乐飞 作品数:10 被引量:58 H指数:6 供职机构: 复旦大学上海医学院生理与病理生理学系 更多>> 发文基金: 国家教育部“211”工程 上海市科学技术发展基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
环加氧酶在碱性成纤维细胞生长因子引起小鼠脑微血管内皮细胞增殖中的作用和意义 血管新生(angiogenesis)是血管内皮纽胞(EC)特别是微血管内皮细胞(MVEC)在原有血管的基础上通过增殖、迁移及分化等一系列复杂的生物学反应而形成新血管网的过程.血管新生的机制至今尚未阐明.该研究所用bEnd... 乐飞关键词:碱性成纤维细胞生长因子 微血管内皮细胞 文献传递 凝血酶敏感蛋白-1与血管内皮细胞迁移 2004年 近年来,一系列的研究证实,血管新生(angiogenesis)与某些疾病的关系十分密切,因此与血管新生有关的基础研究广泛开展. 乐飞 金惠铭关键词:凝血酶敏感蛋白-1 血管内皮细胞 细胞迁移 血管新生 小鼠脑微血管内皮细胞株bEnd.3的细胞特征及基因表达谱分析 被引量:15 2004年 目的 :对一种小鼠脑组织来源的血管内皮细胞株bEnd .3的主要细胞特征进行研究并做血管内皮细胞生物学功能基因芯片分析。方法 :利用倒置显微镜、扫描和透射电子显微镜观察细胞形态特征 ;免疫细胞化学法显示血管内皮细胞特异性表面标志 ;ELISA定量检测PGE2 ;流式细胞术、MTT法研究增殖和凋亡、血管内皮细胞基因芯片研究正常培养bEnd 3基因表达谱。结果 :bEnd 3具备多种典型的微血管内皮细胞 (MVEC)特征 :细胞呈多边形或梭型、呈铺路石样生长 ;存在管腔样结构 (TLS)和毛细血管样网络 ,细胞表面有丰富的微绒毛 ;vW因子、CD34阳性 ;CD31、CD36、CD10 5等也有不同程度的表达 ;细胞高水平分泌前列腺素E2 (PGE2 ) ;多种与正常血管功能密切相关的基因也有不同程度的表达。结论 :bEnd .3保留了MVEC的基本特性 ,可用于心脑血管疾病。 乐飞 张国平 金惠铭 史连国 殷莲华关键词:内皮 WILLEBRAND因子 寡核苷酸序列分析 碱性成纤维细胞生长因子对脑微血管内皮细胞血管新生基因谱和环加氧酶-2表达的影响 被引量:8 2006年 本文研究了碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对小鼠脑微血管内皮细胞(microvascular endot- helial cell,MVEC)株bEnd.3中血管新生相关基因表达谱的改变,并重点从mRNA、蛋白质和细胞水平检测bFGF对血管新生旁观分子环加氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达的影响。用特异性小鼠血管新生基因芯片高通量检测bEnd.3细胞基因谱表达的改变,分析促血管新生基因及抑制血管新生的基因表达谱的变化;用RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学等方法分别从mRNA、蛋白质和细胞水平检测COX-2表达变化及细胞内的定位。结果发现用10 ng/ml的bFGF刺激bEnd.3细胞2 h后多种促血管新生基因表达明显上调,如Adamts1、MMP-9、Ang-1、PDGF B、G-CSF、FGF16、IGF-1等分别上调3、 8、120、5.2、4.5、1.7、2.7倍。与此同时,多种抑制血管新生的基因表达相应下调,如TSP-3、TIMP-2、TGFβ1等表达分别下调3.4、1.5和3.5倍。RT-PCR和Western blot的结果证实,bFGF可以上调COX-2 mRNA的表达和蛋白质的合成。免疫组化的结果表明,COX-2主要分布在胞浆。以上结果提示:bFGF具有上调促血管新生基因表达,下调抑制血管新生基因表达的作用,两者协同作用,促进血管新生。同时bFGF还可以明显促进血管新生旁观分子COX-2 mRNA的表达和蛋白质的合成。本文讨论了bFGF引起MVEC内COX-2表达上调的意义。 乐飞 张国平 金惠铭关键词:碱性成纤维细胞生长因子 微血管内皮细胞 血管新生 环加氧酶 大花红天素对大鼠肺微血管内皮细胞凋亡影响的实验研究 被引量:7 2004年 目的研究大花红天素抗大鼠肺微血管内皮细胞凋亡的作用及机制。方法用血清药理学的方法观察不同量的含药血清 (25、50、100μl)对体外培养的大鼠肺微血管内皮细胞 (PMVEC)凋亡的影响。细胞凋亡分别用流式细胞术、免疫细胞化学ABC法 (测Fas及Bcl-2)测定。