吴冬雪
- 作品数：20 被引量：73H指数：5
- 供职机构：天津出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目公益性行业科研专项质检公益性行业科研专项项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生农业科学理学更多>>
- 施马伦贝格病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立
- 2014年
- 目的 建立施马伦贝格病毒逆转录环介导等温扩增（RT-LAMP）快速检测方法.方法 从GenBank数据库中获得施马伦贝格病毒S基因序列,应用DNAStar软件MegAlign程序分析其序列,利用PrimerExplorerV4软件在序列保守区域设计LAMP引物,即外引物、内引物,建立施马伦贝格病毒等温扩增快速检测方法.结果 RT-LAMP检测方法对施马伦贝格病毒RNA的灵敏度达到10个拷贝,所用引物对赤羽病毒、口蹄疫病毒、蓝舌病毒、水泡性口炎病毒及牛病毒性腹泻病毒无特异性扩增,表现出良好特异性.结论 建立的施马伦贝格病毒等温扩增快速检测方法灵敏度高、特异性强,为快速检测施马伦贝格病毒提供了新方法.
- 王乃福吴冬雪张霞董志珍王玉玲王建华赵祥平
- 关键词：施马伦贝格病毒核酸扩增技术
- 金黄色葡萄球菌分离株自动化核糖体分型的研究被引量：5
- 2016年
- 运用自动化核糖体基因分型系统(Riboprinter),用EcoRI酶,对实验室分离的31株金黄色葡萄球菌进行分子分型研究。31株菌均被鉴定为金黄色葡萄球菌,并获得25种Riboprinter核糖体基因条带型。
- 刘培彭杨思赵良娟张霞庞璐宋喆张海英吴冬雪高旗利郑文杰
- 关键词：金黄色葡萄球菌核糖体基因分型
- H7N9禽流感病毒等温扩增快速检测方法的建立被引量：5
- 2013年
- 目的建立H7N9禽流感病毒环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法。方法从GISAID数据库中获得H7N9禽流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因序列,应用DNAStar软件MegAlign程序分析其序列,利用PrimerExplorer V4软件在序列保守区域设计LAMP引物,即外引物、内引物,同时以所克隆的阳性质粒为模板,建立H7N9禽流感病毒等温扩增快速检测方法。结果LAMP检测方法对H7N9禽流感病毒的灵敏度达到10个拷贝,所用引物对于H1、H3、H5亚型禽流感病毒和新城疫病毒无非特异性扩增,表现出良好特异性。结论建立的H7N9禽流感病毒等温扩增快速检测方法灵敏度高、特异性强,为快速检测禽流感病毒提供了新方法。
- 董志珍郑文杰王乃福赵祥平吴冬雪王玉玲马晶贾润清王建华张晓光
- 关键词：禽流感病毒
- 嗜肺军团菌15种血清型基因芯片检测方法的建立被引量：3
- 2014年
- 建立一种多重PCR技术结合基因芯片检测方法,实现嗜肺军团菌15种血清型的快速、准确检测。根据嗜肺军团菌15种血清型的O抗原特异性基因设计并筛选合适的引物和探针,进行多重PCR扩增,制备寡核苷酸芯片。将多重PCR扩增产物与带有特异探针的芯片杂交。用扫描仪扫描,判定嗜肺军团菌的血清型。该基因芯片可特异性的检测嗜肺军团菌的15种血清型,具有良好的特异性,芯片纯菌DNA检测灵敏度为10ng。所建立的嗜肺军团菌15种血清型基因芯片检测方法特异性好,灵敏度高,具有较好的实用性。
- 吴冬雪王乃福黄晨高旗利关淳
- 关键词：嗜肺军团菌基因芯片多重PCR
- 一种新的等温扩增技术检测阪崎肠杆菌被引量：7
- 2013年
- 目的：建立一种新型阪崎肠杆菌快速筛选检测方法——交叉引物恒温扩增结合免疫金标检测方法。方法：针对阪崎肠杆菌16S-23SrDNA间区序列设计特异性引物及探针，建立交叉引物等温扩增法，利用免疫金标试纸条对结果进行检测。用18株阪崎肠杆菌及其他36株近源菌进行特异性试验；通过定量DNA、纯菌液计数、添加干扰菌检测进行灵敏度验证。结果：建立方法具有很好的特异性；增菌液检测灵敏度为10^1CFU／mL，DNA检测灵敏度为10^0fg／test。结论：建立的交叉引物恒温扩增结合免疫金标检测方法特异性好、灵敏度高，不需要复杂仪器，对口岸快速筛查、基层或偏远经济不发达地区顺利开展检测具有实际意义。
