江南大学生物工程学院生物催化研究室
- 作品数：21 被引量：141H指数：8
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- 相关领域：化学工程轻工技术与工程生物学理学更多>>
- 手性化合物的生物催化技术进展及工业化应用被引量：1
- 2007年
- 手性（chirality）是三维物体的基本特性。手性又称不对称性（asymmetry）。术语”手性”，是参照人的左右手不能相互重叠而来。正如我们的左手右手一样。”cheir”是古希腊语中手的意思。如果一个物体不能与其镜像重合，该物体就称为手性物体，这两种互成镜像的形态被称为对映体。手性分子（chiral molecules）的立体构型即为对映体结构。
- 孙志浩
- 关键词：手性化合物生物催化手性分子立体构型
- 4-氯乙酰乙酸乙酯羰基还原酶产生菌的筛选及产酶条件研究被引量：6
- 2005年
- 从实验室保藏的菌株中,筛选到一株立体选择性较高的产4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)羰基还原酶的菌株———出芽短梗霉(Aureobasidiumpullulans)SW0202,菌体产酶条件研究表明,最佳的发酵培养基配方为:麦芽糖30.0g/L,酵母膏20.0g/L,蛋白胨3.0g/L,(NH4)2SO45.0g/L,KH2PO42.0g/L,MgSO4.7H2O0.7g/L,最适发酵温度及初始pH分别为:28°C和pH6.0。该菌在此条件下发酵培养24h,产菌丝体生物量16.78g干菌体/L,COBE羰基还原酶酶活力达到1007U/L。在COBE的转化反应中,产物S-CHBE的浓度达到10.12g/L,光学纯度>97%e.e.。
- 钟萍衡湘斐孙志浩
- 关键词：产酶条件发酵手性醇出芽短梗霉
- 甾体微生物羟化的耐温菌选育及转化条件研究被引量：3
- 2006年
- 采用60Co射线对黑根霉SW3.41孢子进行诱变,筛选得到能在34℃生长并转化生产11α-羟基-16α,17α-环氧孕酮的菌株SW3.41-11-51。同时研究其转化工艺。结果表明,在加入终浓度12g/L的底物和3%的吐温-80条件下,以耐温黑根霉SW3.41-11-51转化43h的转化率达到43%,得到4.5g/L产物。
- 周英俊郑璞孙志浩郭一平
- 关键词：甾体孕酮诱变黑根霉
- 反相高效液相色谱法同时测定发酵液中的阿魏酸、香草酸和香草醛被引量：10
- 2004年
- 李永红郑志强孙志浩
- 关键词：发酵液阿魏酸香草酸香草醛反相高效液相色谱法生物转化法
- 戊二醛交联细胞拆分DL-泛解酸内酯
- D-泛解酸内酯是生产D-泛酸钙、D-泛醇以及D-泛酰巯基乙胺的重要中间体。泛酸系列产品是一种重要的食品添加剂和饲料添加剂,也是维生素药物,D-泛醇还是重要的化妆品用原料。传统的化学方法制备的泛酸是外消旋体,必须拆分才能得...