结果与对照组比 ,在RPMVEC中加25μl和50μl含药血清组凋亡明显抑制 (P<0.05)。凋亡抑制组Fas免疫细胞化学染色比对照组弱 ,阳性细胞明显减少(P<0.05) ;而Bcl -2染色比对照组强 ,阳性细胞明显增加(P<0.05)。结论一定浓度的大花红天素具有抗大鼠肺微血管内皮细胞凋亡的作用 。 张国平 金惠铭 王文健 乐飞关键词:凋亡相关基因 肺微血管内皮细胞 鼠肺 免疫细胞化学染色 BEL-2 辅酶Q_(10)对体外培养的小鼠脑微血管内皮细胞凋亡和增殖的影响 被引量:15 2004年 目的 :研究辅酶Q10 抑制血管内皮细胞凋亡和增殖的作用及其可能机制。方法 :用血清药理学方法和流式细胞仪法检测体外培养的小鼠脑微血管内皮细胞 (bEnd .3 )中不同浓度CoQ10 对细胞凋亡和增殖的变化。用免疫细胞化学ABC法观察Fas蛋白及Bcl-2蛋白表达的变化。结果 :与对照组比 (加不含药血清 ) ,在bEnd .3细胞培养中加入 50 μL、2 5μL、12 5μL含CoQ10 的血清组细胞凋亡明显抑制 (P <0 0 5)。免疫细胞化学检验结果证明 ,此时Fas蛋白表达明显减弱 ,而Bcl-2蛋白表达明显增强 (P <0 0 5)。但CoQ10 对细胞增殖影响不显著。结论 :一定浓度的CoQ10 能通过上调Bcl-2蛋白和下调Fas蛋白表达抑制小鼠微血管内皮细胞凋亡 。 张国平 乐飞 金惠铭 沈皓 森昌夫 王中关键词:泛醌 小鼠 血管内皮细胞 FAS 辅酶Q10 治疗性血管新生中生长因子对内皮细胞调控机制研究 <正>治疗性血管新生(therapeutic angiogenesis)是指将外源性促血管新生因子转入缺血组织,增强缺血区的侧枝毛细血管新生。因此它主要用于缺血性疾病的防治。目前治疗性血管新生主要处于从实验治疗向临床过渡... 金惠铭 乐飞 张国平 梁光波 史连国文献传递 治疗性血管新生中生长因子对内皮细胞的调控 治疗性血管新生(therapeutic angiogensis)是指将外源性促血管新生因子转入缺血组织,增强缺血区的侧支毛细血管新生,它主要用于缺血性疾病的防治。为此必须有内源性或外源性的促血管新生因子参加,这些因子大多... 金惠铭 乐飞 张国平 梁光波 史连国文献传递 促血管生成素-1与血管通透性调节 被引量:11 2004年 Angiopoietin-1 (Ang-1) is a newly-found endothelium-specific proangiogenic factor and it had been proved essential roles in both vasculogenesis and angiogensis. Among them, its anti-leakage ability may have great potential applications in clinical treatment of vascular hyper-permeability in a variety of diseases such as cancer, diabetic retinopathy, rheumatoid arthritis, asthma. In this review, some research progresses focused on this aspect are discussed. [ 乐飞 金惠铭关键词:血管生成素 内皮细胞 大花红天素对脑微血管内皮细胞凋亡的双相调节作用及机制(英文) 被引量:7 2005年 目的研究中药红景天的有效成分-大花红天素对小鼠脑微血管内皮细胞凋亡的作用及机制。方法观察不同剂量的大花红天素(25mg/L,100mg/L)对体外培养的小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3株)凋亡的影响。细胞凋亡分别用流式细胞术、免疫细胞化学ABC法(Fas/Bcl-2)及Western blotting(caspase-3)测定。结果与对照组比,在bEnd.3细胞中含药浓度25mg/L组凋亡明显抑制(P<0.05),而100mg/L组凋亡明显加剧(P<0.05)。凋亡抑制组Fas免疫细胞化学染色比对照组弱,阳性细胞明显减少(P<0.05);而Bcl-2染色比对照组强,阳性细胞明显增加(P<0.05),caspase-3表达明显抑制(P<0.05)。凋亡加剧组中(100mg/L)变化相反。结论大花红天素对bEnd.3细胞凋亡有双相调节作用,其机制与Fas/Bcl-2蛋白表达及caspase-3激活的变化有关。 钱睿哲 张国平 金惠铭 王文健 乐飞 史连国 曲晓义关键词:细胞凋亡