吴群悦
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中山大学生命科学学院生物化学系更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省重点科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 内皮细胞抑制素酵母工程菌的高密度发酵及产物纯化和活性分析被引量：4
- 2004年
- 用 30升发酵罐研究了内皮细胞抑制素 (EDN)酵母工程菌P .pastorisGS115 (pPIC9K EDN)的高密度发酵工艺 ,摸索出发酵培养基 ,pH ,诱导时间等对菌体生长和基因表达的影响 .根据所确定的最适条件进行发酵 ,通过补料和甲醇诱导 4 8h后 ,工程菌GS115 (pPIC9K EDN)生物量的A60 0 值达到 2 5 0 ,分泌量为 15 0mg L .发酵液经StreamlineSP ,SepharoseSPFF离子交换柱和Sepharose HeparinHiTrap亲和柱纯化 ,产物纯度达 97%以上 ,回收率为 6 0 % .Western印迹结果表明 ,酵母工程菌GS115 (pPIC9K EDN)表达的重组人内皮细胞抑制素具有天然EDN的免疫原性 .MTT法和抑癌实验结果显示 :纯化产物能抑制人脐静脉内皮细胞的增殖并能抑制移植于小鼠的黑色素瘤的生长 ,其平均抑瘤率是 94 2 % .
- 吴江雪符武钊张添元罗进贤吴群悦
- 关键词：内皮细胞抑制素纯化毕赤酵母
- 异淀粉酶基因的克隆表达以及可降解淀粉酿酒酵母工程菌的构建
- 为了提高淀粉的利用率,本研究采用PCR方法克隆了来源于Pseudomonasamyloderamosa SB-15的异淀粉酶基因(iso),重组进克隆载体pBluescript M13+进行DNA序列分析,再将iso基因...
- 吴群悦
- 关键词：异淀粉酶基因克隆与表达淀粉水解酒精生产
- 文献传递
- 内皮细胞抑制素在毕节酵母中的表达与活性分析被引量：3
- 2003年
- 采用PCR技术从人胎脑cDNA库中扩增了人内皮细胞抑制素基因。经DNA序列分析后将扩增的基因克隆至酵母载体pPIC9K,获得的重组质粒pPIC9K＿EDN转化毕节酵母GS115,构建表达内皮细胞抑制素的酵母工程菌P.pastorisGS115(pPIC9K＿EDN)。SDS＿PAGE分析结果显示:人内皮细胞抑制素在重组酵母GS115(pPIC9K＿EDN)中获得高效表达。用30L发酵罐构对建的工程菌进行高密度发酵,经甲醇诱导48h,生物量达到250OD,分泌量为150mg L,发酵液经SPStreamline,SPSepharoseFF阳离子交换柱和SepharoseHeparinHiTrap柱纯化,产物纯度达到98%。纯化产物具有免疫活性并能抑制bFGF诱导的鸡胚绒毛尿囊膜血管生成。
- 吴江雪符武钊张添元罗进贤吴群悦
- 关键词：毕节酵母高密度发酵纯化生物活性分析
- 人血管能抑素免疫兔抗血清制备及其特性测定被引量：1
- 2003年
- 纯化的人血管能抑素包涵体进行SDS＿PAGE分离,切胶回收目的蛋白,与弗氏不完全佐剂充分乳化后,进行多点皮下注射免疫新西兰白兔,制备兔抗人血管能抑素抗血清,抗血清去除交叉反应抗体后,进行WesternBlotting分析抗血清与人血管能抑素及其N端和C端片段的抗原抗体反应特性。结果表明,经过4次加强免疫后,获得了高效价的兔抗人血管能抑素抗血清。抗血清去除交叉反应抗体后,WesternBlotting分析表明,它能与人血管能抑素发生特异的抗原抗体反应,同时还能与人血管能抑素的N端片段和C端片段发生特异性较弱的抗原抗体反应。证明制备的兔抗人血管能抑素抗血清能应用于人血管能抑素及其N端和C端片段免疫学研究中。
- 贺国安罗进贤李瑞芳张添元吴群悦
- 关键词：N端片段C端片段抗血清免疫
- 可降解淀粉酿酒酵母基因工程菌的构建及其生产应用被引量：2
- 2007年
- 将酿酒酵母的rDNA片段,黑曲霉葡萄糖淀粉酶基因表达盒及G418抗性基因表达盒重组进经过改造的质粒pSP72,构建酿酒酵母整合型质粒YIp4RGAn及YIp19RGAn,转化酿酒酵母实验室菌株GRF18、生产菌株JL108、SD和JM,获得能高效表达葡萄糖淀粉酶和分解淀粉的酿酒酵母基因工菌。Southern印迹分析证明,葡萄糖淀粉酶基因已整合进工程菌染色体。这些工程菌在含有20%淀粉的培养基中培养,产酒率都在11%以上。
- 程少菊张添元罗进贤吴群悦
- 关键词：降解淀粉酒精生产重组DNA技术
