陈义锋
- 作品数：12 被引量：18H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金教育部科学技术研究重点项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 高致病性AIV复合多表位重组鸡痘活载体疫苗的构建及表达研究
- 本研究基于各表位基本独立的要求,结合计算机分析,以H3、H9亚型流感的HA抗原表位,流感病毒的其它主要抗原基因(NP、NA、M)表位,利用柔性氨基酸将其串联,再附以Kozak序列和适当的酶切位点,设计并合成一段长765b...
- 贾雷立金宁一金扩世鲁会军郑敏李昌王瑞琳连海王浩然尹荣兰夏志平陈义锋金明兰
- 关键词：流感表位活载体疫苗
- 新城疫强毒株F蛋白裂解位点基因串联的构建及其真核表达
- 由于 NDV 强弱毒株的快速鉴定在疫苗株的筛选、进出口检疫等方面有重要的意义。常规的 NDV 毒力鉴定方法,如鸡胚平均致死试验、一日龄鸡脑内致病指数试验、六周龄鸡静脉致病指数试验和空斑形成法等,在应用时费力、费时,并且
- 刘成宏金扩世金宁一鲁会军陈义锋
- 文献传递
- 新城疫强毒株F蛋白裂解位点串联基因的构建及其原核表达被引量：3
- 2007年
- 目的构建鸡新城疫(ND)强毒株多裂解位点串联基因表达载体,为建立NDV强弱毒株的ELISA鉴别方法奠定基础。方法人工合成一段包含4种不同NDV强毒株裂解位点的基因Fe(F prote in multitude epi-position),其中各裂解位点之间用Linker(GGGGS)使其串联,然后进行2倍和4倍拷贝,并定向克隆至原核表达质粒pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28a(+)/2Fe和pET-28a(+)/4Fe,进行表达和Western blot鉴定。结果构建的原核表达重组质粒pET-28a(+)/2Fe和pET-28 a(+)/4Fe测序正确。Western blot检测结果表明,2Fe、4Fe蛋白均与新城疫强毒株F48E9阳性血清呈阳性反应,而与新城疫弱毒株V4阳性血清呈阴性反应。结论已成功构建NDV强毒株F蛋白裂解位点串联基因表达载体,为建立NDV强弱毒株的ELISA鉴别方法提供理论依据。
- 刘成宏金扩世金宁一鲁会军贾雷立陈义锋金明兰姜鲲
- 关键词：新城疫强毒株裂解位点串联基因
- 流感疫苗的研究现状和前景
- 流感是第一个实行全球性监测的传染病,对人及畜、禽的危害十分巨大。除禽流感外,常见的还有人流感、马流感和猪流感等。动物流感中禽流感与人类流感及人类健康的_关系最为密切,被认为是人流感病毒发生变异的新的基冈的来源。1997...
- 陈义锋贾雷立金宁一
- 流感疫苗的研究现状和前景
- 流感是第一个实行全球性监测的传染病,对人及畜、禽的危害十分巨大。除禽流感外,常见的还有人流感、马流感和猪流感等。动物流感中禽流感与人类流感及人类健康的关系最为密切,被认为是人流感病毒发生变异的新的基因的来源。1997年香...
- 陈义锋贾雷立金宁一
- 关键词：流行性感冒流感疫苗
- 文献传递
- 禽流感疫苗的研究进展
- 来禽流感的在全球范围内流行,不但带来了巨大的经济损失并开始威胁人类的健康。由于其重要的经济和公共卫生学意义,使得禽流感的防控显得突出重要.疫苗的使用是控制禽流感流行的主要手段。目前实际应用中以禽流感全毒灭活苗为主,但由于...
