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余源: 作品数：23 被引量：93H指数：6; 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目国家杰出青年科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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Camptothecin(CPT)和Cytosine arabinoside(Ara-C)联合应用对MOLT-4细胞株周期特异性凋亡的影响被引量：3: 2004年; 目的　以急性T淋巴细胞白血病细胞株MOLT— 4为模型 ,探讨作用于同一细胞周期的化疗药物Camptothecin(CPT)和Cytosinearabinoside(Ara C)联合应用时是否具有抗癌增效作用、引起细胞凋亡的周期时相性是否发生改变及对细胞周期检测点 (ckeckpoint)的影响。方法　喜树碱 (CPT) ( 0 .2 5 μmol/L) ,阿糖胞苷 (Ara C) ( 1.0 0 μmol/L) ,及喜树碱 (CPT) ( 0 .2 5 μmol/L) +阿糖胞苷 (Ara C) ( 1.0 0 μmol/L)二药共同诱导急性早幼粒白血病细胞株MOLT 4细胞 4h ,分别采用激光共聚焦显微镜 (Confocal)观察其细胞的形态变化 ,采用Sub G1法 ,API法及cyclins/DNA双参数法 ,运用流式细胞术分析凋亡、凋亡细胞的周期时相性及CyclinE的表达规律。以Westernblot印迹法检测Bcl 2蛋白的表达。结果　喜树碱和阿糖胞苷联合应用时 ,凋亡细胞的数目明显增加 ,二者具有协同效应。发生凋亡的细胞大多数仍然是S期细胞。CyclinE的表达升高 ,bcl 2蛋白的表达降低。结论　作用于同一细胞周期的化疗药物CPT和Ara C联合应用时 ,具有协同效应但并不改变细胞周期的作用点(Checkpoint)。CyclinE和Bcl 2蛋白似乎在药物作用时起着关键性的调节作用 ,并对检测点的敏感性产生重要影响。; 喻春钊吴丰华余源肖薇李小兰陶德定吴剑宏龚建平; 关键词：化学疗法

热休克蛋白90抑制剂17-AAG对乙型肝炎病毒复制的抑制作用被引量：1: 2012年; 目的探讨热休克蛋白90(HSP90)是否参与肝细胞转化生长因子(TGF)β信号通路的活化,以及HSP90对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法 HSP90抑制剂17-AAG作用HepG2细胞,提取细胞总RNA,实时定量RT-PCR检测TGFβ下游信号分子PAI-1的表达。HepG2细胞用17-AAG预处理2 h,同时用TGFβ或TβR抑制剂SB431542作用后,将HBV复制型质粒HBV1.3转染细胞,第4 d提取HBV核心颗粒,Southern Blot检测HBV复制中间体,ELISA检测上清HBsAg的表达。结果 17-AAG能够下调HepG2细胞PAI-1的表达,HepG2细胞内HBV复制中间体表达水平明显降低,HBsAg的表达亦受到抑制,但上调或阻断TGFβ信号通路对HBV复制影响不明显。结论 HSP90参与肝细胞内TGFβ信号通路的活化,其抑制剂17-AAG能够抑制HBV的复制与蛋白表达,但该抑制作用与TGFβ信号通路活化无关。; 柯晓煜王秋景余源刘慎沛张春燕陈妍杨燕杨东亮; 关键词：转化生长因子Β