- 华蕾孙志浩过鑫富汪军
- 文献传递
- 酶水解菊芋糖浆发酵生产琥珀酸的初步研究被引量：12
- 2008年
- 用产菊粉酶的一株黑曲霉菌株进行产酶发酵条件和水解条件研究,在30℃,pH 6.0,摇床转速200 r/min,发酵时间为3 d的最适产酶条件下,酶活可以达到45.9 U/mL。以总糖含量为85.2 g/L的菊芋粉为初始底物,最适酶水解条件为温度50℃,加黑曲霉培养液的量为10%(v/v),水解12 h后,水解率达到99.6%。用此酶解液在5 L搅拌发酵罐中进行琥珀酸发酵,初始还原糖浓度53.5 g/L,36 h发酵产琥珀酸43.8 g/L,琥珀酸产率0.83 g/g,糖利用率99.0%,琥珀酸生产强度1.22 g/(L.h)。
- 任玮董晋军郑璞倪晔孙志浩
- 关键词：菊芋菊粉酶黑曲霉发酵琥珀酸
- 串珠镰孢霉D-泛解酸内酯水解酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2005年
- 利用D_泛解酸内酯水解酶N末端序列,并根据NCBI中公布的D_泛解酸内酯水解酶cDNA序列设计了一个特异引物,该引物结合Oligo(dT) 1 5,以串珠镰孢霉(Fusariummoniliforme)CGMCC 0 5 36mRNA反转录得到的总cDNA为模板进行扩增,获得约1 5kb左右的片段,将其克隆到T载体上进行测序,对测得的序列进行分析,重新设计了一对引物,并在引物两端分别加上限制酶EcoRⅠ和SalⅠ的识别位点序列,利用热启动PCR成功地扩增出了D_泛解酸内酯水解酶基因,基因片段长度为114 6bp ,该序列同来源于尖镰孢霉菌(F .oxysporum)AKU 370 2菌株的编码D_泛解酸内酯水解酶cDNA结构基因的同源性为90 0 6 %。将所得片段定向克隆到pTrc99a载体中,转化至JM10 9感受态细胞,筛选出了阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌,进行SDS_PAGE电泳,检测出在约4 0kD处有一蛋白表达带。对两株重组基因工程菌的比活力进行测定,结果分别为37U和4 1U。
- 柳志强孙志浩
- 微生物转化香草酸生产香草醛被引量：24
- 2004年
- 筛选到 1株可以转化香草酸生成香草醛的朱红密孔菌 (Pycnoporuscinnabarinus)SW 0 2 0 3 ,通过培养基和转化条件的优化后 ,可以将 1 682g/L的香草酸转化生成 0 875 g/L香草醛 ,摩尔转化率为 5 7 5 %。在 2 5L罐上进行放大试验 ,香草醛产量为 0 81 8g/L ,摩尔转化率为 5 3 7%。对转化液中的产物进行提取 ,得到纯度为 95 %的香草醛结晶 ,提取收率为63 9%。
- 王明君郑璞孙志浩孙志浩
- 关键词：香草酸香草醛微生物转化
- D-泛解酸内酯水解酶的定向进化被引量：10
- 2005年
- 易错PCR结合DNA改组方法向D泛解酸内酯水解酶基因中引入突变,并构建突变体库。利用酶的催化特点和产物特性建立了基于平板初筛和高效液相复筛的两步法D泛解酸内酯水解酶活性筛选系统。用该筛选系统以酶活力和pH稳定性为指标对突变体库进行筛选,最终获得一株酶活力高且在低pH条件下稳定性好的突变体MutE861。该突变体的酶活力是野生型酶的5.5倍。对突变体和野生型酶在pH6.0和pH5.0条件下的残余酶活进行对比,在这两种pH条件下,突变体酶的酶活残留分别为75%和50%,而野生型酶只能保持原来的40%和20%。通过软件对突变体MutE861酶基因和野生型酶基因进行分析对比,发现突变体MutE861酶基因发生了三处点突变,其中突变使两处氨基酸取代,另一处为沉默突变,未引起氨基酸的变化。
- 柳志强孙志浩郑璞冷泳钱嘉南
- 关键词：易错PCRDNA改组定向进化
- 琥珀酸发酵高产菌株的选育被引量：19
- 2007年
- 以富马酸钠为唯一碳源的选择性平板，从牛的瘤胃中筛选出一株产琥珀酸的菌株Actinobacillus succinogenes CGMCC1593。以该菌株为出发菌株进行NTG诱变，挑选在含有50-100mmol／L氟乙酸平板生长较快的菌落，经过初筛和复筛，发现SF-9菌株产琥珀酸能力强且积累的乙酸较少。以502／L的葡萄糖为碳源，在培养瓶厌氧发酵条件下其琥珀酸产量（35．09g／L）比出发菌株（28．91g／L）提高了21．4％，琥珀酸／L酸比率（w/w）从3．3：1提高到7．5：1。用SF-9菌株在5L发酵罐上进行分批发酵，发酵36h时琥珀酸积累量达到40．51g／L，对葡萄糖的转化率为0．81（w/w），琥珀酸／乙酸比率为9：1，副产物乙酸量比出发菌株降低了约50％。
- 刘宇鹏朱蕾蕾郑璞倪晔孙志浩
- 关键词：琥珀酸育种NTG
