曹丽萍
- 作品数：114 被引量：435H指数：13
- 供职机构：中国水产科学研究院淡水渔业研究中心更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理环境科学与工程更多>>
- 猪血多肽对建鲤抗氧化能力和免疫功能的影响被引量：4
- 2014年
- 本试验旨在从体外和体内水平评估猪血多肽(peptides from swine blood,PSB)对建鲤(Cyprinus carpio var.Jian)抗氧化能力和免疫功能的影响。在体外试验中,制备建鲤外周血白细胞和头肾巨噬细胞,然后暴露在含有不同浓度(0、10、20、40、80μg/m L)猪血多肽的培养基中作用24 h,采用WST-1法测定外周血白细胞的增殖能力,氯化硝基四氮唑蓝(NBT)还原法和格里斯(Griess)试剂显色法分别测定头肾巨噬细胞氮呼吸爆发和氧呼吸爆发活性;在体内试验中,分别将0、0.5、1.0、2.0和5.0 g/kg猪血多肽添加到基础饲料中饲喂建鲤,在恒温循环水系统中进行8周的饲养试验,分别在饲喂第1、2、4、8周采集血样,检测血清中生化指标、抗氧化指标及免疫指标的变化。结果表明:在体外试验中,猪血多肽浓度为20、40和80μg/m L时,可以显著或极显著提高建鲤外周血白细胞的增殖能力(P<0.05或P<0.01);猪血多肽浓度为40和80μg/m L时,可以显著或极显著增强建鲤头肾巨噬细胞氮呼吸爆发和氧呼吸爆发活性(P<0.05或P<0.01)。在体内试验中,用添加5.0 g/kg猪血多肽的饲料饲喂建鲤后,第4和8周血清中3种生化指标[白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、碱性磷酸酶(AKP)]含量/活性、3种抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]活性和3种免疫因子[白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、补体4(C4)]含量均显著升高(P<0.05);此外,第8周血清中补体3(C3)含量亦显著升高(P<0.05)。由此得出,猪血多肽能够增强建鲤的抗氧化能力和免疫功能。
- 王加豪贾睿刘英娟杜金梁曹丽萍殷国俊
- 关键词：抗氧化能力免疫功能建鲤
- 黄鳝芳香化酶保守区的原核表达载体pMAL-Arom19及其构建方法和应用方法
- 本发明提供一种Arom19的原核表达载体pMAL-Arom19，该载体含有T7启动子和终止子、细菌核糖体结合位点RBS和Arom19基因保守区片段及一个麦芽糖结合蛋白标签。构建此载体的方法为采用RT-PCR方法从黄鳝脑中...
- 丁炜东曹丽萍曹哲明邴旭文
- 文献传递
- 鱼类肝损伤模型的建立及保肝药物筛选的技术研究与应用
- 殷国俊徐跑曹丽萍杜金梁贾睿丁炜东等
- 该项目与匈牙利渔业、水产养殖和灌溉研究所合作,以鲤鱼为对象,构建鱼类体外肝细胞损伤模型和在体肝损伤模型,并通过肝细胞损伤模型研究20～30种中草药对鱼类肝细胞的保护作用,初步筛选出对鱼类肝细胞损伤有保护作用的中草药数种,...
- 关键词：
- 关键词：肝胆综合症保肝药物水产养殖
- 奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素前体蛋白的克隆与表达被引量：6
- 2005年
- 促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)是下丘脑分泌产生的神经激素,对脊椎动物生殖的调控起重要作用。为研究GnRH对性腺发育的作用,构建了GnRH cDNA的原核表达载体并进行融合表达。利用RT-PCR方法从奥利亚罗非鱼丘脑中扩增出长约400bp的目的序列GnRH基因,克隆至T载体中,经酶切鉴定和序列测定分析确认序列的正确性后将此片段克隆到表达载体pMAL-c2x中构建重组表达质粒pMAL-GnRH,并在大肠杆菌TB1中获得了高表达,目的蛋白约占菌体总蛋白的41.6%。菌体经溶菌酶裂解,制备无细胞抽提液,Amylose-sepharose柱层析后得到分子量为56kD单一条带的目的蛋白。目的蛋白经Factor Xa酶切裂解,Amylose-sepharose过柱纯化后得到纯化的GnRH前体蛋白。该研究为鱼类GnRH蛋白的控制性腺成熟和抗体制备打下了基础,是国内鱼类GnRH前体蛋白在原核细胞中成功表达的首次报道。
- 丁炜东曹丽萍吴婷婷
- 关键词：奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素原核表达纯化
- 鲤鱼慢性氧化应激模型及其构建方法
- 本发明公开了鲤鱼慢性氧化应激模型及其构建方法，所述方法采用过氧化氢诱导饲养中的鲤鱼，过氧化氢的使用浓度为0.25‑1mM。与现有技术相比，本发明具有以下优点：(1)本发明所述方法首次在鱼类中构建了慢性氧化应激模型，此模型...
