陈璐璐
- 作品数:6 被引量:13H指数:3
- 供职机构:东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>
- 内切葡聚糖酶基因在黑曲霉中的同源表达被引量:5
- 2014年
- 内切葡聚糖酶作用于纤维素的非结晶区,随机水解β-1,4-糖苷键,将长链的纤维素截断,对纤维素的整体降解起重要作用。研究从黑曲霉CICC2462中扩增得到内切葡聚糖酶基因Eng1,并针对黑曲霉中高表达的糖化酶基因glaA位点,构建Eng1基因表达载体pSZHG-Eng1,进一步通过农杆菌介导法转化黑曲霉CICC2462。经潮霉素筛选和PCR鉴定获得2株在glaA基因位点发生基因置换的同源重组转化子。在摇瓶发酵条件下,发酵液上清中的内切葡聚糖酶活力最高可达到272 U·mL-1,是出发菌株5.2倍。SDS-PAGE分析显示,两株重组菌株都有约36 ku目的蛋白条带,表达量为165~193μg·mL-1。结果表明,研究实现内切葡聚糖酶在黑曲霉中的同源表达,可为食品级内切葡聚糖酶的大规模工业化生产奠定基础。
- 李杰高博江连洲刘君邓晨旭陈璐璐张会
- 关键词:内切葡聚糖酶黑曲霉同源重组
- 黄瓜种子长度的遗传分析及分子标记
- 黄瓜(Cucumis sativus L.)是葫芦科(Cucurbitaceae)一年蔓生草本植物,染色体数为2n=2x=14,是中国主要的蔬菜作物之一。黄瓜果实成熟时,剖开,取种子洗净,干燥,即得干燥成熟种子。种子是植...
- 陈璐璐
- 关键词:黄瓜分子标记
- 植酸酶黑曲霉工程菌的构建
- 植酸的分子式为C6H6[OPO(OH)2]6,由于其自身的磷酸基团不稳定,易与植物中的二价离子及蛋白质相结合生成不溶性复合物,人类和动物在食用含有植酸的禾谷类食物时,由于植酸的抗营养作用,而使动物的肠胃减少对谷物营养的吸...
- 陈璐璐
- 关键词:植酸酶黑曲霉
- 文献传递
- 猪磷脂酶A2基因在黑曲霉中的表达被引量:1
- 2014年
- 目的:在黑曲霉中表达猪磷脂酶A2基因(PLA2、PLA2M)。方法:分别构建含有自身信号肽或糖化酶信号肽的猪磷脂酶A2基因PLA2重组表达载体pSZHG-PLA2、pSZHGS-PLA2M,并通过农杆菌介导法转化黑曲霉。结果:经筛选各得到1株同源重组转化子。对筛选出的同源重组菌株进行发酵培养,并进行胞内以及胞外酶活检测,结果显示由自身信号肽引导分泌的同源重组菌株的胞内和胞外酶活分别为21.68U/mL和2.12 U/mL,由糖化酶信号肽引导分泌的同源重组菌株的胞内以及胞外酶活分别为15.07U/mL和3.10U/mL。结论:表明在黑曲霉表达系统中自身信号肽和糖化酶信号肽都不能引导重组猪磷脂酶A2的有效分泌。
- 邓晨旭江连洲陈璐璐刘君高博李杰
- 关键词:黑曲霉同源重组酶活性
- 阿魏酸酯酶在黑曲霉中的同源表达被引量:3
- 2014年
- 利用食品级黑曲霉表达系统同源表达阿魏酸酯酶是提高阿魏酸酯酶产量、降低生产成本的有效途径。利用PCR技术扩增黑曲霉阿魏酸酯酶A基因(faeA)的编码区,构建黑曲霉表达载体pSZHG-faeA,并通过农杆菌介导法转化黑曲霉。经筛选获得将faeA基因整合到糖化酶基因位点的同源重组转化子4株。在酶摇瓶发酵条件下,重组菌株培养液上清中的阿魏酸酯酶活性最高达18.6mU/mL。SDS-PAGE分析显示,4株重组菌株都有约36ku目的蛋白条带,表达量为188-262μg/mL。结果表明,实现了阿魏酸酯酶在黑曲霉中的同源表达,为食品级阿魏酸酯酶的大规模工业化生产奠定了基础。
- 刘君江连洲高博邓晨旭陈璐璐张会王多佳李杰
- 关键词:阿魏酸酯酶黑曲霉同源重组