于法科
- 作品数：4 被引量：3H指数：2
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- 水稻雄配子不育突变体的遗传分析及功能基因克隆
- 水稻是世界上最重要的粮食作物之一，也是植物分子生物学研究的良好单子叶植物模式生物。近年来，转基因水稻被广泛的研究应用。然而，由于转基因的遗传及表达的不稳定性和不可预知性，转基因引起的水稻雌雄配子体发育问题使许多转基因水稻...
- 于法科
- 关键词：基因克隆分子生物学转基因水稻
- 文献传递
- 一个水稻雄配子不育基因MGA1(t)的遗传及表达特征分析被引量：2
- 2011年
- 在水稻转基因材料后代中筛选到一个自交后代标记基因呈1:1异常分离的雄配子不育突变体(暂命名为Male gametophyte abortion1,mga1(t))。该突变体花粉约50%败育,花粉败育表型与T-DNA共分离,且只能通过雌配子传递,表明mga1(t)是一个T-DNA插入引起的雄配子败育突变体。Southern blot分析表明,mga1(t)为单拷贝T-DNA插入突变体。侧翼序列分析发现T-DNA插入在水稻3号染色体上一个Bax inhibitor(BI)-1 like家族蛋白基因的5'非翻译区,该基因可能与细胞程序性死亡有关。RT-PCR表达分析显示MGA1(t)基因在水稻不同生长发育期均有表达,尤其在长度发育为0～7mm的颖花中强表达,表明该基因是一个水稻雄配子优势表达基因。
- 陈睿李清贤于法科杨绍华刘华清周淑芬王锋
- 关键词：水稻T-DNA雄配子不育
- 水稻T-DNA插入雄配子不育突变体的创建被引量：2
- 2012年
- 对6000多个转基因T-DNA插入水稻株系进行异常遗传分离分析(选择标记基因为潮霉素磷酸转移酶基因hpt),发现216个转基因株系的T-DNA呈现1∶1分离。接着利用测交方法检测T-DNA的遗传规律,初步确定其中57个候选株系为雄配子不育候选突变体。随后对候选突变株进行多代遗传分析及花粉细胞学观察,结果表明其中的38个突变体花粉黑染率约为50%,自交后代T-DNA的异常分离是由于转基因植株的花粉半不育所致,T-DNA的传递只能通过雌配子体。另外,利用ELISA定量测定突变体中cry1Ac(Bt)基因编码蛋白的表达量,发现花粉的这种不育性与外源基因的表达量之间没有直接关系,推测这38个雄配子突变体败育的原因主要是T-DNA插入引起内源基因变异。TAIL-PCR获得了22个水稻雄配子不育T-DNA插入突变体的侧翼序列,通过BLAST检索,定位了15个不同的插入位点,其中12个插入位点位于基因区或基因调控区。
- 陈睿于法科刘华清杨绍华王锋
- 关键词：水稻突变体
- 水稻OsBI-1L-8基因启动子功能分析
- 2020年
- 【目的】分析水稻OsBI-1L-8基因启动子的结构与功能,解析OsBI-1L-8基因的表达特性及生物学功能,进一步了解OsBI-1L家族在水稻生命进程中的作用机理。【方法】利用BDGP、Softberry及Promoter 2.0预测分析水稻OsBI-1L-8启动子大小,以日本晴基因DNA为模板扩增pOsBI-1L-8,PlantCARE分析序列中顺序调控元件。构建pOsBI-1L-8::GUS载体,导入水稻,组织化学染色法检测pOsBI-1L-8在水稻中的时空表达特征。【结果】通过预测分析并克隆pOsBI-1L-8长度为1258 bp,该区域含有光信号、缺氧胁迫应答及激素调节等顺式作用元件。pOsBI-1L-8驱动的GUS报告基因仅表达于水稻抽穗期的茎结合部位、根茎过渡区和雄蕊。【结论】pOsBI-1L-8为组织特异型启动子,推测OsBI-1L-8可能在水稻生长及雄蕊发育中起重要作用。
- 陈睿于法科于法科单贞
- 关键词：水稻启动子GUS活性
