侯绍华
- 作品数:144 被引量:227H指数:8
- 供职机构:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株ICP4基因的鉴定及其在潜伏位点的表达
- 本文根据传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)SA-2株ICP4基因序列设计并合成3对引物,以ILTV中国王岗株(WG)株DNA为模板扩增ICP4基因,并对其...
- 木古丽王云峰侯绍华石星明王玫冉多良童光志
- 关键词:传染性喉气管炎病毒
- 文献传递
- 一种牛结核病检测用防断试剂卡
- 本实用新型公开了一种牛结核病检测用防断试剂卡,属于检测技术领域,包括外壳,外壳的右内壁固定连接有固定杆,固定杆的圆周表面滑动连接有一组滑筒,一组滑筒的圆周表面通过铰轴活动铰接有两组连杆,且两组连杆之间呈交错分布,两组连杆...
- 鑫婷贾红袁维峰朱鸿飞郭晓宇侯绍华姜一曈
- 文献传递
- 羊细粒棘球蚴病抗体间接ELISA检测方法的建立被引量:17
- 2011年
- 本研究旨在通过建立检测羊细粒棘球蚴病抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,为羊细粒棘球蚴病的检测提供快速、简便的手段。作者利用DNAStar软件对GenBank上发表的细粒棘球蚴EG95蛋白的氨基酸序列进行分析,筛选出高度亲水的优势表位区EG95s,对该区域编码基因进行克隆并表达。以纯化的重组融合蛋白为包被抗原,按常规方法建立检测羊细粒棘球蚴病抗体的间接ELISA,并对各种条件进行优化。SDS-PAGE结果表明成功获得了可溶性好、表达效率高、纯化简便的重组融合蛋白GST-1EG95s和HIS-1EG95s,Western blot检测结果表明表达产物具有较好的反应原性。间接ELISA方法优化结果显示:HIS-1EG95s作为包被抗原效果优于GST-1EG95s。经统计学分析,确定间接ELISA方法的判定标准:OD450nm值≥0.235时判定为阳性,OD450nm值≤0.191时判定为阴性,介于二者之间则为可疑。分别对采自新疆的70份羊包虫阳性血清和70份阴性血清进行检测,结果表明该方法与新西兰Wallaceville动物研究中心提供的间接ELISA方法符合率为100%,阻断试验结果显示与其他蛋白无交叉反应,批内变异系数介于3.8%~5.6%,批间变异系数介于5.7%~8.5%,结果表明该方法特异性强、敏感性高、重复性好。作者所建立的羊细粒棘球蚴病抗体的间接ELISA检测方法有望为羊细粒棘球蚴病的检测提供快速、简便的手段。
- 贾红刘丹侯绍华于琳琳柏丽华朱鸿飞
- 关键词:重组融合蛋白间接ELISA
- 新型鸭呼肠孤病毒TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用被引量:7
- 2020年
- 为了快速、准确检测新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV),本试验采用NDRVσB基因的序列保守区,设计特异性引物和TaqMan探针,经优化反应条件,建立了NDRV实时荧光定量RT-PCR检测方法标准曲线,并进行特异性试验、敏感性试验、重复性试验和临床样品检测试验。结果表明:所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法标准曲线方程为y=-3.354x+44.818,扩增效率为98.7%,标准曲线的相关系数为0.999;该方法可以特异性检测NDRV,但对MDRV、ARV、TMUV、DHAV均无反应信号;该方法检测质粒标准品最低检测浓度为10拷贝/μL,是普通PCR方法检测敏感性的1000倍;该方法的组内与组间变异系数均小于2%;用该方法检测临床样品,结果显示NDRV阳性率为45%,而常规RT-PCR阳性率为33%,比常规RT-PCR敏感。说明本研究建立的TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法可为NDRV的监测和早期诊断提供可靠的技术支撑。
- 张博陈立功武华阴雅洁孟利佳郭康康侯绍华侯绍华
- 关键词:新型鸭呼肠孤病毒荧光定量RT-PCRTAQMAN探针
- 2001年度石家庄地区猪附红体病的调查与诊治
- 2002年
- 侯艳红侯绍华沈海娥张磊
- 关键词:附红体病症状病理变化
- 表达山羊淋巴细胞活化分子的细胞系及其构建方法与应用
- 本发明提供一种能够稳定表达山羊淋巴细胞活化分子的细胞系,其为导入携带有山羊SLAM基因的真核表达载体的Vero‑E6细胞系。本发明成功构建了表达小反刍兽疫病毒的山羊SLAM受体的Vero‑E6细胞系,接种小反刍兽疫病料后...
- 侯绍华金红岩封家旺姜一曈贾红梁瑞英隋修锟
- 文献传递
- 基于重构NDRV σC 蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立
- 2022年
- 旨在建立灵敏快速诊断新型鸭呼肠孤病毒(novel duck reovirus,NDRV)抗体的间接ELISA(indirect ELISA,iELISA)方法,为水禽养殖业提供科学有效的检测手段。先前报道σC蛋白为沉淀表达,因此本研究利用大肠杆菌的密码子偏嗜性等规律优化其基因序列进行原核表达,纯化出高纯度的可溶性σC蛋白。采用方阵滴定法确定σC蛋白包被浓度和样品稀释度,初步建立NDRV的iELISA检测方法。分别对84份阳性和180份阴性质控血清进行分析,构建受试者工作特征曲线(ROC),通过Youden指数选择灵敏性和特异性最佳的P值作为阴阳临界值。使用质控阴、阳血清评价试剂盒的批内和批间重复性。用本研究的和实验室先前建立的全病毒包被的iELISA方法同时对质控血清进行检测,比较其符合率。通过方阵滴定法确定各组分条件为σC蛋白包被质量浓度0.5μg/孔、血清稀释度1∶320。构建的ROC曲线下面积为1.00,最佳阴阳临界值为0.076,在此临界值上的灵敏性和特异性均为100%。全病毒包被板和σC蛋白包被板符合率为100%,但前者检测样品的D_(450)值偏低,σC蛋白包被板则弥补了这一缺点。本研究为NDRV提供特异性和灵敏性良好的iELISA抗体检测方法。
- 武华林伟东孟利佳阴雅洁乔思娜倪维玲侯绍华徐倩倩董世山
- 关键词:新型鸭呼肠孤病毒原核表达间接ELISA方法
- 一种鸽Ⅰ型副黏病毒毒株及其攻毒动物模型的建立方法
- 本发明公开了一种鸽Ⅰ型副黏病毒毒株及其攻毒动物模型的建立方法,所述毒株于2023年11月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为:CGMCC NO.45761。本发明建立了接近真实的动物感染模型,...
- 侯绍华张姗丁家波梁瑞英梁琳汤新明
- 一种定量检测猪肺炎支原体的方法
- 本发明提供了用于检测猪肺炎支原体的实时荧光定量PCR引物以及使用其进行定量检测的方法。猪肺炎支原体是猪地方流行性肺炎的主要病原,其极难培养,形态太小不易借助显微镜定量检测,而传统的支原体CCU检测方法和CFU检测方法耗时...
- 侯绍华同弋
- 文献传递
- 一种用于快速检测弓形虫的实时重组酶介导等温扩增核酸试剂盒及应用
- 本发明公开了一种用于快速检测弓形虫的实时重组酶介导等温扩增核酸试剂盒及应用,包括标准品,所述标准品为含有529基因序列的阳性质粒以及针对弓形虫529基因设计的特异性引物和探针,根据弓形虫529基因的特异性保守靶序列设计用...
- 侯绍华王昭华林晓贾红姜一瞳鑫婷
- 文献传递