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李月玥
作品数:
1
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供职机构:
华中农业大学食品科学技术学院
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发文基金:
国家自然科学基金
国家重点基础研究发展计划
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
刘先凯
军事医学科学院生物工程研究所病...
冯尔玲
军事医学科学院生物工程研究所病...
王恒樑
华中农业大学食品科学技术学院
朱力
军事医学科学院生物工程研究所病...
陈福生
华中农业大学食品科学技术学院
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华中农业大学
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作者
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陈福生
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朱力
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王恒樑
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李月玥
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冯尔玲
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刘先凯
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军事医学
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2012
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弗氏志贺菌ΔlysA突变株的构建及SILAC技术的应用尝试
2012年
目的构建弗氏2a志贺菌301株赖氨酸营养缺陷型突变株,为将细胞培养条件下稳定同位素标记(SILAC)技术应用于志贺菌蛋白质组学研究奠定基础。方法采用λ-Red重组系统对弗氏2a志贺菌301株lysA基因进行缺失,对野生株和突变株进行基本的表型测评和毒力评价,并利用双向电泳技术比较二者在全菌蛋白表达谱上的差异,最后将突变株分别在含有12C6-赖氨酸和13C6-赖氨酸的培养基中培养,根据双向电泳胶图取对应蛋白点进行胶内酶切及MALDI-TOF/TOF分析。结果成功构建了301 lysA基因缺失突变株,蛋白鉴定结果显示所取对应蛋白点为同一蛋白,在质谱图上轻重同位素峰位移为6 amu。结论本研究所构建的赖氨酸营养缺陷型突变株适合进行SILAC分析。
李月玥
刘先凯
冯尔玲
王恒樑
陈福生
朱力
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基因缺失
双向电泳
SILAC
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