吴清发
- 作品数：6 被引量：25H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RT-PCR测定SARS患者粪便及漱口液中SARS CoV RNA及其临床意义被引量：5
- 2003年
- 目的 对 4 6例SARS患者 2 0 6份粪便及漱口液标本 ,检测SARSCoV ,探讨SARS患者恢复期排毒的情况。方法 对住院的 4 6例临床确诊SARS病人 ,留取粪便及同期漱口液各 10 3份 ,提取RNA后利用 14对SARSCoV特异性引物 ,对每份标本同时进行 7次套式RT PCR扩增 ,凡 1次RT PCR结果阳性 ,该标本即判定为阳性。结果 10 3份粪便标本中 ,6 3份 (6 1.2 % )SARSCoV阴性 ,4 0份(38.8% )阳性 ,阳性者的病程为 30 .75d± 11.2 7d(12d～ 6 4d)。 10 3份漱口液标本中 ,81份 (78.6 % )阴性 ,2 2份 (2 1.4 % )阳性 ,阳性者的病程为 2 9.82d± 12 .4 6d(12d～ 6 4d)。病程最长 6 4d时粪便及漱口液中依然发现SARSCoV病原学依据。患者同期粪便及漱口液RT PCR检测结果一致的有 6 1份(5 9.2 % ) ,不一致的有 4 2份 (40 .8% )。结论 SARS患者恢复期排毒可长达 6 4d ,对SARS患者恢复期的消毒隔离应该得到足够的重视。SARS患者粪便SARSCoVRNA阳性 ,而同期漱口液SARSCoVRNA阴性 ,提示SARSCoV可以直接经消化道传播。
- 任翊丁惠国吴清发陈唯军陈东任珍杨玲赵春惠汪健
- 关键词：RT-PCRSARS粪便漱口液SARSRNA非典型肺炎
- SARS患者病原学诊断及病毒传播规律研究
- 2004年
- 目的探讨血清抗SARS-CoV特异性LgG、lgM;外周血单核细胞、漱口液以及粪便SARS-CoV特异性套式RT-PCR检测SARS-Cov RNA在SARS确诊中的意义,并通过研究其系列标本,进一步探讨SARS-Coy特异性IgG、IgM出现规律及病毒传播规律。方法临床诊断SARS患者28例。1周采集2次血清、大便及漱口液系列标本。ELISA测定血清抗SARS-CoV特异性lgG、lgM,套式RT-PCR检测外周血单核细胞、漱口液以及粪便SARS-CoV RNA。结果血清SARS-COV-lgM阳性率为50％(14/28);SARS-COv-lgG阳性率为78.6％(22/28)。早期(-10天)lgG可出现;4周阳性率最高;lgG出现晚(11天-)。2-3周阳性率最高;持续时间短(11天-),4周后大部分患者阴转。PBMC SARS-COVRNA阳性率为32.1％(9/28),病程10-14天阳性率最高;漱口液SARS-COVRNA阳性率为57.1％(16/28),大便SARS-COVRNA阳性率为60.7％(17/28);病程2-3周阳性率最高。85.7％(24/28)可确诊SARS;14.3％不能确诊SARS。结论 SARS诊断必须加入病原学诊断标准。而且必须结合特异性抗体、外周血单核细胞、漱口液以及大便SARS-CoV RNA检测,综合判断。由于SARS患者特异性抗体出现晚等特点。因此,SAPS特异性抗体不能作为早期诊断。SARS患者病程2-3周传染性可能最强,而早期(10天内)传染性可能弱。
- 丁惠国任翊王健檀玉芬汪巧娅陈东吴清发陈唯军闫惠苹闵福援杨玲方健秋赵春惠汪健
- 关键词：病原学病毒传播严重急性呼吸综合征传染性非典型肺炎
- 应用套式RT-PCR检测SARS患者血液样品中SARS冠状病毒被引量：1
