郑宏大
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人白细胞介素-2在大肠杆菌高效表达及其纯化与鉴定被引量：7
- 1995年
- 研究了各种因素对IL-2表达的影响,发现(1)在本工作的条件下,消除IL-2基因3′端的部分非翻译区,能提高IL-2的表达效率;(2)IL-2基因终止密码子与终止信号间的距离对表达有影响,增加此距离(D)会大大降低IL-2表达效率;(3)启动子P_L与P_R串联与否对表达效率无关重要,即带P_R cIts857 P_L元件与带clts857 P_R P_L元件对表达IL-2的效率基本一致;(4)目的基因与选择基因的表达方向对表达IL-2的效率也无影响。在此基础上构建了高效表达的质粒(pLY-4),由它产生的IL-2达到菌体总蛋白的30％～40％,表达γ-干扰素时,可达60％～80％。还建立了简易迅速纯化IL-2的方法,分离包涵体后可达80％纯度,以后再用一步分子筛柱层析即可得到95％以上纯品。
- 虞建良范佩芳郑宏大孙兰英王子轩郑仲承李伯良陈寅唐建伟刘新垣
- 关键词：人白细胞介素-2大肠杆菌基因表达
- 合成的人γ-干扰素cDNA在大肠杆菌的高效表达被引量：5
- 1994年
- 合成了人γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）ｃＤＮＡ其特点是选用了大肠杆菌偏爱密码子，将合成基因克隆到含ＰＬ启动子的不同表达载体中，共获得９种不同的表达质粒，它们的ＳＤ与起始密码子ＡＴＧ间的距离（Ｄ）不同，在起始翻译区（ＴＩＲ）的最小自由生成能△Ｇ°ｆ２９８不同，故其表达量的差异也大，其中ｐＬＹ４－γ５表达的ＩＦＮ－γ的量占菌体总蛋白的６０％－８０％，为国际上所罕见。表达高的原因是由于选择（Ｄ）距离适当。
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- 关键词：基因表达CDNA大肠杆菌
- 干扰素作用机理的研究——Ⅺ.2′-5′三腺苷酸对巨噬细胞中cAMP和cGMP含量的影响
- 1989年
- 本研究首次证实了干扰素的作用介质pppA 2'p5'A2'p5'A(2'-5'P_3A_3)能引起巨噬细胞中cGMP,cAMP含量的变化。发现不同浓度的2'-5'P_3A_3和同一浓度的不同作用时间,对细胞内两种环核苦酸的含量有不同的影响。2'-5'P3_A_3的最终浓度在1×10^(-7)—1×10^(-6)mol/L时,可以引起细胞内cGMP显著升高,而使cAMP达到高峰的2'-5'P_3A_3浓度则为1×10^(-7)mol/L。细胞中cGMP与cAMP出现高峰的时间也显著不同,cGMP出现高峰的时间是在加入2'-5'P3_A_3以后15min,而cAMP出现高峰时间则在保温2h之后。上述结果提示,cGMP与cAMP可能与2'-5'P_3A_3受体发挥作用有某种关系。
- 尹桂山杜秀全王桂香王学孟张牧霞赵文政陈寅郑宏大姚曼华刘新垣
- 关键词：干扰素巨噬细胞
- 基因工程人白细胞介素-2的生物功能研究
- 1991年
- 重组白细胞介素-2(rIL-2),能维持T-淋巴细胞及CTLL-2细胞株(IL-2依赖)的增殖达一个月之久,细胞总数增加了近千倍。这种作用能被rIL-2专一的单克隆抗体破坏,显示rIL-2的专一性;rIL-2能增加天然杀伤细胞(NK)的活动达46—96%,但其剂量太高时反而起抑制作用;它能诱异淋巴因子激活的杀伤细胞(Lymphokine Activated Killer,LAK)的生成,它还能杀伤转移性人肺癌细胞及抗NK的HL-60癌细胞株,其杀伤效率达37.96—54.84%。这说明我们获得的rIL-2在上述生物功能方面与天然IL-2相似。
- 刘新垣虞建良郑宏大陈寅沈菊芳冯作化陈兆聪尤丽芳孙邦华周瑶玺姚堃常经丽臧人杰唐思伦张叔人张友会姜廷芳沈优君
- 关键词：基因工程生物功能
