冯利兴 作品数:5 被引量:30 H指数:3 供职机构: 中国科学院上海药物研究所 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 中国科学院知识创新工程重要方向项目 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
核桃外果皮不同萃取部位对人宫颈癌HeLa细胞抑制作用研究 2010年 【目的】研究核桃外果皮不同萃取部位对人宫颈癌细胞的抑制作用,筛选核桃外果皮抗肿瘤活性部位。【方法】采用MTT法,选用人宫颈癌HeLa细胞,对核桃外果皮不同萃取部位进行抗肿瘤活性筛选。【结果】石油醚萃取部位、氯仿萃取部位、乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位对HeLa细胞的IC50分别为158.81、40.43、130.49和137.67 mg/L,水相部位对HeLa细胞无抑制作用。【结论】核桃外果皮石油醚萃取部位、氯仿萃取部位、乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位对HeLa细胞均有抑制作用,其中氯仿萃取部位对HeLa细胞具有较强的抑制作用,初步认定氯仿萃取部位为核桃外果皮的抗肿瘤活性有效部位。 张瑞廷 包晓玮 岳庆喜 刘璇 冯利兴 傅力关键词:人宫颈癌HELA细胞 蟾毒灵诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的蛋白组学研究 被引量:8 2012年 目的:该文通过考察蟾毒灵(bufalin)处理人宫颈癌HeLa细胞株后对细胞蛋白质表达谱的影响,寻找蟾毒灵在HeLa细胞中的可能作用靶点。方法:通过MTT检测细胞活性确定蟾毒灵的IC50,并通过流式细胞术和Hoechst 33342染色检测蟾毒灵诱导细胞凋亡。应用蛋白质组学技术寻找差异表达蛋白点并进行鉴定,用Western blotting试验进行确认。结果:蟾毒灵具有较强的细胞毒作用,IC50(154±21.5)nmol.L-1,可以诱导HeLa细胞发生凋亡。蛋白组学的结果显示蟾毒灵处理组与对照组相比有11个差异表达蛋白,其中9个蛋白点发生了下调;2个蛋白发生了上调。这些蛋白可能是蟾毒灵在HeLa细胞中的作用靶点。Western blotting分析显示heat shock protein 27,vimentin,HNRPK在蟾毒灵处理后的表达调节结果与双向电泳的结果吻合。结论:蟾毒灵可以诱导人宫颈癌HeLa细胞发生凋亡,其凋亡诱导作用可能是多个靶点蛋白共同参与的结果。 潘素娜 王育红 冯利兴 范翠英 果德安 刘璇 樊金玲关键词:蟾毒灵 HELA细胞 细胞凋亡 双向电泳 蛋白酶体结构和活性调节机制的研究进展 被引量:5 2015年 蛋白酶体负责细胞内绝大多数蛋白质的降解,几乎对生物体所有的生命活动都具有调控作用.蛋白酶体功能异常能够导致很多疾病.近期,研究者们在蛋白酶体的结构分析和活性调节机制等方面的研究都获得了重要的突破.本文综述了有关蛋白酶体结构和活性调控机制,包括转录调控、翻译后修饰、组装机制等的研究进展,这些对蛋白酶体新的认识将为蛋白酶体相关疾病的研究及相应药物的开发带来新的思路.对于目前蛋白酶体抑制剂的研发本文也做了简要的介绍. 孙鹏 刘淼 冯利兴 刘璇关键词:蛋白酶体 转录调控 翻译后修饰 灵芝总三萜与紫杉醇或与顺铂在对人源肿瘤细胞细胞毒性中的相互作用(英文) 被引量:16 2008年 目的:灵芝三萜类化合物是常被用于辅助性肿瘤治疗的灵芝中具有细胞毒性作用的主要成分。本研究考察灵芝总三萜和化疗药物之间的相互作用。方法:应用了两种肿瘤细胞株即人宫颈瘤HeLa细胞株和人非小细胞肺癌A549细胞株。检测了将灵芝总三萜与紫杉醇或顺铂合用时对细胞的毒性作用,并用Chou and Talalay 合用指数法判断合用的相互作用类型。结果:灵芝总三萜和紫杉醇的合用在HeLa细胞中表现为协同作用而在A549细胞中表现为加合作用。灵芝总三萜与顺铂的合用效果则依赖于该两种药物的作用强度,即当其中一种药物的作用强于另外一种时表现为拮抗作用,而当两种药物的作用相似时表现为协同作用。结论:灵芝总三萜可以促进某些化疗药物的作用。 岳庆喜 关树宏 谢付波 宋肖依 马超 冯利兴 刘璇 果德安关键词:灵芝 灵芝三萜 相互作用 紫杉醇 顺铂 人蛋白酶体亚基PSMB1的重组表达、纯化及在蛋白酶体抑制剂体外筛选中的应用 被引量:1 2012年 蛋白酶体是真核细胞中的一类多亚基蛋白酶复合物,它在胞内蛋白质降解的泛素-蛋白酶体通路中起关键作用。重组表达蛋白酶体的活性亚基可以用于在体外筛选、寻找具有蛋白酶体抑制剂作用的化合物。将人蛋白酶体催化亚基(PSMB1)cDNA的编码区(全长726 bp)克隆至原核表达载体pET28a(+),构建重组质粒pET28a-PSMB1,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过1 mmol/L IPTG,20℃过夜诱导,获得相对分子量约为27 kDa的重组蛋白,采用IMAC亲和层析柱纯化重组蛋白,纯化后的重组蛋白纯度超过95%。重组蛋白酶解后经NanoLC-MS/MS鉴定表明所表达的融合蛋白氨基酸序列完全正确。在体外BIAcore分析中,重组蛋白表现出对不同化合物的选择性结合能力,其中与蛋白酶体抑制剂雷公藤红素的结合较强,10μmol/L的雷公藤红素与重组蛋白的结合达到27 RU,并且具有良好的浓度依赖型。本研究建立了表达、纯化人蛋白酶体催化亚基PSMB1的方法,并应用于具有蛋白酶体抑制活性化合物的体外筛选。 范翠英 冯利兴 张冬梅 潘素娜 刘璇 果德安 樊金玲关键词:原核表达 BIACORE 体外筛选