周虎
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 供职机构：徐州医学院基础学院生物化学与分子生物学研究中心更多>>
- 发文基金：江苏省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 小鼠白细胞介素-18cDNA的克隆及逆转录病毒载体的构建
- 2001年
- 目的 克隆小鼠白细胞介素 - 18cDNA(mIL - 18cDNA) ,构建mIL - 18cDNA逆转录病毒载体。方法 利用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)方法从昆明小鼠肝脏细胞中扩增出mIL - 18cDNA ,克隆到测序载体pBluscript中 ,测序后 ,再亚克隆到逆转录病毒载体pLNCX中。结果 RT -PCR扩增出约 840bp片段 ,经酶切鉴定显示mIL - 18cDNA逆转录病毒载体 (mIL - 18pLNCX)构建成功。结论 昆明小鼠mIL - 18cDNA与已发表的其他种小鼠的序列相同 ,mIL - 18cDNA可能无种间差异。我们已成功地把mIL -
- 周虎赵惠仁
- 关键词：小鼠白细胞介素-18逆转录病毒载体CDNA
- 小鼠IL-18 cDNA克隆及在H_(22)肝癌细胞中的初步表达
- 2002年
- 目的 构建小鼠白细胞介素-18（mIL-18）逆转录病毒载体,实现mIL-18在小鼠H22肝癌细胞中表达。方法 用RT-PCR方法从小鼠肝脏细胞中扩增出mIL-18 cDNA,克隆到载体pBluscript中,测序后亚克隆到逆转录病毒载体pLNCX中。pLNCX/mIL-18重组子用脂质体介导的方法转染PA317包装细胞,用400μmL G418进行筛选。挑取筛选得到的阳性克隆扩大培养,取上清感染NIH3T3细胞和H22肝癌细胞。用感染后的H22细胞上清诱导小鼠脾细胞IFN-r生成能力来检测H22细胞分泌mIL-18的情况。结果 用NH3T3细胞测得病毒滴度为1.5×105克隆形成单位CFU/mL,转染后的H22肝癌细胞上清对小鼠脾细胞具有显著的IFN-r诱生作用。结论 pLNCX/mIL-18重组子构建成功,初步证明转染后的H22肝癌细胞能够表达IL-18。
- 周虎陆梁裴冬生赵惠仁
- 关键词：白细胞介素-18逆转录病毒载体克隆CDNA肝癌癌细胞
- 小鼠白细胞介素18在大肠杆菌中的表达、纯化及抗肿瘤作用研究被引量：5
- 2001年
- 用RT PCR从小鼠肝脏细胞中扩增出小鼠白细胞介素 18(mIL 18)的cDNA ,克隆到表达载体pJW2中 ,经热诱导后在大肠杆菌JM10 9中表达。表达的重组mIL 18(rmIL 18)主要以包涵体形式存在 ,占菌体总蛋白质的 18%。包涵体用 5mol L尿素溶解后 ,经SephadexG 10 0柱纯化。纯化的蛋白质经透析复性 ,在 0 5mg LConA存在的条件下 ,能够对小鼠脾细胞具有剂量依赖的IFN γ诱生作用。以 1× 10 5 H2 2 肝癌细胞腹腔注射昆明小鼠 ,构建小鼠H2 2 肝癌腹水瘤模型。分别在肿瘤细胞接种后 1、4和 8d ,用 10 μg纯化产物对荷瘤小鼠进行腹腔注射。结果显示rmIL 18注射组小鼠死亡速率延缓 ,生存率显著提高 (P <0 .0 1) ,达到 6 2 5 %。首次证明mIL 18对小鼠H2 2 肝癌具有显著的抑制作用 ,经rmIL 18作用后存活小鼠具有对H2 2
- 周虎赵惠仁裴冬生陆梁胡书群
- 关键词：白细胞介素18纯化复性H22肝癌抗肿瘤作用
- 小鼠白细胞介素-18抗肝癌作用的初步研究被引量：1
- 2005年
- 目的研究小鼠白细胞介素-18(mIL-18)对H22肝癌的作用。方法以1×105和1×106H22肝癌细胞腹腔注射昆明小鼠构建小鼠H22肝癌腹水瘤模型。在接种H22细胞后的1、48、天,每天用10μg mIL-18腹腔注射荷瘤小鼠,连续注射5天;或者在接种后1天,分别用5μg、10μg和20μg不同剂量的mIL-18腹腔注射小鼠。mIL-18作用后存活的小鼠,再次腹腔注射1×105H22肝癌细胞。结果构建得到小鼠H22肝癌腹水瘤模型,在接种1×105H22肝癌细胞后1、4天注射mIL-18的小鼠比对照组小鼠的存活率显著升高(P<0.05),存活小鼠能抵抗再次接种的H22肝癌细胞的攻击。结论mIL-18对小鼠H22肝癌具有显著抑制作用,mIL-18作用后存活的小鼠具有对H22肝癌细胞的免疫记忆性。
- 胡书群周虎裴冬生陆梁张光毅
- 关键词：H22肝癌免疫记忆