- 2004年
- 建立了套式RT-PCR方法检测SARS患者血液样品中SARS冠状病毒的方法,并检测血液样品257份。同时将RT-PCR与ELISA检测IgG、IgM的方法进行了比较。结果RT-PCR方法的总检出率为72%,IgG总检出率为68%,IgM总检出率为43%。
- 王效义戴二黑杜宗敏刘海洪韩延平庞昕翟俊辉江凌晓陈泽良邱茂峰王津王宏霞郭兆彪杨瑞馥吴清发李京湘杨玲汪建
- 关键词：检出率SARS冠状病毒SARS患者套式RT-PCRRT-PCR方法ELISA检测
- 传染性非典型肺炎患者不同病程粪便标本中SARS-CoV的分离与鉴定
- 2004年
- 目的:从粪便标本中分离并鉴定SARS-CoV. 方法:粪便浸出液接种Vero-E6细胞,盲传至出现明显的细胞病变效应(CPE),并能稳定传代.采用电镜法和RT- PCR技术鉴定细胞培养物中的SARS-CoV(本实验均在BSL-3实验室完成). 结果:大部分样本用Vero-E6细胞盲传3代后发现明显的CPE,并能稳定传代.电镜负染检查,出现CPE的细胞可查见病毒颗粒;培养物上清RT-PCR扩增均为阳性.粪便样本直接用RT-PCR检测,阳性率仅为50%,细胞培养的检出率为73%. 结论:采用细胞培养结合RT-PCR技术检测粪便标本SARS- CoV比粪便标本直接RT-PCR的阳性率高.
- 田薇邓亚军吴清发王绪敏杨玲张峰刘晨辉包其郁汪建杨焕明刘明旭
- 关键词：传染性非典型肺炎粪便标本SARS-COV
- 空气和空调器样本中SARS冠状病毒的检测被引量：15
- 2005年
- 为研究SARS的传播途径,给医务人员防护提供依据。采用8级安德森空气微生物采样器对SARS病房中空气进行采样、收集空调器冷凝水和空调器滤网尘土标本,应用常规反转录套式PCR检测样本中SARS冠状病毒。结果,共检测40份样,检出阳性标本18份,阳性率为45%;其中空气标本36份,阳性15份,2份空调滤网尘土标本均为阳性,2份空调冷凝水标本检出1份阳性。随机挑选PCR阳性标本2份进行病毒分离试验,2份均为阳性。结果显示,检测SARS病房空气标本以及空调器冷凝水和空调器滤网尘土标本,均获得较高的SARS冠状病毒阳性率并分离到存活病毒。表明环境空气中存在活的SARS冠状病毒,推测SARS确有可能通过空气飞沫传播,本结果可供SARS病房的医护人员采取防护措施参考。
- 杜宗敏王效义戴二黑刘海洪韩延平庞昕翟俊辉杨瑞馥吴清发李京湘杨玲汪建
- 关键词：冠状病毒
- 逆转录套式PCR检测粪便样本中的SARS冠状病毒被引量：4
- 2004年
- 为了观察SARS冠状病毒在SARS患者粪便中的存在规律,建立了检测SARS冠状病毒RNA的逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法,并应用该方法检测了241份SARS患者粪便样本。部分PCR产物应用测序技术进行验证。RTPCR的灵敏度为1010稀释度的病毒原液(原液为108TCID50/ml)。241份粪便样本的总体检出率为24.1%(58/241),其中发病后的前10d和20d的检出率均为50.0%。随着发病时间的延长,阳性检出率呈下降趋势。应用RTPCR从粪便中检测SARS冠状病毒是可行的,在发病50d以后仍有17.0%左右的阳性检出率,提示SARS恢复期患者具有排毒的可能性,给后续的卫生防疫措施提供了一定的参考数据。
- 戴二黑李京湘杜宗敏吴清发王效义杨玲刘海洪庞昕韩延平翟俊辉江凌晓陈泽良邱茂锋王津王宏霞郭兆彪汪建杨瑞馥
- 关键词：逆转录-聚合酶链反应SARS冠状病毒粪便