膜联蛋白V与碘化丙啶用于细胞周期特异性凋亡的检测被引量：15: 2002年; 目的　建立一种新的细胞周期特异性凋亡检测方法。方法　将急性早幼粒细胞白血病细胞株 (HL 60 )分别经喜树碱 (CAM)、紫外线诱导 ,及喜树碱和N 甲苯磺酰基 L 苯基丙氨酸氯甲基酮(TPCK)共同诱导后 ,用异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V(AnnexinV)进行标记 ,经 1 %不含甲醇的甲醛溶液冰浴固定 ,再用含洋地黄皂苷的碘化丙啶染色液染色后 ,流式细胞术分析凋亡细胞的周期特异性和细胞凋亡率 ,并与DNA链缺口标记法 (TdT)和常规AnnexinV法检测结果进行比较。结果　细胞凋亡的周期特异性分析 :膜联蛋白V/碘化丙啶法 (PA法 )和TdT法结果一致 ,CAM和紫外线诱导的细胞凋亡分别发生在S期和G1期 ;CAM和TPCK共同诱导试验显示 ,PA法对早期凋亡具有较高的检测灵敏度 ,TdT法则不能有效检测 ;而常规AnnexinV法无法进行凋亡细胞的周期特异性分析。细胞凋亡率的检测 :HL 60经CAM、紫外线、CAM与TPCK三种方法诱导后 ,PA法检测凋亡率的结果 (1 7 3 %、34 .7%、35 .9% )与常规AnnexinV法的检测结果 (1 8.1 %、35 .6 %、37.0 % )一致 (P >0 .0 5) ,而TdT法(1 0 .7%、1 9.5 %、- )则明显偏低 (P <0 .0 1 )。结论　PA法可以用于凋亡细胞周期特异性检测 ,其稳定、可靠。; 陶德定冷彦覃吉超周晖申漫里余源龚建平; 关键词：流式细胞术细胞周期膜联蛋白V 碘化丙啶细胞凋亡

抗肿瘤药敏实验中组织标本延时保存的研究被引量：2: 2005年; 余源冯永东刘慎沛龚建平

联合放/化疗对细胞周期特异性凋亡的影响被引量：6: 2005年; 目的　以急性T淋巴细胞白血病细胞株MOLT 4为模型,探讨作用于细胞周期相同或不同时相的放疗/化疗药物联合应用时是否具有抗癌增效作用、引起细胞凋亡的周期时相性是否发生改变及对细胞周期检测点(ckeckpoint)的影响。方法　分别将作用于G1 期的X ray(10Gy)及药物金克(JinKe) (2.0g/L);S期的喜树碱(CPT) (0.25μmol/L)及阿糖胞苷(Ara C) (1.00μmol/L);G2 /M期的药物威猛(Vm 26) (0.5μg/mL)及长春花碱(Vinblastine, Vin) (0.05μg/mL)分别联合分组应用对其进行不同时间段的培养,采用流式细胞术中的API法对凋亡细胞进行定量并对凋亡细胞的周期时相性进行定位检测。结果　G1 期的药物JinKe和X ray(10Gy)联合应用时,具有协同作用,其作用点仍以G1 期细胞为主。S期的两种药物CPT和Ara C联合应用时,两者也具有协同作用,其细胞周期作用点仍以S期为主。作用于G2 /M期的两种药物VM 26和Vin联合应用时,两者还是具有协同作用,但其细胞周期作用点几乎发生在细胞周期的所有时相。作用于G1 期的药物JinKe和作用于S期的药物CPT联合应用, 具有增强效应, 联合应用时其细胞周期作用点以G1 期和S期细胞为主。作用于G1 期的药物金克和作用于G2 /M期的药物VM 26联合应用,两者具有增强效应。作用于G2; 喻春钊陶德定冯永东余源吴剑宏龚建平; 关键词：MOLT-4细胞放射疗法细胞周期细胞凋亡

双参数细胞周期分析方法: 本发明公开了一种双参数细胞周期分析方法，主要解决现有分析方法中不能将细胞周期区分得更为详细的不足。该方法将鼠抗人细胞周期蛋白E单克隆抗体、鼠抗人细胞周期蛋白A单克隆抗体和小牛血清白蛋白液按1～16∶1～16∶800的体积...; 龚建平覃吉超陶德定冷彦申漫里冯永东高纯余源; 文献传递

