武帅钦 作品数:7 被引量:8 H指数:2 供职机构: 哈尔滨医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 黑龙江省教育厅科学技术研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
人腺病毒3型感染对H9c2细胞microRNA表达谱的影响 被引量:1 2009年 目的研究腺病毒感染对大鼠心肌来源的H9c2细胞microRNA表达谱的影响。方法用人腺病毒3型(Ad3)攻击成层和未成层的H9c2细胞,6h后收获总RNA,基因芯片检测microRNA表达谱。结果比较未成层与成层的H9c2细胞microRNA的表达谱,H9c2细胞成层后有54种microRNA表达显著下调,7种microRNA表达显著上调。与未感染病毒的细胞比较,Ad3感染的未成层H9c2细胞有41种microRNA表达显著下调,12种microRNA表达显著上调。与未感染病毒的细胞比较,Ad3感染成层H9c2细胞后有8种microRNA的表达显著下调,62种microRNA的表达显著上调。结论细胞不同的生长状态及Ad3感染显著改变了H9c2细胞的microRNA表达谱。 林乐勋 赵文然 佟雷 武帅钦 刘慧敏 刘惠彬 栾天 王博 马倩倩 钟照华关键词:人腺病毒 H9C2细胞 心肌炎 表达海肾荧光素酶的重组柯萨奇病毒B组3型质粒的构建及鉴定 2015年 目的 构建能表达荧光素酶的重组柯萨奇病毒B组3型(coxsackievirus B3,CVB3),以实现定量检测CVB3.方法 将荧光素酶基因克隆至CVB3基因组开放读码框起始位置,重组病毒基因组DNA转染HeLa细胞以恢复病毒、测序,评价重组病毒的荧光素酶表达,扩增重组病毒并测定重组病毒株毒力.结果 成功构建2个重组病毒质粒,转染HeLa细胞,表达海肾荧光素酶(humanizedform of Renilla Luc,hRLuc)、荧火虫荧光素酶(firefly luciferase,Luc)的pCVB3-hRLuc和pCVB3-Luc转染后第1代均可检测到hRLuc和Luc活性,但只有pCVB3-hRLuc转染细胞有明显细胞病变.扩增和纯化的CVB3-hRLuc病毒感染HeLa细胞可见明显细胞病变及hRLuc活性.扩增的CVB3-Luc没有观察到明显的细胞病变,且从第2代病毒开始就未能检测到荧光素酶活性.用HeLa细胞经空斑形成试验进行毒力测定,CVB3-hRLuc的毒力为1.4(107 pfu/ml).结论 成功构建了表达hRLuc的重组CVB3毒株CVB3-hRLuc,为定量研究CVB3感染打下基础. 王慧 武帅钦 陈阳 钟照华 赵文然 佟雷关键词:柯萨奇病毒B组3型 基因重组 构建表达eGFP或hRLuc的B组柯萨奇病毒 目的:构建能表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)或荧光素酶(1uciferase,Luc)的重组B组柯萨奇病毒株3型(coxsackievirus B3,CVB3),以实现定量检... 武帅钦关键词:萤火虫荧光素酶 基因重组 B组柯萨奇病毒感染对H9c2细胞microRNA表达谱的影响 被引量:3 2008年 目的观察B组柯萨奇病毒感染对大鼠心肌来源的H9c2细胞microRNA表达谱的影响。方法用B组柯萨奇病毒3型Nancy株(CVB3)攻击成层和未成层的H9c2细胞,6h后收获总RNA,基因芯片检测microRNA表达谱。结果比对未成层与成层的H9c2细胞的microRNA表达谱,H9c2细胞成层后有54种microRNA表达显著下调,7种microRNA表达显著上调。与未感染病毒的未成层细胞比较,CVB3感染的未成层H9c2细胞有35种microRNA表达显著下调,9种microRNA表达显著上调。与成层H9c2细胞比较,CVB3感染成层H9c2细胞后,有20种microRNA的表达显著下调,16种microRNA的表达显著上调。结论细胞生长状态、CVB3攻击均显著改变了H9c2细胞microRNA表达谱。 佟雷 赵文然 林乐勋 武帅钦 刘惠敏 刘惠彬 钟照华关键词:B组柯萨奇病毒 H9C2细胞 MICRORNA 基因芯片 心肌 H9c2细胞对B组柯萨奇病毒3型重组株的易感性 2011年 H9c2细胞是来源于大鼠胚胎心脏组织的成肌细胞系,B组柯萨奇病毒(group B Coxsackievirus,CVB)是心肌炎和扩张型心肌病的主要病原。本研究观察了CVB3在H9c2细胞中的感染性,探讨H9c2细胞是否可用于CVB致心肌疾病的实验研究。用整合了增强型绿色荧光蛋白(EGFP)或海肾荧光素酶(RLuc)的CVB3重组株EGFP-CVB3、RLuc-CVB3攻击H9c2细胞及大、小鼠原代心肌细胞和骨骼肌细胞,应用荧光显微镜、流式细胞术和化学发光技术观察感染细胞的EGFP和RLuc表达,应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测病毒在核酸水平的表达。结果显示,在病毒攻击的H9c2细胞未检测到EGFP和RLuc表达;RT-PCR显示在CVB3感染9 d后检测不到CVB3 RNA;CVB3毒株可感染小鼠心肌细胞、骨骼肌细胞和大鼠心肌细胞,但不感染大鼠骨骼肌细胞和H9c2细胞。本研究结果表明,H9c2细胞不是CVB3易感细胞,不能用于CVB3致心肌疾病的研究;该结果从病毒感染方面也支持H9c2具有大鼠骨骼肌细胞表型。 林乐勋 赵文然 武帅钦 佟雷 王燕 张凤民 钟照华关键词:H9C2细胞 心肌细胞 骨骼肌细胞 纳米二氧化钛光催化技术消毒和净化空气的应用研究 被引量:3 2008年 目的研制纳米二氧化钛(TiO2)光催化空气净化消毒器,并测试其空气消毒净化效果。方法设计和制作纳米TiO2光催化空气净化消毒器样机。在封闭实验室将大肠埃希菌、克雷伯菌制成气雾,比较紫外线和纳米TiO2光催化空气净化消毒器消毒后残余细菌总数。在大型公共场所测试纳米TiO2光催化空气净化消毒器对空气净化和消毒的效率。结果纳米TiO2光催化空气净化消毒器由粗效过滤器、纳米TiO2光催化反应器、活性炭纤维吸附层、电空气负离子发生器和智能化微处理程序共5部分组成。纳米TiO2光催化法在30min、60min、90min、120min对空气大肠埃希菌的杀灭率分别为76.O%、81.8%、77.5%、80.7%。纳米TiO2光催化法上述时间点对空气克雷伯菌的杀灭率分别为78.4%、79.5%、67.3%、58.5%;30min、60min时间点紫外线对空气克雷伯菌的杀灭率56.1%、63.2%。结论纳米TiO2光催化空气净化消毒器的空气消毒效果等同或优于紫外线,可用于大型公共场所的空气净化和消毒作用。 李秉杰 杨德慧 武帅钦 李伯森 孟浩 姜思朋 刘国军 赵月辉 崔洪波 周雪媚 钟照华关键词:钛 消毒