- 贾睿殷国俊曹丽萍杜金梁
- 文献传递
- 一种仿生蜕壳窝以及利用稻谷加工副产品辅助河蟹养殖的方法
- 本发明提供了一种仿生蜕壳窝以及利用稻谷加工副产品辅助河蟹生态养殖的方法，属于河蟹养殖技术领域，所述仿生蜕壳窝包括长方体框架和顶盖，所述长方体框架的四个侧面和底面包裹网片，所述长方体框架底面四个顶点处向下延伸脚条。所述方法...
- 邵乃麟聂志娟高建操徐钢春孙毅曹丽萍杜金梁李全杰朱昊俊高俊
- 奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素及相关肽基因的克隆与表达被引量：1
- 2006年
- 采用RT-PCR方法从奥利亚罗非鱼丘脑中扩增出长约386 bp的目的序列GnRH/GAP,先将其克隆到T载体上,通过酶切鉴定、序列测定分析,确认序列的正确性后,将此片段克隆到表达载体pMAL-c2x中构建重组表达质粒pMAL-GnRH/GAP,再转化到大肠杆菌TB1中,经IPTG诱导后成功表达出与预期大小相符的相对分子量约56 000的融合蛋白。
- 丁炜东曹丽萍李建林吴婷婷
- 关键词：奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素基因克隆原核表达
- 罗非鱼精密肝切片损伤模型及其构建方法
- 本发明公开了罗非鱼精密肝切片损伤模型及其构建方法，所述方法采用环磷酰胺诱导罗非鱼精密肝切片，环磷酰胺的浓度在25mM以内。与现有技术相比，本发明具有以下优点：(1)本发明首次采用环磷酰胺诱导罗非鱼精密肝切片构建损伤模型，...
- 曹丽萍贾睿杜金梁丁炜东
- 文献传递
- 黄鳝雌激素受体α基因的克隆、抗体制备及初步分析被引量：2
- 2014年
- 对雌激素受体α基因的氨基酸序列进行抗原性分析,筛选合适的基因片段进行克隆,经RT-PCR扩增得到大小为945bp的片段,经测序鉴定后,将该片段定向亚克隆于pMAL-c2x表达载体中,转化至TB1感受态细胞中进行诱导表达。经1mmol/L IPTG诱导4h观察到有新的重组蛋白获得了表达,采用SDS-PAGE和Western blot试验进行检测,结果表明表达的重组蛋白的分子质量约为78.1ku,表达产物占菌体总蛋白的42.3%,且具有免疫学活性。进一步纯化和蛋白酶切后,得到单一的雌激素受体α蛋白。以该蛋白免疫小鼠制备抗体,在免疫第7周时达到最大滴度1.158±0.232。将制备的多克隆抗体进行黄鳝性腺免疫组化分析,结果表明其能特异性地与卵巢中的激素受体α反应,在细胞膜上形成褐色沉淀。
- 丁炜东曹丽萍曹哲明邴旭文陈克春胡晋鸣
- 关键词：黄鳝雌激素受体抗血清免疫组化分析
- 基于精密肝切片技术的鱼类新鲜肝组织的固定方法
- 本发明公开了一种基于精密肝切片技术的鱼类新鲜肝组织的固定方法，其包括：配置浓度为10-50g/L的琼脂糖溶液；将所述琼脂糖溶液放置于容器中；待所述琼脂糖溶液的温度为降至10-60度时，将采集的鱼类新鲜肝组织放置于所述琼脂...
- 杜金梁殷国俊曹丽萍贾睿
- 文献传递
