马刚 作品数:67 被引量:230 H指数:9 供职机构: 北京大学深圳医院 更多>> 发文基金: 深圳市科技计划项目 广东省医学科学技术研究基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
角质形成细胞的培养及其表皮生长因子受体表达 被引量:2 2007年 目的:在成功分离人皮肤角质形成细胞的基础上,观察表皮生长因子受体在人皮肤角质形成细胞中的表达情况。方法:实验于2006-3/10在北京大学深圳医院中心实验室进行。采用dispase Ⅱ-trypsin两步消化法获取表皮基底层细胞,用小鼠皮肤成纤维母细胞滋养层和黄素腺嘌呤二核苷酸培养液进行培养。小鼠皮肤成纤维母细胞的预处理:向对数生长期的小鼠皮肤成纤维母细胞培养液中加入丝裂霉素C至终浓度为4mg/L,37℃下培养4h,弃去培养液,用D-Hank’s液洗3次,加入浓度为0.25g/L的胰蛋白酶消化,分离出细胞,离心(200g,5min),用黄素腺嘌呤二核苷酸培养液悬浮细胞,计数,以5.0×104/cm2的密度种于培养皿内,37℃、体积分数0.05的CO2培养箱下培养。角质形成细胞的培养:将分离的角质形成细胞悬浮在黄素腺嘌呤二核苷酸培养液中,以2.0×104/cm2的密度接种在前1天经丝裂霉素C处理的小鼠皮肤成纤维母细胞滋养层上,37℃、体积分数0.05的CO2培养箱下培养。24h换液,以后每3d换1次液。采用免疫细胞化学的方法检测表皮生长因子受体的表达,采用复合逆转录聚合酶链反应检测角质形成细胞中表皮生长因子受体mRNA的表达。结果:采用dispaseⅡ消化法分离了真皮和表皮,获得较多的角质形成细胞,可以避免真皮成纤维细胞的污染。人皮肤角质形成细胞在黄素腺嘌呤二核苷酸培养液中培养5d可见明显的集落,约10d可长满单层。免疫细胞化学显示表皮生长因子受体在细胞表面有明显的表达,复合逆转录聚合酶链反应显示表皮生长因子受体mRNA有明显的表达。结论:用小鼠皮肤成纤维母细胞滋养层和黄素腺嘌呤二核苷酸培养液可以较好地培养原代人皮肤角质形成细胞,表皮生长因子受体在细胞表面有明显的表达,这些结果为与表皮生长因子受体相关的皮肤病(如银屑病)的研究奠定了基础。 江智茂 程滨珠 马刚 李建军 陈■成 周余来关键词:细胞培养技术 受体 表皮生长因子 细胞学 慢性荨麻疹患者甲状腺自身抗体检测及自体血清皮肤试验的意义 目的通过检测指标分析慢性荨麻疹和甲状腺功能亢进的关系,探讨甲状腺自身抗体在慢性荨麻疹发病中的作用和自体皮肤血清试验的意义。方法研究对象包括100例慢性荨麻疹患者,68例甲亢合并慢性荨麻疹患者,60例甲状腺功能亢进患者和6... 胡小平 谢谦 于波 邵勇 张杰 钟绮丽 马刚苯巴比妥致药物超敏反应综合征1例 被引量:2 2012年 报告1例苯巴比妥致药物超敏反应综合征。患者女,26岁,孕期使用苯巴比妥10日后躯干出现皮疹,伴发热及肝功能异常,多次用药后原有皮疹加重,伴肝脏、心脏、肺功能异常。皮肤科检查:颜面、躯干、四肢见密集的针尖至甲盖大小的红斑、斑丘疹,压之褪色,间有正常皮肤,未见明显脱屑、水疱及大疱。结合病理检查及实验室检查诊断为药物超敏反应综合征,给予系统应用激素、护肝、保护胃黏膜等治疗后患者痊愈。 丁丹霞 马刚关键词:药物超敏反应综合征 苯巴比妥 小汗腺肿瘤凝集素受体亲和组化研究 2005年 目的研究皮肤小汗腺肿瘤细胞表面凝集素受体的分布及变化规律。方法应用17种生物素化的凝集素,采用ABC方法检测了30例小汗腺良恶性肿瘤细胞表面凝集素受体的表达。结果马铃薯凝集素(STL)在小汗腺恶性肿瘤中阳性率较高,与良性肿瘤相比差异有显著性(P<0.01),小汗腺恶性肿瘤中除阳性着染形态分布不规则外,还可见胞浆着染。结论小汗腺肿瘤在癌变过程中,其细胞表面复合糖糖基及细胞正常结构发生了有意义的变化。 李建军 朱翠凤 佟菊贞 程滨珠 钟绮丽 马刚关键词:凝集素受体 组织化学 非酶糖化与皮肤自然衰老的关系 被引量:9 2013年 皮肤自然衰老的机制尚不完全清楚。非酶糖化尤其是它的晚期糖化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)在其中起重要作用。研究发现,AGEs在皮肤的不断累积导致真皮胶原蛋白发生交联,皮肤弹性下降;并参与了促进成纤维细胞凋亡的过程;发现细胞内的波形蛋白是AGEs修饰的靶点;细胞外基质因为AGEs的累积也发生改变,包括透明质酸的下降,以及基质金属蛋白酶系统失衡。此外,最近研究发现表皮也有AGEs的累积。 陈婷 马刚关键词:皮肤 自然衰老 非酶糖化 晚期糖化终末产物 芳维A酸乙酯治疗掌跖脓疱病临床分析 被引量:1 2003年 目的 :观察芳维 A酸乙酯治疗掌跖脓疱病的疗效。