丁炜东
- 作品数：90 被引量：372H指数：11
- 供职机构：中国水产科学研究院淡水渔业研究中心更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 提高黄鳝运输成活率的方法
- 本发明涉及一种提高黄鳝运输成活率的方法，属于鱼类养殖技术领域。方法包括以下步骤：1、黄鳝暂养：待运输的黄鳝转入到暂养网箱内暂养一天，并禁食，并在暂养网箱内放入少量泥鳅。2、运输用水的配制和装袋：按10g/m<Sup>3<...
- 邴旭文丁炜东胡海彦曹哲明狄瑜徐奕
- 文献传递
- 急性低氧胁迫对翘嘴鳜抗氧化酶、呼吸相关酶活性及相关基因表达的影响被引量：8
- 2020年
- 【目的】从酶活性和基因表达水平分析低氧胁迫对翘嘴鳜(Siniperca chuatsi)应激的生理响应过程,为其健康养殖及耐低氧品种选育提供科学依据。【方法】选取体表无损伤、体重450±20 g/尾、体长24.0±0.7 cm的健康翘嘴鳜进行低氧(溶解氧含量2.8±0.2 mg/L)胁迫,设常氧(溶解氧含量6.5±0.2 mg/L)为对照组,分别在低氧胁迫0、6、12、24、48和96 h时采集翘嘴鳜的肝脏和鳃组织样品,进行抗氧化酶、呼吸相关酶活性及低氧诱导反应相关基因表达测定。【结果】在整个急性低氧胁迫过程中,翘嘴鳜肝脏过氧化氢酶(CAT)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)含量及谷丙转氨酶(GPT)活性均呈先升高后降低的变化趋势,GSH含量从低氧胁迫6 h起显著高于对照组(P<0.05,下同),CAT和GPT活性从低氧胁迫12 h起显著高于对照组。鳃组织乳酸脱氢酶(LDH)活性先升高后降低再升高,在胁迫6 h时达最高值(849.67 U/mg),显著高于对照组;超微量总ATP酶(ATPase)活性呈降低—升高—降低的变化趋势,且显著低于对照组。低氧胁迫组翘嘴鳜肝脏HIF-1α基因的相对表达量在胁迫48 h后显著上调;EPO基因的相对表达量先升高后降低,在胁迫12 h时显著上调;HSP90α基因的相对表达量在胁迫6和48 h分别出现峰值,其他时间点与对照组持平。【结论】急性低氧胁迫对翘嘴鳜肝脏抗氧化酶、鳃组织呼吸相关酶及低氧诱导反应相关基因表达均产生显著影响。虽然翘嘴鳜能通过自我调节抗氧化酶和呼吸相关酶活性及上调低氧诱导反应相关基因表达,促使机体适应低氧环境,但溶解氧降至2.8 mg/L以下即对其产生不利影响,因此在实际养殖过程中须密切关注养殖水体溶解氧变化。
- 徐畅丁炜东曹哲明邴旭文张晨光谷心池刘雨
- 关键词：翘嘴鳜低氧胁迫抗氧化酶
- 一种检测鱼类不同组织中线粒体异质性的方法
- 本发明涉及分子生物学，具体公开了一种利用不对称扩增PCR技术和SSCP技术联合检测鱼类不同组织中线粒体异质性的方法，所述方法包括提取鱼类不同组织的线粒体基因组DNA；以不同组织提取的线粒体基因组DNA为模板，进行不对称P...
- 曹哲明丁炜东邴旭文
- 生长模型在增殖渔业统计中的应用
- 2019年
- 发展绿色渔业是践行绿色发展理念的重大举措。目前渔业统计只涉及传统的渔业生产方式,"增殖渔业"作为新兴的绿色渔业生产方法尚未纳入渔业统计数据中。本文主要研究将增殖渔业产量纳入渔业产量统计体系的途径,提出了"放苗量推算法"和"世代分析推算法"两种增殖渔业产量统计方法。
- 高宏泉胡红浪邴旭文丁炜东
- 关键词：增殖渔业
- 黄鳝芳香化酶保守区的原核表达载体pMAL-Arom19及其构建方法和应用方法
- 本发明提供一种Arom19的原核表达载体pMAL-Arom19，该载体含有T7启动子和终止子、细菌核糖体结合位点RBS和Arom19基因保守区片段及一个麦芽糖结合蛋白标签。构建此载体的方法为采用RT-PCR方法从黄鳝脑中...
