郭敏亮
- 作品数：38 被引量：337H指数：9
- 供职机构：扬州大学生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金江苏省教委自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学理学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 根癌农杆菌趋化信号通路与致瘤信号通路交叉传导的研究
- 根癌农杆菌是一种广泛存在于土壤中的革兰氏阴性植物病原细菌,能够侵染受伤植物组织,使宿主致瘤.农杆菌致瘤的整个过程分为两部分.一部分是以CheA/CheY双组份系统信号传递为主导,组氨酸激酶CheA将磷酸基团传递给响应蛋白...
- 高大伟黄志伟郭敏亮
- 关键词：根癌农杆菌趋化
- 新型壳聚糖疏水色谱填料的制备及应用初步研究被引量：7
- 2000年
- 以壳聚糖为载体、以正戊基为配基建立新型疏水色谱填料的合成工艺 ,研究该色谱填料对牛血清白蛋白 ( BSA)和假单胞杆菌脂肪酶 ( PSL )的吸附容量 ,结果分别为 1 8.1和 2 .2 mg/ g干重疏水色谱填料。该色谱填料对 PSL有很好的分离提纯效果 ,纯度提高 3倍左右 ,收率达 55.
- 姜守磊郭敏亮姜涌明赵国骏王云
- 关键词：疏水色谱色谱填料壳聚糖合成工艺蛋白质分离
- 势障层析(PBC)——一种新的分离蛋白质的层析方法
- 1989年
- 目前应用较广且比较被人熟悉的层析方法有离子交换层析,凝胶层析,亲和层析和疏水层析,其中以离子交换层析使用得最广泛,而且历史也较长。各种层析方法都有其自身的特点,在此不必赘述。但当它们用于分离蛋白质时,其分离效果都是仅由蛋白质的某单一物理化学特性来决定的。近年来由纽约州立大学 Ruchenstein 等人建立了一种新的层析方法,称为势障层析(Potential Barrier Chromatography,简写为 PBC)。这种层析方法对蛋白质的分离效果是由蛋白质的多种理化性质(如蛋白质的带电量,分子形状、大小以及疏水性等)的综合效应来决定的,因此这种方法的建立大大地丰富了传统的层析方法。PBC 是依据胶体稳定性理论建立起来的。在溶液中,胶体颗粒之间的相互作用主要由两方面的作用力来决定,即范德华引力(Van der Waals attraction)和静电斥力(electrostatic repulsion)。由于胶体颗粒表面的水化膜及双电层受溶液的 pH,离子强度,疏水性影响比较大,因此也影响着胶粒之间的相互作用。
- 郭敏亮
- 关键词：蛋白
- 以壳聚糖为载体的新型疏水色谱填料的特性及其应用研究
- 成功地合成了以壳聚糖为载体，以苯甲基为配基的新型疏水色谱填料。该色谱填料对四种蛋白质有不同的吸附容量；它在有机溶剂中低温下放置有较好的稳定性；随着Na2SO4浓度的升高，它对BSA的吸附容量增加；1小时之内，随着吸附时间...
- 姜守磊姜涌明郭敏亮夏道年王云
- 关键词：疏水色谱色谱填料壳聚糖蛋白质
- 新型疏水色谱填料——丁基交联壳聚糖的合成研究
- 疏水作用色谱(hydrophobic interaction chromatography,HIC)是21世纪70年代发展起来的一种重要的生化分离技术,用以分离纯化酶、抗原、抗体等多种蛋白质,尤其适用于基因工程下游处理。...
