盛君
- 作品数：13 被引量：33H指数：3
- 供职机构：长春生物制品研究所更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 胰岛素样生长因子I(IGF-I)基因的克隆及分泌表达被引量：2
- 2004年
- 目的 构建原核分泌型表达载体并高效表达胰岛素样生长因子I(IGF I)。方法 构建出 2种分泌型表达载体 ,命名为pCSA和pCST ,并将胰岛素样生长因子I(IGF I)基因插入pCSA和pCST中 ,转化E .coliW3110 ,经筛选获得工程菌pCSA/IGF I/W3110和pCST/IGF 1/W3110 ,并进行表达。结果 经SDS PAGE检测 ,在相对分子质量 76 0 0处有明显表达带 ,Westernblot表明重组蛋白具有IGF I的抗原性。结论 原核分泌型IGF I的高效表达 ,为进一步研究人IGF
- 赵大鹏王晓宇刘畅郭桥戚凤春蒙冲吴晓娟王妍盛君杨煜傅学奇
- 关键词：胰岛素样生长因子IIGF-I基因克隆分泌表达质粒
- 生物素标记核酸通用探针的研制
- 盛君
- 关键词：生物素标记核酸
- 重组分泌型人生长激素的纯化被引量：2
- 1999年
- rh GH工程菌 W310 0发酵培养后 ,经低渗裂解、阴离子交换柱层析、疏水层析、分子筛层析 ,得到纯化的人生长激素 ,纯度为 97%以上 ,比活大于 2 .5 IU /
- 王宣军王冬倩刘欣荣王志武蒙冲郭凤云李武平刘柱刘畅姚为民盛君
- 关键词：RHGH纯化人生长激素
- 聚乙二醇修饰重组人IFNα_(2b)体外理化性质的初步研究被引量：4
- 2002年
- 目的 分析聚乙二醇（PEG）化学修饰重组人IFNα2b（PEC-IFNα2b）的体外理化性质,并与修饰前IFNα2b进行比较。方法 将IFNα2b与PEG-IFNα2b进行胰酶消化和56℃保温实验,不同时间取样测其抗病毒活性。IFNα2b的抗体与IFNα2b和PEG-IFNα2b做双相琼脂扩散。结果 修饰后的IFNα2b的抗胰蛋白酶降解及抗热能力均明显优于未修饰的IFNα2b,抗原性亦明显下降。结论 对PEG-IFNα2b的体外理化性质进行初步分析,为研究和开发长效干扰素提供理论依据。
- 刘丽军刘丹朱迅张春丽朱丽娜顾建阳刘蓬实王万明尹鸿志盛君
- 关键词：聚乙二醇修饰抗原性干扰素
- 酶标法检测基因工程干扰素半成品中残余宿主菌蛋白含量被引量：1
- 1999年
- 基因工程干扰素是一类具有抗病素、抗肿瘤和免疫调节作用的细胞因子，被广泛地应用于临床治疗中。根据《中国生物制品规程》基因工程干扰素半成品中残余宿主菌蛋白含量小于总蛋白量的２的要求，我们建立了酶标法用于该项目的检定［１，２］。１材料与方法１．１包被抗体...
- 石晓丽刘景会王东倩万里姚为民张雪梅刘畅盛君
- 关键词：干扰素酶标法
- IL-2与绿脓杆菌外毒素A嵌合蛋白的研究被引量：1
- 2000年
- 目的获得ＩＬ－２绿脓杆菌外毒素Ａ嵌合蛋白，用于相关疾病的治疗。方法用ＰＣＲ方法扩增分 离ＩＬ－２和ＰＥＡ的基因，将ＩＬ－２基因的３’端与绿脓杆菌外毒素Ａ基因的５’端连接后克隆至ｐＢＶ２２０上，转化大肠杆菌 ＤＨ５ａ。挑取菌落培养，快速提取质粒进行酶切，并在温控条件下表达。结果经鉴定，获得重组质粒ｐＢＶ／ＩＬ－２／ ＰＥＡ。温控诱导表达后ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明，在５１ ０００处有蛋白表达带。以鼠抗人ＩＬ－２单克隆抗体经免疫印迹验 证，该表达蛋白为所设计的嵌合蛋白。结论本研究建立了一种制备ＩＬ－２／ＰＥＡ嵌合蛋白的方法，该方法也可用于 表达其他蛋白。
- 刘柱周华姚为民万里张雪梅王志武石晓丽郑辉朱宏伟盛君周雪艳陈宇贺玉泉周传开
- 关键词：绿脓杆菌外毒素AIL-2基因重组克隆嵌合蛋白