- 丁炜东曹丽萍曹哲明邴旭文
- 文献传递
- 黄鳝Dmrt3基因在性腺中的甲基化差异被引量：3
- 2014年
- 黄鳝具有性逆转的特点,为了找到与黄鳝性别调控直接相关的序列位点,分析黄鳝性别相关基因在雌雄中的序列差异,本实验选择了性别相关基因Dmrt3作为研究对象,通过比较该基因在雌雄性腺中的甲基化状态就可以分析出参与性别控制的具体位点。实验通过甲基化敏感的限制性内切酶Hpa II酶切黄鳝的雌雄性腺,根据已知的m RNA序列设计相关引物扩增酶切产物,同时与未酶切的对照组进行比较,分析差异条带并对实验结果进行验证。研究结果发现,Dmrt3-FR2扩增序列中,精巢是去甲基化状态,而卵巢是甲基化状态,可以推测该位点很可能与性别调控相关。本实验补充了从分子学角度研究黄鳝性别调控的不足,同时也验证了用甲基化手段研究黄鳝性别调控的可行性,为其他研究提供了理论依据。
- 宋颖邴旭文曹哲明丁炜东
- 关键词：DNA甲基化黄鳝性别控制
- 奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素前体蛋白的克隆与表达被引量：6
- 2005年
- 促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)是下丘脑分泌产生的神经激素,对脊椎动物生殖的调控起重要作用。为研究GnRH对性腺发育的作用,构建了GnRH cDNA的原核表达载体并进行融合表达。利用RT-PCR方法从奥利亚罗非鱼丘脑中扩增出长约400bp的目的序列GnRH基因,克隆至T载体中,经酶切鉴定和序列测定分析确认序列的正确性后将此片段克隆到表达载体pMAL-c2x中构建重组表达质粒pMAL-GnRH,并在大肠杆菌TB1中获得了高表达,目的蛋白约占菌体总蛋白的41.6%。菌体经溶菌酶裂解,制备无细胞抽提液,Amylose-sepharose柱层析后得到分子量为56kD单一条带的目的蛋白。目的蛋白经Factor Xa酶切裂解,Amylose-sepharose过柱纯化后得到纯化的GnRH前体蛋白。该研究为鱼类GnRH蛋白的控制性腺成熟和抗体制备打下了基础,是国内鱼类GnRH前体蛋白在原核细胞中成功表达的首次报道。
- 丁炜东曹丽萍吴婷婷
- 关键词：奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素原核表达纯化
- 不同生态因子条件下黄鳝Dmrt3基因的甲基化差异分析
- 以黄鳝为对象,研究不同温度、p H和光照周期条件下其Dmrt3基因在各组织中的甲基化差异。用甲基化敏感的限制性内切酶Hpa Ⅱ酶切黄鳝的性腺、肾、脾、肌肉、肝、肠、脑七个组织,根据已知的m RNA序列设计特异的引物扩增酶...
- 吴秀林丁炜东曹哲明邴旭文
- 关键词：黄鳝PH光照甲基化
- 文献传递
- 奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素cDNA的原核表达及其免疫原性研究被引量：3
- 2006年
- 促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasinghormone,GnRH)是下丘脑分泌产生的神经激素,对脊椎动物生殖的调控起重要作用。为研究GnRH对奥利亚罗非鱼性腺发育的作用,构建了GnRHcDNA的原核表达载体并进行融合表达。利用RT-PCR方法从丘脑中扩增出长约400bp的目的序列GnRH基因,克隆至T载体中,经酶切鉴定和序列测定分析确认序列的正确性后将此片段克隆到表达载体pMAL-c2x中构建重组表达质粒pMAL-GnRH,并在大肠杆菌TB1中获得了高表达,目的蛋白约占菌体总蛋白的41.6%。菌体经溶菌酶裂解,制备无细胞抽提液,Amylose-sepharose柱层析后得到分子量为56kD单一条带的目的蛋白。目的蛋白经FactorXa酶切裂解,Amylose-sepharose过柱纯化后得到纯化的GnRH前体蛋白。以80μg/只的剂量4次免疫ICR小鼠,免疫小鼠可以检测到特异性针对GnRH前体蛋白的血清抗体应答,免疫组抗体水平显著高于空白组(P<0.05),且加强免疫第5周后抗体效价为0.707±0.320,达到高峰值,说明表达产物具有免疫原性,可以刺激机体产生免疫应答。
- 丁炜东曹丽萍吴婷婷
- 关键词：奥利亚罗非鱼促性腺激素释放激素原核表达免疫原性
- 奥利亚罗非鱼SOX9基因cDNA全长的克隆及分析被引量：7
- 2008年
- SOX9基因是重要的转录调控因子,与性别分化形成密切相关。以奥利亚罗非鱼(Oreochromis aurea)为研究材料,使用RT-PCR和RACE法分离和克隆了奥利亚罗非鱼卵巢中SOX9基因cDNA的全长序列。序列全长1 582 bp,其中5’端非翻译区长71 bp,3’端非翻译区长75 bp,开放性阅读框长1 437 bp,编码478个氨基酸。其中第98位开始共81个氨基酸为HMG保守盒。将奥利亚罗非鱼SOX9基因与虹鳟等八种动物的氨基酸序列相比较发现,它们同源性达75%左右,表明SOX9基因在进化中较保守。
- 曹丽萍俞菊华殷国俊李建林丁炜东
- 关键词：奥利亚罗非鱼SOX9RT-PCR
