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刘柱
作品数:
4
被引量:17
H指数:2
供职机构:
长春生物制品研究所
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相关领域:
化学工程
生物学
轻工技术与工程
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合作作者
王志武
长春生物制品研究所
盛君
长春生物制品研究所
李武平
长春生物制品研究所
张雪梅
长春生物制品研究所
王宣军
长春生物制品研究所
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生物学
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轻工技术与工...
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人生长激素
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绿脓杆菌外毒...
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高密度发酵
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RHGH
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吉林大学
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作者
4篇
盛君
4篇
刘柱
4篇
王志武
2篇
周华
2篇
李武平
2篇
朱宏伟
2篇
姚为民
2篇
王宣军
2篇
张雪梅
1篇
万里
1篇
安伟
1篇
贺玉泉
1篇
石晓丽
1篇
郑辉
1篇
周雪艳
1篇
王冬倩
1篇
赵大鹏
1篇
蒙冲
1篇
陈梅
1篇
陈宇
传媒
4篇
中国生物制品...
年份
2篇
2000
1篇
1999
1篇
1997
共
4
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被引量排序
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人肝脏组织cDNA文库的构建及应用
被引量:1
1997年
用氯化铯-异硫氰酸胍超速离心法(CsCl2-GTC)提取肝检组织总RNA,用mRNA提取试剂盒分离mRNA。将分离得到的mRNA在逆转录酶存在的条件下,合成cDNA的第一链;在大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ和RNaseH存在的条件下,合成cDNA的第二链。在引物设计上,引进M13M4引物及EcoRⅠ酶切位点,同时含有Olygod(T)8。为了验证合成的cDNA文库的可靠性,我们设计了几对引物用于PCR扩增TPO和IGF-1基因。实验结果表明,PCR有效地扩增分离出TPO和IGF-1基因。经酶切鉴定和DNA序列分析证实,该序列与文献报道完全一致。该cDNA文库的构建成功,为今后分离和克隆肝细胞产生的细胞因子打下了基础;同时也为从分子水平上研究肝细胞的生物学功能提供了重要材料。
盛君
朱宏伟
赵大鹏
王志武
陈梅
刘柱
周华
王宣军
安伟
关键词:
CDNA
肝细胞
CDNA文库
IL-2与绿脓杆菌外毒素A嵌合蛋白的研究
被引量:1
2000年
目的获得IL-2绿脓杆菌外毒素A嵌合蛋白,用于相关疾病的治疗。方法用PCR方法扩增分 离IL-2和PEA的基因,将IL-2基因的3’端与绿脓杆菌外毒素A基因的5’端连接后克隆至pBV220上,转化大肠杆菌 DH5a。挑取菌落培养,快速提取质粒进行酶切,并在温控条件下表达。结果经鉴定,获得重组质粒pBV/IL-2/ PEA。温控诱导表达后SDS-PAGE分析表明,在51 000处有蛋白表达带。以鼠抗人IL-2单克隆抗体经免疫印迹验 证,该表达蛋白为所设计的嵌合蛋白。结论本研究建立了一种制备IL-2/PEA嵌合蛋白的方法,该方法也可用于 表达其他蛋白。
刘柱
周华
姚为民
万里
张雪梅
王志武
石晓丽
郑辉
朱宏伟
盛君
周雪艳
陈宇
贺玉泉
周传开
关键词:
绿脓杆菌外毒素A
IL-2
基因重组
克隆
嵌合蛋白
重组分泌型人生长激素的纯化
被引量:2
1999年
rh GH工程菌 W310 0发酵培养后 ,经低渗裂解、阴离子交换柱层析、疏水层析、分子筛层析 ,得到纯化的人生长激素 ,纯度为 97%以上 ,比活大于 2 .5 IU /
王宣军
王冬倩
刘欣荣
王志武
蒙冲
郭凤云
李武平
刘柱
刘畅
姚为民
盛君
关键词:
RHGH
纯化
人生长激素
分泌型重组人生长激素工程菌的高密度发酵
被引量:15
2000年
目的 研究葡萄糖剂补加策略 ,以获得大肠杆菌的高密度发酵和人生长激素 (HGH)的高表达。方法 采用批式发酵和补料批式发酵方式 ,葡萄糖的补加采用逐渐增加的方式 ,包括pH、DO和浓度控制。结果 获得HGH的表达量为 30 0mg/L ,光密度达到 12 4(A60 0 )。结论 在大肠杆菌中表达异源蛋白时 ,葡萄糖的补加方式是关键因素 。
李武平
王志武
朱丽娜
张雪梅
刘丽军
刘柱
盛君
郝淑美
孙宏
向泽敏
关键词:
人生长激素
大肠杆菌
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