方法 :对 76例掌跖脓疱病患者应用芳维 A酸乙酯治疗 ,并对治疗前后的体征进行疗效判定。结果 :76例患者中 ,痊愈 5 1例 ,显效 1 7例 ,有效 7例 ,无效 1例。总有效率 89.4%,痊愈率 67.0 %。结论 :芳维 陈世义 李晓红 刘兵 马刚Q开关Nd:YAG激光治疗颧部褐青色痣161例 被引量:8 2007年 颧颞部褐青色痣(nevus fuscoceruleus zygomaticus NFZ)亦称Hori痣、获得性双侧太田痣样斑(acquired bilateral nevusof Ota-Likemacules),是一种波及到真皮的色素增生性疾病,好发于中青年女性,影响面部美观。2003年5月~2006年5月,我们采用Q开关Nd:YAG激光倍频532nm治疗颧部褐青色痣患者161例,取得了较好疗效,现报道如下。 马刚 程滨珠 何咪咪 李玉红 江智茂关键词:Q开关ND:YAG激光治疗 颧部褐青色痣 增生性疾病 中青年女性 获得性 四味清热中药体外抗泌尿生殖道沙眼衣原体研究 被引量:6 2004年 目的了解白头翁、大青叶、玄参、知母四味清热中药体外抗泌尿生殖道沙眼衣原体的活性。方法应用微量McCoy细胞培养法检测了4味清热中药体外抗衣原体活性。结果白头翁等四味中药体外均有不同程度的抗泌尿生殖沙眼衣原体的活性,其MIC值从8.2988~40.9375mg/mL。结论白头翁等四味中药体外均有一定抗泌尿生殖道沙眼衣原体的作用,但活性较低。 李建军 涂裕英 佟菊贞 程滨珠 钟绮丽 马刚关键词:体外 沙眼衣原体 泌尿生殖道 清热 中药 白头翁 绿原酸抗人皮肤成纤维细胞衰老的研究 被引量:1 2015年 目的:探讨绿原酸在乙二醛诱导的人皮肤成纤维细胞衰老中的保护作用。方法使用1 mmol/L乙二醛处理体外培养的人皮肤成纤维细胞,构建细胞衰老模型。用5、10、20、40、80μmol/L 绿原酸和乙二醛共同处理人皮肤成纤维细胞,MTT 法检测细胞增殖活性,筛选出绿原酸的有效浓度。1 mmol/L 乙二醛分别与有效浓度的绿原酸(10、20、40μmol/L)共同作用于成纤维细胞,细胞衰老β半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法及实时荧光定量 PCR 法检测衰老细胞比例和衰老基因 p16INK4a mRNA 的表达情况。统计分析采用单因素方差分析和 LSD法。结果与空白对照组人皮肤成纤维细胞增殖(100%±6.90%)相比,乙二醛可明显抑制细胞增殖(55.65%±2.00%),两组差异有统计学意义(P <0.01)。与乙二醛组细胞增殖相比,除乙二醛+5μmol/L 绿原酸组(55.36%±2.58%)外,乙二醛+10、20、40、80μmol/L 绿原酸组对细胞增殖均有不同程度地保护作用(细胞增殖率分别为60.75%±1.32%、67.65%±1.90%、75.71%±3.25%、75.69%±2.38%),呈剂量依赖性,40μmol/L 绿原酸达高峰,80μmol/L 绿原酸与40μmol/L 组相比,细胞活力的差异无统计学意义(P 〉0.05),因此筛选出绿原酸的有效浓度为10~40μmol/L。与空白对照组衰老细胞比例(13.00%±2.22%)比较,加入乙二醛后,衰老细胞明显增多(35.65%±2.24%),差异有统计学意义(P <0.01)。与乙二醛组细胞 SA-β-gal 染色阳性率相比,分别加入10、20、40μmol/L 绿原酸与乙二醛共培养后,细胞 SA-β-gal 染色阳性率呈剂量依赖性减少(31.50%±2.13%、22.31%±3.11%、19.32%±3.01%),差异均有统计学意义(P <0.05)。与空白对照组衰老基因 p16INK4a mRNA的表达比较,乙二醛组明显增高(2-ΔΔCt:1.00±0.06比0.26±0.05,P <0.01),分别加入10、20、40μmol/L 绿原酸与� 陈婷 江智茂 于波 马刚关键词:皮肤衰老 成纤维细胞 乙二醛 绿原酸 细胞衰老 点阵激光在瘢痕防治中的应用进展 被引量:14 2016年 点阵激光单独应用或联合其他方法治疗浅表性瘢痕、萎缩性瘢痕、增生性瘢痕及瘢痕疙瘩均有不同程度的改善,偶有加重.点阵激光可减少早期创伤、手术瘢痕发展成增生性瘢痕的机会.其疗效与瘢痕类型、治疗参数的选择、皮肤类型、术后护理等有关.点阵激光的不良反应主要为暂时性或持久性红斑、炎症后色素沉着、疼痛、水泡、结痂、感染等,常较轻或一过性,遗留永久性和严重并发症较为少见,偶可出现瘢痕增生. 杨少蝶 叶庭路 马刚关键词:激光 瘢痕 瘢痕疙瘩