- 南文龙金宁一鲁会军徐一鸣田明尧陈义锋赵翠青田宇飞
- 关键词：禽流感疫苗研制基因工程技术
- A型H3579亚型流感多表位核酸疫苗小鼠实验免疫研究
- 2009年
- 目的为了应对流感流行多亚型并存的局面,进行了多表位核酸疫苗设计,并观察其免疫小鼠的细胞和体液免疫应答反应。方法设计并合成了含有H3、H9的HA和H5N1NA中和表位,M、NP基因保守序列CTL表位的多表位基因盒(Epi)。采用pVAX载体对H5HA、H7HA及Epi进行融合表达。经肌肉注射免疫6～8周龄雌性Balb/c小鼠,ELISA法检测小鼠血清中的针对H3579亚型流感抗体。三免后2周,分离脾淋巴细胞,进行T淋巴细胞转化试验和T淋巴细胞亚类数量检测。结果免疫小鼠获得了针对H3579亚型流感的体液和细胞免疫反应。结论完整HA抗原结合多表位的DNA疫苗模式的成功,预示了该DNA疫苗可能可以有效应对当前多种亚型流感并存的局面,并为其他种类流感疫苗的研究奠定了基础。
- 南文龙金宁一鲁会军陈义锋赵翠青田明尧白靓谭磊张金双
- 关键词：流感核酸疫苗多表位
- H3、H5、H7、H9亚型流感病毒通用多表位核酸疫苗构建及表达研究被引量：8
- 2007年
- 目的构建表达A型流感病毒多种表位的核酸疫苗,并研究其在幼仓鼠肾细胞(BHK细胞)内表达产物的生物学活性。方法筛选流感病毒主要抗原(HA、NA、NP、M)表位基因,以生物信息学软件优化其排列结构,合成流感通用的复合多表位基因(Epi),以H5、H7亚型流感病毒HA融合表达基因为骨架,将多表位基因Epi插入构建H7HA-Epi-H5HA阅读盒,定向克隆至pVAX1,构建抗A型流感H3579亚型的pVAX1-H7HA-Epi-H5HA。最后将该重组质粒转染BHK细胞,提取细胞总RNA,以RT-PCR方法检测目的基因;以间接免疫荧光试验(IFA)初步测其表达产物抗原性。结果RT-PCR检测到目的基因;IFA检测到特异性荧光存在。结论本试验所构建的重组质粒pVAX1-H7HA-Epi- H5HA,在真核细胞内均获了有效地转录和表达;而且其表达产物均能与相应的抗体特异性结合,证明了其具有一定的生物学活性和抗原性,有望成为抗多种A型流感病毒的通用核酸疫苗。
- 陈义锋金宁一贾雷立鲁会军田明尧南文龙马鸣潇刘成宏沈国顺马海利陈晓月
- 关键词：表位流感病毒核酸疫苗
- H3、H5、H7、H9亚型流感病毒通用多表位重组鸡痘病毒构建被引量：9
- 2007年
- 目的构建表达H3、H5、H7、H9亚型流感病毒通用多表位重组鸡痘病毒活载体疫苗候选株。方法筛选流感病毒主要抗原(HANANPM)优势抗原表位基因,以生物信息学软件优化其排列结构合成流感多表位基因(Epi),以H5、H7HA融合表达基因为骨架,将多表位基因插入构建H7HA-Epi-H5HA阅读盒,定向克隆至鸡痘病毒表达载体pUTA-2复合启动子(ATI-P7.5×20)下游,构建重组鸡痘病毒中间转移载体pUTA-2-H7HA-Epi-H5HA。应用脂质体介导的转染法,将该重组鸡痘病毒中间转移载体与282E4株鸡痘病毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),经BrdU进行3次加压筛选挑斑纯化后传代,并对重组以鸡痘病毒进行PCR和IFA检测和Western blot分析。结果成功构建了重组鸡痘病毒中间转移载体pUTA-2-H7HA-Epi-H5HA,PCR、IFA和Western blot检测阳性。结论筛选出稳定共表达H5H7HA基因和通用多表位基因的重组鸡痘病毒vUTA2-H7HA-Epi-H5HA株,该重组鸡痘病毒的构建为跨种通用型流感病毒活载体疫苗的研究奠定了物质基础。
- 陈义锋金宁一贾雷立鲁会军南文龙田明尧陈晓月马海利马鸣潇刘成宏
- 关键词：重组鸡痘病毒
- 高致病性AIV复合多表位重组鸡痘活载体疫苗的构建及表达研究
- 本研究基于各表位基本独立的要求,结合计算机分析,以H3、H9亚型流感的HA抗原表位,流感病毒的其它主要抗原基因(NP、NA、M)表位,利用柔性氨基酸将其串联,再附以Kozak序列和适当的酶切位点,设计并合成一段长765b...
- 贾雷立金宁一金扩世鲁会军郑敏李昌王瑞琳连海王浩然尹荣兰夏志平陈义锋金明兰
- 关键词：流感表位活载体疫苗
- 文献传递
