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白血病抑制因子LIF第29位氨基酸突变导致其功能完全丧失(英文): 2005年; 白血病抑制因子(LIF)为一种多功能细胞因子,在生物发育及维持正常生理功能中发挥着重要的作用. LIF在所有的哺乳动物中都具有高度的保守性,某些氨基酸在不同物种中保持不变. LIF中29位氨基酸在所有的哺乳动物中都是Q. 为了研究Q对LIF功能的重要性,利用随机PCR的方法将29位氨基酸突变为R,并将突变后的LIF克隆到真核表达载体pcDNA6,在哺乳动物细胞中成功表达. 同时以克隆到的野生型LIF作为对照. 将分泌到细胞培养基中的野生型和突变LIF因子收集,通过EMSA实验以及荧光素酶报告系统检测,发现野生型LIF因子具有激活STAT3信号通路的生物学活性. 同时,3H-TdR掺入实验结果表明,野生型LIF因子能显著抑制鼠骨髓白血病细胞系M1的增殖。而29位氨基酸突变的LIF因子则完全丧失了以上功能,但所发现的突变没有显性负的作用. 结果充分说明,LIF中高度保守的29位氨基酸对LIF功能的维持具有重要的作用.; 宁红秀陈钺张原江戎煜吴晓君张秀芳常智杰; 关键词：突变细胞增殖

SIPAR和STAT3相互作用并对其信号通路进行负调控被引量：3: 2005年; STAT3对细胞的生长、存活、增殖以及机体的发育都具有重要的作用. STAT3基因的失活可以引起多种疾病,而STAT3基因的过度激活又可以引发很多癌症. 为了对STAT3信号通路的调控做进一步的研究,采用酵母双杂交的方法,以STAT3蛋白全长作为诱饵蛋白,筛选了小鼠7天的胚胎文库. 得到了与STAT3相互作用的一个功能未知的蛋白质,将其命名为SIPAR (Stat3 interacting protein as a repressor). 免疫染色的实验结果表明,SIPAR是一种在核内分布为主,细胞质中也有少许分布的蛋白质. 荧光酶活性测定结果表明SIPAR对STAT3的转录活性具有抑制作用. 斑马鱼注射实验说明SIPAR基因表达严重影响了斑马鱼的正常发育.; 宁红秀戎煜张原江任芳丽常智杰; 关键词：STAT3 蛋白质相互作用基因调控

猪繁殖与呼吸综合征病毒各结构蛋白的融合表达被引量：6: 2009年; 本研究以测序质粒为模板,扩增出结构蛋白基因ORF2a-ORF7,将此基因片段插入真核表达载体pEGFP-N3中构建重组质粒pEGFP-N3-(ORF2a～ORF7),然后将重组表达质粒转染293T细胞。通过荧光显微镜观察显示,重组质粒pEGFP-N3-(ORF2a～ORF7)和载体pEGFP-N3均有绿色荧光出现。SDS-PAGE电泳和western blot分析结果表明重组质粒pEGFP-N3-(ORF2a～ORF7)和载体pEGFP-N3均有EGFP表达;仅ORF7有43ku的融合蛋白EGFP出现,与预期大小相符;其他重组质粒pEGFP-N3-(ORF2a～ORF6)均没有融合蛋白出现。本实验为进一步研究这些蛋白的结构和生物学功能奠定了基础。; 曹宗喜潘全会张原江常智杰罗玉均何逸民孔留五秦宏阳张桂红; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒结构蛋白真核表达

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张原江