- 张霞吴冬雪曲鹏刘红梅张宏伟高旗利郑文杰王硕
- 关键词：阪崎肠杆菌
- PCR-免疫胶体金试纸条方法检测食品中肠出血性大肠杆菌O157:H7被引量：11
- 2015年
- 目的建立PCR-免疫胶体金试纸条法快速检测食品中肠出血性大肠杆菌O157:H7的分析方法。方法通过设计特异性引物建立肠出血性大肠杆菌O157:H7 PCR检测方法并使用免疫胶体金技术以及双抗体夹心法建立PCR产物快速检测试纸条并设计核酸检测展开液;将1株大肠杆菌O157:H7标准菌株和7株其他常见食源性致病菌作为试验菌株,用试验菌株检测PCR-免疫胶体金试纸条方法的检测特异度,并比较PCR-免疫胶体金试纸条法和PCR-琼脂糖凝胶电泳法的检测敏感度。结果 PCR-免疫胶体金法具有良好的特异度,灵敏度比标准琼脂糖凝胶电泳法高100倍。结论本文建立的肠出血性大肠杆菌O157:H7检测PCR-免疫胶体金试纸条法特异度好,灵敏度高,价格低廉,适用于食品中肠出血性大肠杆菌O157:H7的检测。
- 庞璐宋喆吴冬雪徐宝东张海英赵良娟刘培蔡国瑞李宗梦赵宏张宏伟
- 关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7聚合酶链反应免疫胶体金
- 食品中单增李斯特氏菌检测PCR-免疫胶体金试纸条方法的建立被引量：4
- 2015年
- 目的建立食品中单核增生李斯特氏菌快速检测PCR-免疫胶体金试纸条法。方法通过设计特异性引物建立单增李斯特氏菌检测PCR方法并使用免疫胶体金技术建立PCR产物快速检测试纸条;用试验菌株检测PCR-免疫胶体金试纸条方法的检测特异度与敏感度。使用新建方法对市售肉制品和乳制品中单核增生李斯特氏菌进行检测,验证该方法在食品检测中的可行性。结果 PCR-免疫胶体金法具有良好的特异度,敏感度比标准琼脂糖凝胶电泳法高100倍。采集乳品样品131份,阳性样品1份,检出率1.53%;肉制品224份,阳性样品4份,检测率1.79%。结论建立的单增李斯特氏菌检测PCR-免疫胶体金试纸条法特异度好,敏感度高,适用于食品中单增李斯特氏菌的检测。
- 庞璐宋喆吴冬雪张海英赵良娟刘培蔡国瑞李宗梦赵宏张宏伟
- 关键词：单增李斯特氏菌PCR免疫胶体金
- 口蹄疫、水泡性口炎和猪水泡病多重荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：4
- 2015年
- 目的建立同时检测口蹄疫病毒、水泡性口炎病毒和猪水泡病病毒的多重荧光RT-PCR检测方法。方法根据口蹄疫病毒3D蛋白编码基因、水泡性口炎病毒N蛋白编码基因和猪水泡病病毒VP1蛋白编码基因的高保守区设计特异性引物和探针,对3种动物病毒进行多重荧光定量RT-PCR扩增。结果经过扩增,可以同时检测口蹄疫病毒、水泡性口炎病毒和猪水泡病病毒,而其他参试病原均无扩增信号,显示其良好的特异性。对口蹄疫病毒、水泡性口炎病毒、猪水泡病病毒的最低检测限分别达到101、102、102个质粒拷贝浓度。结论本方法灵敏度高,特异性良好,可实现多种病毒混合感染的同时检测。
- 王乃福黄晨吴冬雪赵祥平陈本龙董志珍
- 关键词：口蹄疫病毒猪水泡病病毒
- 进口乳粉中阪崎肠杆菌检测分析被引量：1
- 2009年
- 应用检验检疫行业标准《奶粉中阪崎肠杆菌的检验方法》中分离计数及普通PCR两种方法对50份进口乳粉进行检测,两种方法检测结果均准确可靠,但增菌方法不统一,标准有待完善。近三年来,天津口岸共检出31份阪崎肠杆菌阳性的进口乳粉。对这些阳性样品及阪崎肠杆菌进行了地域、污染情况及生化性状的总结分析,为完善检验方法及阪崎肠杆菌的进一步深入研究奠定基础。
- 张霞高旗利刘培张海滨吴冬雪
- 关键词：阪崎肠杆菌
- 定量检测食品中榛果过敏原成分被引量：2
- 2010年
- 定量检测食品中过敏原榛果过敏蛋白,构建目的基因的标准品及标准曲线。以榛果的DNA为模板,针对油体蛋白基因设计引物进行PCR扩增,构建质粒,经鉴定测序,用荧光定量PCR制作标准曲线。成功克隆油体蛋白目的基因片段,并以此为标准制作出荧光定量PCR标准曲线,线性关系良好,灵敏度高,检测限低于10个拷贝,特异性强,准确可靠。成功建立荧光PCR方法定量检测食品中过敏原榛果成分,构建油体蛋白基因的标准品及标准曲线。
- 张霞张海英刘培吴冬雪张宏伟王硕
- 关键词：荧光定量PCR
