黄德党
- 作品数：2 被引量：9H指数：1
- 供职机构：厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心更多>>
- 发文基金：福建省医学创新课题国家高技术研究发展计划福建省科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 适于HIV-1 p24抗原检测试剂的单抗制备与筛选被引量：1
- 2007年
- 目的制备抗HIV-1p24单克隆抗体(单抗,McAb),并利用双抗体夹心ELISA法建立HIV-1p24抗原检测试剂。方法以基因工程原核重组抗原HIV-1p24蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常规杂交瘤技术和间接ELISA法制备单克隆抗体,单抗经纯化和HRP标记后,利用双抗体夹心ELISA筛选检测p24蛋白的最佳配伍单抗以期建立HIV-1p24抗原检测试剂。结果成功筛选到16株稳定分泌抗HIV-1p24单抗的杂交瘤细胞株,并从中筛选出最佳单抗配伍组合“16G12+2F2b-HRP”,该组合对p24蛋白的检测灵敏度为20pg/mL,对感染性克隆pNL4-3表达的HIV病毒培养上清检测呈阳性,对100份HIV阴性人血清无非特异性反应,显示出良好的检测灵敏度和特异性。结论本研究初步成功地建立了HIV-1p24抗原的检测试剂,并为最终建立HIV第四代诊断试剂(HIV Ag/Ab Assay)奠定了坚实的基础。
- 郭永利陈毅歆黄德党罗海峰葛胜祥程通张军夏宁邵
- 关键词：HIV-1单克隆抗体夹心ELISA
- 一种定量检测人血清高敏C反应蛋白的化学发光免疫方法被引量：9
- 2010年
- 旨在建立一种可定量检测人血清高敏CRP的化学发光检测方法（High—sensitivity C—reactive protein quantifiable chemiluminescent immunoassay，hs—CRPCLIA）。首先利用亲和层析和离子交换层析技术从肝硬化病人腹水中纯化出高纯度的天然CRP作为免疫原制备了22株CRP单克隆抗体（单抗1，其中13株单抗在磷酸胆碱配体捕获ELISA中呈阳性，然后利用方正滴定法筛选出单抗10C5和10C11建立了hs-CRP CLIA。试剂盒评估结果显示：该方法对血清中干扰物质IgG、血红蛋白、甘油三酯等无非特异性反应；该方法检测灵敏度高，在0．04～20．38mg／L范围内定量检测人血清CRP标准品呈良好线性关系限0〉0．993）；该方法准确性高、可重复性好，平均回收率为99％，批内差为4．2％～5．8％，批间差为9．0％～11．5％；该方法与进口商品化高敏CRPELISA试剂盒平行比较检测90份血清标本，结果显示两者有良好的可比性（r=0．968）。综上，建立的hs—CRPCLIA是一种准确、可靠、可定量的高灵敏C反应蛋白检测方法，该方法的临床应用，有利于改善我国心脏病风险评估及肠炎性疾病预后判断。
- 刘平果李国强陈毅歆罗海峰黄德党王颖彬葛胜祥张军夏宁邵
- 关键词：高敏C反应蛋白化学发光
