余娜娜
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
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- 发文基金：国家自然科学基金广西省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 人CYB5R2基因真核表达载体的构建
- 2011年
- 目的构建人CYB5R2基因真核表达载体,并观察其在人鼻咽癌细胞HONE1中的表达。方法根据表达载体pCMV-Tag3A上的多克隆位点和CYB5R2基因CDS序列设计引物,应用RT-PCR从人睾丸cDNA中克隆出CYB5R2的CDS,并进行TA克隆。对经PCR、双酶切和双向测序验证正确的质粒,进行CDS目的片段的回收,将其连接于pCMV-Tag3A载体的多克隆位点内构建真核载体,然后进行PCR、双酶切和双向测序验证。脂质体法转染鼻咽癌细胞HONE1细胞,荧光显微镜观察和RT-PCR验证该基因的表达。结果 PCR、双酶切和双向测序结果显示pCMV-Tag3-CYB5R2-CDS真核表达载体构建成功,荧光显微镜和RT-PCR的结果显示该重组质粒在HONE1细胞中正确表达。结论成功构建了pCMV-Tag3-CYB5R2-CDS真核表达载体,并在鼻咽癌细胞HONE1中表达,为进一步验证其抑癌作用及探索其抑癌机制做准备。
- 余娜娜杜春平肖雪侯波黄光武张哲
- 关键词：鼻咽癌真核表达载体
- CHFR基因在鼻咽癌中异常甲基化的研究被引量：1
- 2011年
- 目的:检测鼻咽癌中CHFR基因的转录表达及其启动子区甲基化状态,探讨其在鼻咽癌中的转录失活机制及其意义;评价鼻咽拭子检测CHFR基因甲基化状态在鼻咽癌诊断和治疗中的意义。方法:RT-PCR检测鼻咽癌细胞株中CHFR基因的转录表达水平。甲基化特异性PCR检测鼻咽癌细胞株、鼻咽癌活检组织、正常鼻咽组织及配套的鼻咽拭子样本中CHFR基因的甲基化状态。亚硫酸氢盐测序分析鼻咽癌细胞株和鼻咽癌组织、正常鼻咽组织中CHFR基因启动子区的具体甲基化状态。5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-dC)处理鼻咽癌细胞株后观察CHFR基因转录表达水平的改变情况。结果:CHFR基因在鼻咽癌细胞株中转录表达下调或沉默;CHFR基因在鼻咽癌细胞株和鼻咽癌组织中均呈高频率、肿瘤特异性的甲基化。鼻咽癌患者鼻咽癌组织和配套鼻咽拭子样本中CHFR基因的甲基化频率分别为65.5%和63.8%,两者符合率达86.2%。鼻咽癌组织和细胞株中CHFR基因启动子区大部分的CpG位点为甲基化,而正常组织全为非甲基化;5-aza-dC可显著恢复鼻咽癌细胞株中CHFR基因的转录表达。结论:鼻咽癌中CHFR基因由于启动子区CpG岛的DNA甲基化而转录表达下调。鼻咽癌中CHFR基因的甲基化与患者T分期相关。检测鼻咽拭子中甲基化的CHFR基因可望作为鼻咽癌无创诊断的手段之一。
- 黄婷婷杜春平余娜娜肖雪周晓莹王淑民黄光武张哲
- 关键词：鼻咽肿瘤CHFR基因鼻咽拭子DNA甲基化
- CYB5R2基因真核表达载体的构建及在鼻咽癌中的功能研究
- 目的：建立稳定表达CYB5R2基因的鼻咽癌细胞株,观察CYB5R2基因对鼻咽癌细胞恶性肿瘤生物行为的影响,验证其在鼻咽癌中的抑癌特性,为寻找更多的更有效的鼻咽癌分子生物学标记物及治疗新靶点提供理论依据和奠定实验基础。方法...
- 余娜娜
- 关键词：肿瘤抑制基因鼻咽癌
- 文献传递
