎性肠病克罗恩病生物制剂白细胞介素9黏膜愈合
- 克罗恩病中过表达的hsa_circRNA_103124下调FGF18抑制巨噬细胞样M2极化
- 2023年
- 背景:克罗恩病(CD)作为炎症性肠病的类型之一,慢性反复发作,严重影响患者生命质量,其发病机制目前并不明确。目的:通过研究CD中过表达的hsa_circ RNA_103124对下游基因表达的影响,比较hsa_circ RNA_103124及其下游基因在CD与健康对照组中的表达差异,探讨hsa_circ RNA_103124在CD发生、发展中的作用机制。方法:通过转录组测序,发现佛波酯(PMA)诱导巨噬细胞样极化hsa_circ RNA_103124过表达的THP1细胞株中差异表达的基因。以白细胞介素(IL)-4诱导hsa_circ RNA_103124过表达的THP1细胞巨噬细胞样M2极化,流式细胞术检测M2极化标志物CD206和CD163水平,q PCR检测hsa_circ RNA_103124及其下游基因表达。q PCR检测30例CD患者和30名健康对照者外周血单个核细胞中hsa_circ RNA_103124及其下游基因m RNA表达。结果:Hsa_circ RNA_103124过表达且PMA诱导极化的THP1细胞株中,成纤维细胞生长因子18(FGF18)低表达(P<0.01)。Hsa_circ RNA_103124抑制巨噬细胞样M2极化,CD206和CD163表达下调(P<0.05,P<0.01)。Hsa_circ RNA_103124过表达且M2极化的THP1细胞中,FGF18和CC趋化因子配体2(CCL2)表达下调(P<0.05,P<0.01)。CD患者外周血单个核细胞中hsa_circ RNA_103124表达上调(P<0.05),FGF18和CCL2表达下调(P<0.01,P<0.05)。结论:CD患者外周血中过表达的hsa_circ RNA_103124通过下调FGF18和CCL2表达,抑制巨噬细胞样M2极化,可能在CD发生、发展中起促进炎症的作用。
- 杨天毅叶玉兰胡彤庞智尹娟
- 关键词：CROHN病巨噬细胞趋化因子CCL2
- 活动期克罗恩病患者外周血高表达的hsa_circRNA_103124调控巨噬细胞分化、焦亡和炎症的机制被引量：1
- 2023年
- 目的研究活动期克罗恩病(CD)患者外周血单个核细胞(PBMC)中高表达的环状RNA分子103124(hsa_circRNA_103124)在巨噬细胞分化、焦亡和炎症中的作用及相关机制。方法回顾性选取2018年4至9月南京医科大学附属苏州医院收治的活动期CD患者(CD组)和2018年7至10月该院体检中心健康体检人群(对照组),通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测两组PBMC中hsa_circRNA_103124和Toll样受体4(TLR4)的水平。使用人单核细胞白血病细胞株(THP1)作为hsa_circRNA_103124调控巨噬细胞分化的研究模型。慢病毒感染构建hsa_circRNA_103124过表达或下调表达THP1细胞稳转株,诱导巨噬样分化,根据hsa_circRNA_103124的表达水平,将THP1细胞株分为以下4组:pLC5-ciR为过表达对照组;hsa_circRNA_103124 OE为过表达组;ShRNActrl为下调表达对照组;hsa_circRNA_103124 ShRNA为下调表达组。流式细胞术检测分化簇(CD)68、CD80、白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平及活性氧(ROS)生成水平。RT-qPCR检测IL-6、TNF-α、IL-1β、TLR4和髓样分化因子88(MyD88)水平。免疫荧光、RT-qPCR检测焦孔素D(GSDMD)、IL-18、热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)水平。采用Pearson相关法分析hsa_circRNA_103124的丰度和TLR4表达水平或克罗恩病活动指数(CDAI)的相关性。结果CD组共纳入50例患者,男36例,女14例,年龄(35±10)岁(19~64岁);对照组共纳入30名,男22名,女8名,年龄(38±9)岁(24~64岁)。CD组PBMC中hsa_circRNA_103124[(0.009±0.016)比(0.003±0.002),P=0.042]和TLR4[(0.005±0.003)比(0.001±0.001),P<0.001]的水平均高于对照组,且hsa_circRNA_103124和TLR4的水平呈正相关(r=0.40,P=0.004)。hsa_circRNA_103124水平与CDAI呈正相关(r=0.32,P=0.024)。CD68(P=0.002)和CD80(P<0.001)的表达均增强。巨噬样M1型分化的THP1细胞中,hsa_circRNA_103124可促进ROS生成及IL-6、TNF-α、IL-1β、TLR4、MyD88、GSDMD、IL-18和NLRP3等表达(均P<0.05)。结论活动期CD患者PBMC中高表达的h
- 尹娟胡彤徐丽娟张丽平叶玉兰庞智
- 关键词：炎性肠疾病克罗恩病炎症
