李忠玉
- 作品数:11 被引量:45H指数:3
- 供职机构:华中科技大学同济医学院基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学更多>>
- 马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液对正常大鼠脑内谷氨酸和GABA的影响
- 2007年
- 目的探讨星形胶质细胞对大鼠脑内谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)的影响及其在癫痫发病中的作用。方法将马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液(astrocyte-conditioned medium,ACM)注射入正常SD大鼠侧脑室,观察大鼠的行为变化,运用免疫组织化学及HPLC的方法,观察大鼠大脑皮质、海马内Glu和GABA免疫反应的变化及脑组织匀浆、脑脊液内Glu和GABA含量的变化。结果ACM组大鼠在注射ACM后30min出现癫痫行为,2h恢复正常。免疫组织化学显示:ACM作用后2h,大鼠大脑皮质及海马内Glu免疫反应阳性神经元数和平均光密度值明显增高,4h达高峰(P<0.05),12h恢复正常水平;ACM作用后2h,大鼠大脑皮质及海马GABA免疫反应阳性神经元数和平均光密度值明显减弱(P<0.05),12h恢复正常水平。HPLC方法显示:ACM作用后2h大鼠大脑皮质、海马及脑脊液中Glu含量均开始增加,4h达高峰(P<0.05);ACM作用后2h大脑皮质、海马及脑脊液中GABA含量均开始降低,4h达最低(P<0.05)。结论马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液可影响大鼠脑内Glu和GABA的表达,并导致动物痫性发作。
- 李忠玉刘庆莹朱长庚王伟
- 关键词:星形胶质细胞谷氨酸
- 马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液对正常大鼠脑内IL-1β的影响
- 2005年
- 目的揭示星形胶质细胞对大鼠脑内IL-1β的影响及其在癫痫发病中的作用。方法将马桑内酯(coriarialactone,CL)激活的星形胶质细胞条件培养液(astrocytic conditioned medium,ACM)注射入正常SD大鼠侧脑室,观察大鼠的行为变化,运用免疫组织化学及放射免疫分析的方法,观察大脑皮质、海马区域内白细胞介素1β(IL-1β)免疫反应的变化及脑组织匀浆、脑脊液内IL-1β含量的变化。结果ACM组大鼠在注射ACM后30min出现癫痫行为,2h恢复正常;免疫组织化学显示ACM作用后2h,IL-1β免疫反应阳性神经元数和平均吸光度值明显增加(均P<0.05),12h恢复正常水平;放射免疫分析显示ACM作用后2h大脑皮质、海马IL-1β含量均开始增加,4h达高峰(P<0.05),脑脊液中IL-1β含量则在ACM作用后2h即达到高峰。结论马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液可增强大鼠脑内IL-1β的表达,并导致痫性发作。
- 李忠玉刘庆莹朱长庚王伟
- 关键词:星形胶质细胞白细胞介素1Β
- 大鼠骨髓间充质干细胞的优化获取及生物学鉴定被引量:33
- 2003年
- 目的 优化骨髓间充质干细胞的体外获取方法并鉴定。方法 取幼年SD大鼠骨髓 ,分离骨髓间充质干细胞 ,观察细胞形态特征、生长状况及表面抗原表达。结果 分离培养的细胞有两种不同的形态 ,一种为小梭形细胞 ,一种为大扁平细胞。第 9代以前生长性状稳定 ,增殖能力强 ,细胞倍增时间为 4 8 2h ;超微结构显示为早期幼稚细胞形态 ;免疫细胞化学检测细胞表达CD4 4、CD5 4、CD71,但不表达CD34、CD6 8、层粘连蛋白 ;在有限的传代数内 ,抗原表达无改变 ;与传统方法相比 ,细胞纯度高。结论 分离培养的细胞成分单一 ,具有干细胞特性 。
- 王运涛郑启新郭晓东刘勇李忠玉吴永超
- 关键词:骨髓间充质干细胞生物学鉴定免疫组织化学
- 马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液及CNQX对正常大鼠脑内及培养的神经元内NSF的影响
- 2007年
- 目的揭示星形胶质细胞对神经元内N-乙基顺丁烯二酰亚胺敏感性的融合蛋白(NSF)和AMPA受体的影响及其在癫痫发病中的作用。方法将马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液(ACM)注入正常SD大鼠侧脑室,观察其行为变化;运用免疫组织化学方法观察其大脑皮质、海马内NSF免疫反应的变化;将培养的神经元随机分为对照组、ACM组及CNQX+ACM组,免疫细胞化学方法观察NSF表达的变化,Western blotting法检测NSF含量的变化。结果ACM组大鼠在注射后30min出现癫痫行为。免疫组织化学染色结果显示:1.ACM作用后2h及4h,大鼠大脑皮质及海马内NSF免疫反应阳性神经元数和平均吸光度明显降低(P<0.05);2.培养的神经元的免疫细胞化学染色结果显示,ACM组在作用4h及8h时,NSF免疫阳性反应产物与对照组比较明显减少(P<0.05)。Western blotting法检测NSF含量,在ACM作用4h及8h时较对照组及CNQX+ACM组明显减少(P<0.05)。结论ACM可下调神经元内NSF的表达,并导致动物痫性发作,而运用AMPA受体拮抗剂CNQX则能阻断其下调作用,提示ACM对NSF的下调作用可能与AMPA受体有关。
- 李忠玉刘庆莹朱长庚王伟