乙型肝炎表面抗原主要亲水区Ⅱ的抗原性被引量：2: 2007年; 目的研究HBsAg主要亲水区Ⅱ的4个氨基酸变异对HBsAg抗原性的影响。方法定点突变HBsAg主要亲水区Ⅱ的4个氨基酸对应的s基因（P120T、C121S、K122I和T123N），构建4个真核表达重组质粒。用重组质粒和表达G145RHBsAg质粒体外瞬时转染HepG2细胞。4种抗体和7种国产HBsAgELISA诊断试剂盒检测转染细胞上清液和细胞裂解液中变异HBsAg的免疫反应性，免疫荧光检测单克隆抗体与转染细胞内变异HBsAg的免疫反应性。结果成功构建了表达HBsAg主要亲水区Ⅱ的4个氨基酸变异的重组质粒，P120T、C121S、K122I和T123N变异HBsAg的免疫反应性比野生HBsAg低，T123N变异导致HBsAg存在分泌障碍。结论HBsAg主要亲水区Ⅱ的4个氨基酸对维持HBsAg的空间构象和抗原性具有重要作用。; 田拥军张正茂夏昶刘慎沛余源黄红平杨燕陆蒙吉杨东亮; 关键词：乙型抗原性

双参数细胞周期分析方法: 本发明公开了一种双参数细胞周期分析方法，主要解决现有分析方法中不能将细胞周期区分得更为详细的不足。该方法将鼠抗人细胞周期蛋白E单克隆抗体、鼠抗人细胞周期蛋白A单克隆抗体和小牛血清白蛋白液按1～16∶1～16∶800的体积...; 龚建平覃吉超陶德定冷彦申漫里冯永东高纯余源; 文献传递

肝脏去唾液酸糖蛋白受体特异性RNA适配子的SELEX筛选与鉴定被引量：2: 2009年; 目的获得能够特异性高亲和力结合肝脏特异性去唾液酸糖蛋白受体（asialoglycoprotein receptor，ASGPR）的RNA适配子，为开发诊断和治疗肝脏疾病的靶向性试剂和药物奠定基础。方法合成一个长度为115nt含有25个随机序列的单链DNA随机文库，通过体外转录构建出单链RNA适配子随机文库，以肝脏ASGPR大亚基为靶蛋白，采用SELEX（systematic evolution of ligands by exponential enrichment）技术筛选具有高亲和力的AsGPR特异性RNA适配子；通过膜结合测定实验、凝胶阻滞实验鉴定筛选适配子对靶蛋白的特异性和亲和力。结果经过12轮筛选获得了具有高亲和力的肝脏ASGPR特异性RNA适配子。结论成功地筛选出了具有离亲和力的肝脏ASGPR特异性RNA适配子库。; 刘嘉杨燕胡斌马智勇余源黄红平陆蒙吉冯新华郭培宣杨东亮; 关键词：适配子 SELEX技术去唾液酸糖蛋白受体

表达HBsAg特异性siRNA的重组腺相关病毒载体的构建被引量：6: 2010年; 目的构建表达针对HBsAg小发卡RNA(shRNA)的重组腺相关病毒载体,以观察该病毒在体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用。方法将表达针对HBsAg的shRNA定向克隆到pAAV/U6-hrGFP质粒中,获得重组表达质粒(pAAV-shHBs-hrGFP);采用磷酸钙转染法将该质粒与包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共同转染AAV293细胞,进行rAAV-shHBs-hrGFP重组病毒包装。收获病毒感染HepG2.215细胞;采用ELISA法检测HBsAg和HBeAg水平。结果酶切鉴定、测序结果表明,pAAV-shHBs-hrGFP载体成功构建。包装收获的rAAV-shHBs-hrGFP病毒液可以感染HepG2.215细胞,并且可以抑制HBsAg和HBeAg的表达。结论制备的rAAV-shHBs-hrGFP病毒载体能够抑制HBV在体外的抗原表达。; 胡斌杨燕刘嘉马智勇黄红平余源刘慎沛杨东亮; 关键词：RNA干扰 HBSAG

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