- 王峥郭敏亮姜涌明王云姜守磊陈云
- 关键词：壳聚糖正丁醛交联剂
- 文献传递
- 根癌农杆菌甲氧基脱甲基酶Atu1420的酶学特性表征和定向进化
- 2025年
- 【目的】原儿茶酸是一种应用广泛的酚类化合物,生物合成法生产原儿茶酸是替代高污染的化学合成法的潜在方案,寻找和改良合成原儿茶酸的酶是生物合成法的关键。根癌农杆菌甲氧基脱甲基酶Atu1420是一种能够将香草酸转化为原儿茶酸的酶,本研究旨在表征Atu1420的酶学特性,并对其进行改良。【方法】通过大肠杆菌表达了Atu1420,并利用高效液相色谱等方法测定了Atu1420的酶学特性。基于Atu1420的预测结构和催化机制,选择了19个位点对Atu1420进行了定点突变,利用4-氨基安替比林开发了一种可视化检测Atu1420催化活性的方法,用于筛选Atu1420定点突变的变异体。利用alpha Fold对Atu1420变异体的结构进行预测,分析了变异体催化效率提升的潜在机制。【结果】确定了Atu1420的V_(max)为33.5±1.6 nmol/(L·s),米氏常数K_(m)为82.7±3.5μmol/L,转换数k_(cat)为(6.7±0.3)×10^(-1) s^(-1),k_(cat)/K_(m)为8.1×10^(-3) L/(μmol·s),最适p H在7-8之间,最适温度为30℃。本研究在定点突变的变异体中筛选出了5个酶活力增强的变异体,其中活力最强的变异体为G35S,其催化速度比野生型提高66.0%。对这5个位点进行组合突变,在酶活力方面并没有产生明显的叠加效应。结构的比对分析暗示121位精氨酸残基角度的偏转可能是造成变异体催化效率提升的原因。【结论】Atu1420的酶学特性得到了有效的表征,获得了5个催化效率提高的Atu1420变异体,变异体催化效率的提高可能是121位精氨酸残基角度的偏转造成的。
- 王浩曹安妮高欣怡郭敏亮
- 关键词：酶学特性原儿茶酸香草酸
- 农杆菌T4SS的结构及其底物转运机理的最新进展
- 2016年
- 细菌Ⅳ型分泌系统(type Ⅳ secretion system,T4SS)不仅是农杆菌转运T-DNA的通道,也是多种质粒接合的通道,还能转运多种底物分子到不同的靶细胞(包括细菌和真核细胞),因此,T4SS的结构及其底物转运机理的研究受到了人们的极大关注,近几年来,这方面的研究进展迅速。农杆菌转运T-DNA的T4SS又叫Vir B/Vir D4系统,是革兰氏阴性菌中最典型的T4SS之一,有关细菌Ⅳ型分泌系统的研究均以农杆菌的Vir B/Vir D4系统为参考模型。现将综述这几年来在农杆菌T4SS结构研究方面取得的最新进展,并介绍目前对T4SS底物转运机理的一些最新认识。
- 徐丽萍孙盼郭敏亮
- 关键词：根癌农杆菌
- 产单核细胞李斯特菌P60蛋白结构域的功能剖析
- 顾浩徐茜郭敏亮
- 农杆菌T-复合物的形成与转运研究进展被引量：9
- 2009年
- 在简要介绍农杆菌T-DNA转运全过程的基础上,结合作者近年的工作,重点对T-复合物的形成和T-复合物在农杆菌细胞内的转运机理的最新进展进行归纳和评述.农杆菌能够将其Ti质粒上的一段DNA以单链DNA-蛋白质复合物(简称T-复合物)的形式,通过其细胞两端的四型分泌系统(typeⅣ secretion system,T4SS)转运到宿主植物中,并使宿主发生遗传转化,因而农杆菌介导的T-DNA转运技术已成为应用最广泛的植物转基因技术,同时,由于转运T-复合物的T4SS也是某些质粒接合转移和许多病源微生物分泌致病效应蛋白的通道,因此,农杆菌T-DNA转运机理的研究受到了广泛的重视和关注,使得这方面的研究进展非常迅速.
- 郭敏亮高佃坤金英善
- 关键词：农杆菌
- 甲壳素深加工及应用研究进展
- 种不同来源壳聚糖作了性质比较；制备了不同分子量和脱乙酰度的壳聚糖系列制品；制备了壳聚糖微胶囊，并用该微囊包埋了含脂肪酶的丝孢酵母细胞，用于光学拆分布洛芬酯；合成了二种新型疏水色谱填料（苯甲基—壳聚糖和正戊烷基—壳聚糖），...
- 姜涌明赵国骏隋德新郭敏亮史永昶陈天陈云姜守磊胡健王云李艳利肖丽霞马中良
- 关键词：甲壳素壳聚糖