- 关键词:星形胶质细胞
- 马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液对正常大鼠脑内TNF-α的影响
- 2005年
- 目的揭示激活的星形胶质细胞条件培养液对正常大鼠脑内TNF-α的影响。方法将马桑内酯(coriarialactone,CL)激活的星形胶质细胞条件培养液(astrocyticconditionedmedium,ACM)注射入正常SD大鼠侧脑室,观察大鼠的行为变化,运用免疫组织化学及放射免疫分析的方法,观察脑组织匀浆及脑脊液内肿瘤坏死因子(TNF-α)含量的变化。结果ACM组大鼠在注射ACM30min后出现癫痫行为,2h后恢复正常;免疫组织化学显示:ACM作用后2h,TNF-α免疫反应阳性神经元数和平均光密度值明显增高,4h达高峰(P<0.05),12h恢复正常水平;放射免疫分析方法显示ACM作用后2h大鼠大脑皮质、海马及脑脊液中TNF-α含量均开始增加,4h达高峰(P<0.05)。结论以上实验结果提示马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液可增强大鼠TNF-α的表达,并与癫痫发病有关。
- 李忠玉刘庆莹朱长庚王伟
- 关键词:条件培养液星形胶质细胞
- TNF—α反义寡核苷酸阻断后CL刺激的星形胶质细胞培养基提取液对正常大鼠的影响
- 2003年
- 李忠玉朱家祥朱长庚刘庆莹魏瑛
- 关键词:反义寡核苷酸提取液
- 马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液对正常大鼠脑内孕激素及其受体的影响被引量:2
- 2006年
- 目的探讨星形胶质细胞对大鼠脑内孕激素及其受体的影响以及在癫痫发病中的作用。方法将马桑内酯(Coriaria lactone,CL)激活的星形胶质细胞条件培养液(Astrocytic conditioned medium,ACM)注射入正常SD大鼠侧脑室后,观察大鼠的行为变化;运用免疫组织化学方法观察大脑皮质及海马中孕激素受体(PR)表达的变化;运用放射免疫分析方法,观察脑组织匀浆及脑脊液内孕酮含量的变化。结果ACM组大鼠在注射ACM后30min出现癫痫行为,2h恢复正常;免疫组织化学显示:ACM作用后2h,PR免疫反应阳性神经元数和平均光密度值明显降低,4h达最低(P<0.05),12h恢复正常水平;放射免疫分析方法显示ACM组大鼠在侧脑室注射ACM后2h,脑脊液中孕酮含量明显升高;而海马组织和大脑皮质中孕酮含量则在注药后4h明显降低,与对照组比较均有显著差异(P<0.05)。结论以上实验结果提示马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液可通过降低大鼠脑内孕激素及其受体的表达参与癫痫的反复发作。
- 李忠玉刘庆莹朱长庚王伟
- 关键词:条件培养液星形胶质细胞孕激素受体
- TNF-α激活的星形胶质细胞条件培养液对培养的海马星形胶质细胞的兴奋作用被引量:5
- 2003年
- 目的 揭示星形胶质细胞在癫痫发病中的作用。方法 将TNF α激活的星形胶质细胞条件培养液 (Astro cyticConditionedMedium ,ACM)作用于纯化培养的海马星形胶质细胞 ,运用免疫细胞化学的方法观察核转录因子NF κBp6 5的表达情况。结果 ACM作用后 30min即可诱导NF κBp6 5的核内表达 ,2h达高峰。结论 TNF α激活的星形胶质细胞可通过释放可溶性的神经活性物质使培养的海马星形胶质细胞激活 ,兴奋性升高。
- 李忠玉朱家祥朱长庚刘庆莹魏瑛赵虎
- 关键词:条件培养液星形胶质细胞核因子-ΚB
- 马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液对正常大鼠脑内及培养的神经元内PLCβ1的影响
- 2007年
- 目的揭示星形胶质细胞对大鼠脑内及培养的神经元磷脂酶Cβ1(PLCβ1)的影响及其在癫痫发病中的作用。方法将马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液(astrocyte-conditioned medium,ACM)注射入正常SD大鼠侧脑室,观察大鼠的行为变化;运用免疫组织化学方法,观察大鼠大脑皮质、海马内PLCβ1免疫反应的变化;将培养的神经元随机分为2组:1.对照组(无血清培养基组),2.ACM组。各组细胞分别培养4、8、12h后,免疫细胞化学方法观察培养神经元内PLCβ1表达的变化,Western blot法检测各组培养神经元PLCβ1含量的变化。结果ACM组大鼠在注射ACM后30 min出现癫痫行为,2 h恢复正常;免疫组织化学显示:ACM作用后4h,大鼠大脑皮质、海马PLCβ1免疫反应阳性神经元数和平均光密度值显著增高(P<0.05);培养神经元的免疫细胞化学染色证明ACM组在作用4h时PLCβ1免疫阳性反应产物明显增加,与对照组比较有明显差异(P<0.05);Western blot结果表明PLCβ1含量在ACM作用4h较对照组明显增多(P<0.05)。结论马桑内酯激活的星形胶质细胞条件培养液可上调大鼠脑内及培养的神经元内PLCβ1的表达,并导致动物痫性发作。
- 李忠玉刘庆莹朱长庚王伟
- 关键词:星形胶质细胞
- 星形胶质细胞、神经-免疫-内分泌因素与癫痫发病的关系
- 癫痫(epilepsy)是一种以神经元反复过度放电为特征的临床综合征,对其机制的研究具有重要的意义。很多文献报道,癫痫在其发生、发展的过程中,除了神经元的明显病理改变外,还伴随着非常显著的星形胶质细胞形态和功能的异常,这...
- 李忠玉
- 关键词:星形胶质细胞肿瘤坏死因子-Α白细胞介素1Β谷氨酸Γ-氨基丁酸癫痫