邱洪宇
- 作品数:3 被引量:9H指数:2
- 供职机构:华西医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金四川省学术和技术带头人培养资金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人外周血单个核细胞CD14基因的扩增及序列测定
- 2000年
- 目的 介绍一种获取人 CD14基因的简易方法。方法 利用 CD14基因组成的特点 ,采用聚合酶链反应技术以人外周血单个核细胞基因组 DNA为模板扩增获取人 CD14基因。结果 从人外周血单个核细胞基因组 DNA中成功扩增出大小约 1.1kb的人 CD14基因 ,并且经基因序列测定表明 ,克隆的人CD14基因序列与文献报道完全相同。结论 以人外周血单个核细胞基因组 DNA为模板 ,扩增人 CD14基因的方法是一种获取 CD14基因简捷、有效的方法。
- 张万江鲍朗邱洪宇晏菊芳胡昌华张会东
- 关键词:单个核细胞CD14基因
- 中国强毒力赖型钩端螺旋体外膜蛋白基因的克隆表达及对大肠杆菌活力的影响被引量:4
- 2001年
- 目的 :构建表达致病性赖型 0 17株钩端螺旋体OmpL1外膜蛋白的真核 -原核穿梭表达载体 ,并在原核细胞中表达出目的蛋白。方法 :用PCR方法从 0 17株钩体基因组中钓出OmpL1蛋白基因 ,酶切纯化后与质粒pBK -CMV连接 ,通过电泳、限制性内切酶分析及PCR鉴定筛选出正确重组质粒。重组质粒在大肠杆菌中诱导表达后提取总蛋白以SDS -PAGE检测表达情况 ,同时监测目的蛋白表达前后各时段宿主菌OD6 0 0值的变化。结果 :筛选出 5株带重组质粒菌 ,其中有 4株能在大肠杆菌中表达 37kD的特异蛋白 ,而且随着该外源蛋白的表达 ,宿主菌生长各时段的OD6 0 0值下降。结论 :成功地构建了钩体OmpL1蛋白的穿梭表达质粒 ,并在大肠杆菌中表达出OmpL1融合蛋白 ,该异源蛋白的表达导致宿主菌的活力降低。本工作为OmpL1蛋白用于钩体病诊断。
- 鲍朗晏菊芳胡昌华谢勇恩邱洪宇张会东
- 关键词:钩端螺旋体质粒大肠杆菌外膜蛋白
- 钩端螺旋体外膜蛋白基因重组载体构建及在卡介菌中的表达被引量:5
- 2000年
- 目的 研制一种高效广谱的新型钩体疫苗。方法 用PCR方法扩增致病性钩端螺旋体赖型 0 17株外膜蛋白OmpL1基因 ,将其克隆入大肠杆菌—分枝杆菌穿梭质粒载体pMV2 6 1和pMV36 1中。结果 筛选到两个重组载体pBQ1和pBQ2 ,通过电穿孔导入卡介菌 ,重组体经诱导表达了相对分子质量约为 35 0 0 0的融合蛋白。
- 邱洪宇鲍朗晏菊芳谢勇恩徐恒冯云陈玮张会东张万江
- 关键词:钩端螺旋体外膜蛋白卡介菌