- 类胰岛素生长因子I(IGF-I)基因的克隆及融合蛋白的表达被引量：1
- 2001年
- 目的 扩增类胰岛素生长因子Ｉ（ＩＧＦ－Ｉ）２１０ｂｐ的ＤＮＡ片段，将其克隆到ＰＧＥＸ－１ λＴ质粒，并转化到 Ｅ．ｃｏｌｉ ＮＨ５２２中高效表达。方法 用改进的ＲＴ－ＰＣＲ法合成人肝脏ｃＤＮＡ，然后从该ｃＤＮＡ文库中扩增出ＩＧＦ－Ｉ基 因。将扩增的ＩＧＦ－Ｉ ｃＤＮＡ用 ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲ Ｉ双酶切后，插入到同样双酶切处理的ｐＧＥＸ－１λＴ载体中，连接转化 Ｅ． ｃｏｌｉ ＮＭ５２２，筛选克隆，酶切鉴定后，进行了核苷酸序列分析及表达。结果 将ＩＰＴＧ诱导表达的菌体离心收集，经 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，在相对分子质量３４０００处可见明显高表达带，表达量可占菌体蛋白总量的２０％以上。免疫印迹表 明重组蛋白具有ＩＧＦ－Ｉ的抗原性。结论 重组人ＩＧＦ－Ｉ的成功克隆与表达，将为进一步研究人ＩＣＦ－Ｉ的生物学特性 打下基础。
- 赵大鹏王晓宇刘畅戚凤春蒙冲王影王妍盛君杨煜傅学奇
- 关键词：PCR克隆融合蛋白
- 人肝脏组织cDNA文库的构建及应用被引量：1
- 1997年
- 用氯化铯-异硫氰酸胍超速离心法（CsCl2-GTC）提取肝检组织总RNA，用mRNA提取试剂盒分离mRNA。将分离得到的mRNA在逆转录酶存在的条件下，合成cDNA的第一链；在大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ和RNaseH存在的条件下，合成cDNA的第二链。在引物设计上，引进M13M4引物及EcoRⅠ酶切位点，同时含有Olygod（T）8。为了验证合成的cDNA文库的可靠性，我们设计了几对引物用于PCR扩增TPO和IGF－1基因。实验结果表明，PCR有效地扩增分离出TPO和IGF－1基因。经酶切鉴定和DNA序列分析证实，该序列与文献报道完全一致。该cDNA文库的构建成功，为今后分离和克隆肝细胞产生的细胞因子打下了基础；同时也为从分子水平上研究肝细胞的生物学功能提供了重要材料。
- 盛君朱宏伟赵大鹏王志武陈梅刘柱周华王宣军安伟
- 关键词：CDNA肝细胞CDNA文库
- 应用载体介导的RNAi技术抑制HBsAg在重组CHO细胞中的表达被引量：1
- 2006年
- 目的应用载体介导的RNA干扰技术，特异地干扰重组CHO细胞中乙型肝炎病毒s基因的表达。方法设计两段靶向HBVs基因的特异性siRNA，合成两对64nt寡核苷酸，插入载体H1启动子下游，构建表达干扰性发夹状RNA（Short hairpin RNA，shRNA）的载体pHs-9和pHs-170，转染重组CHO细胞（该CHO细胞整合了HBVs基因，可稳定表达s抗原），用ELISA法检测HBsAg的表达。结果pHs-9和pHs-170转染重组CHO细胞后24—120h，在细胞培养上清中检测到HBsAg表达降低，抑制率均达到70％左右。结论pHs-9和pHs-170已成功地表达了发夹状siRNA，并抑制了重组CHO细胞中HBsAg的表达。
- 刘畅王志武谭芳迟春萍时成波赵大鹏张雪梅吴晓娟苏凯盛君
- 关键词：RNAISHRNA重组CHO细胞HBSAG
- 应用HEV RNA RT-PCR诊断戊型肝炎的研究
- 1997年
- 根据我国HEV基因序列分析，设计引物，检测临床上可疑HE患者25例，82份样品。在患者血清及粪便样品中，HEVRNA的阳性率分别为77．78％和63．16％；临床诊断为HE的20例患者，HEVRNA全为阳性，5例抗HEV阴性而未分型的患者，HEVRNA也为阳性。血中HEVRNA可持续90天，粪便中可持续33天。
- 梁简江瑶李春晖盛君郭凤云王玉梅刘畅刘欣荣刘永久史美龙
- 关键词：戊型肝炎戊型肝炎病毒
