马姗姗
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所病原微生物生物安全国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 弗氏2a志贺菌htrA基因突变体的构建
- 2011年
- 目的:构建弗氏2a志贺菌2457T的htrA基因缺失突变株及HtrA酶失活突变株,以便进一步研究HtrA蛋白的功能。方法:用PCR扩增htrA基因上下游同源臂,构建含有kan基因的打靶片段,采用λ-Red重组系统对htrA基因进行缺失,用PCR进行验证;通过定点突变的方法构建HtrA酶失活突变株,并测序验证。结果与结论:构建了2457T htrA缺失突变株和2457T/htrAFSA酶失活突变株。
- 马姗姗朱力古月华刘先凯冯尔玲王恒樑
- 关键词：缺失突变体定点突变
- 弗氏志贺菌2a GadB蛋白的功能研究
- 2011年
- 目的探究gadB基因的潜在功能及其对弗氏志贺菌2a 301株致病能力的影响。方法利用λ-Red重组系统构建弗氏志贺菌2a 301株的gadB缺失突变株,随后进行基本的表型实验测评,并初步评价其毒力,最后制备突变株和野生株全菌蛋白样品,利用双向电泳技术比较二者在蛋白表达谱上的差异。结果成功获得gadB基因缺失株;生化实验发现缺失株不能利用甘油发酵;而豚鼠角膜实验发现突变株炎症反应稍轻于野生株;全菌蛋白表达谱中发现10个差异蛋白。结论利用双向电泳鉴定到一些可能与GadB有关的蛋白,为gadB潜在功能的研究提供了线索。
- 赵天朱力冯尔玲马姗姗廖祥儒王恒樑
- 关键词：基因敲除双向电泳
- 弗氏2a志贺菌CobB和GtrⅡ蛋白水平及毒力相关性的初步研究被引量：2
- 2010年
- 目的研究翻译后修饰基因cobB和gtrⅡ对志贺菌致病能力的影响。方法采用λ-Red重组系统构建福氏2a志贺菌2457T的cobB,gtrⅡ缺失突变株,进行初步的毒力评价,随后制备野生株,cobB,gtrⅡ缺失突变株的全菌蛋白样品,并进行双向电泳比较野生株和缺失株在蛋白表达谱上的差异。结果成功构建cobB、gtrⅡ基因的缺失突变株,豚鼠角膜实验发现cobB、gtrⅡ缺失株症状稍弱于野生株,但在全菌蛋白表达谱中野生株和突变株并无明显差异。结论双向电泳难以有效地呈现CobB和GtrⅡ的翻译后修饰能力。
- 刘小青朱力冯尔玲马姗姗魏华王恒樑
- 志贺氏菌HtrA蛋白的功能研究
- 志贺氏菌(Shigella spp.)俗称痢疾杆菌,作为一种具有高度传染性革兰氏阴性肠道致病菌,主要通过侵入人结肠上皮细胞最终定位于大肠,而引起典型细菌性痢疾(发热、腹痛、里急后重、大便脓血)。志贺氏菌感染剂量极低(10...
- 马姗姗
- 关键词：基因敲除双向电泳蛋白相互作用
- 文献传递
- 志贺菌毒力大质粒大片段敲除方法的建立
- 2011年
- 目的:构建志贺菌毒力大质粒大片段缺失突变体库。方法:首先利用λ-Red重组系统构建弗氏2a志贺菌301株毒力大质粒特定位点缺失株,再在距离此位点20 kb处缺失另一突变位点,最后根据重组酶识别远端FRT位点的特性,将两个远端FRT位点之间的DNA序列全部缺失。结果:敲除了毒力大质粒24 kb的DNA序列。结论:利用λ-Red重组系统及FLP-FRT位点特异性识别重组系统可以对志贺菌毒力大质粒逐步进行大片段的敲除,构建大质粒大片段缺失突变体库。
- 姚毅朱力马姗姗徐慧杰冯尔玲刘先凯贺稚非王恒樑
- 关键词：志贺菌
