南阳师范学院农业工程学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
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- 家蚕常用内参蛋白多克隆抗体的制备及应用比较分析被引量：1
- 2018年
- 内参基因是一种在所有组织和细胞中都表达的管家基因,常被用作基因和蛋白质功能研究中的参照。目前市场上商品化的内参抗体在家蚕中检测不稳定,制备高效、特异的可用于家蚕研究的内参抗体显得十分必要。对家蚕中常用的内参基因actin和tubulin进行克隆,构建其原核表达载体;通过原核表达和纯化,获得了纯度较高的融合蛋白;免疫新西兰大白兔后,成功制备了二者的多克隆抗体;酶联免疫吸附检测Actin抗体和Tubulin抗体的效价分别为1∶1000和1∶16000。Western blot结果表明,制备的家蚕内参抗体不仅能特异结合家蚕蛋白,同时可有效检测其他昆虫及哺乳动物中的相应蛋白,且抗体制备简单,成本较低,从而增加了内参抗体的多样性和选择性,为后续家蚕蛋白的功能研究奠定了基础。
- 王远卓魏博帆陈莹杨娟娟乔惠丽
- 关键词：家蚕肌动蛋白微管蛋白甘油醛-3-磷酸脱氢酶抗体
- 家蚕GAPDH内参蛋白多克隆抗体的制备及其检测被引量：3
- 2017年
- 制备家蚕GAPDH内参蛋白多克隆抗体,并对该抗体进行检测。利用PCR技术从家蚕中克隆GAPDH基因,构建其原核表达载体,转化大肠杆菌,诱导表达重组蛋白并纯化。纯化后的蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔制备GAPDH多克隆抗体。用酶联免疫吸附法和Western blot检测抗体的效价和特异性。结果显示,成功构建GAPDH/p ET-28a原核表达载体,获得高纯度的GAPDH重组融合蛋白;经SDS-PAGE和抗His单抗检测,纯化后蛋白的分子量大小与预测的一致;以该蛋白为免疫抗原,采用4次免疫方式对新西兰大白兔进行免疫,获得GAPDH多克隆抗体血清。酶联免疫吸附检测结果表明,GAPDH抗体的效价为1:8000,并能与天然家蚕蛋白特异性结合。成功制备了家蚕内参蛋白GAPDH多克隆抗体,为深入研究家蚕中不同蛋白的生理功能和作用奠定了坚实的基础。
- 陈莹王远卓杨娟娟郭兴国乔惠丽
- 关键词：家蚕甘油醛-3-磷酸脱氢酶多克隆抗体
- 家蚕化学感受蛋白CSP9的抗体制备及表达分析
- 2019年
- 为了制备家蚕CSP9的多克隆抗体,研究该蛋白在家蚕中的表达特征和功能。利用PCR扩增家蚕csp9基因,构建其原核表达载体,诱导CSP9蛋白表达并纯化。纯化后的CSP9蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,Western杂交检测CSP9在家蚕中的表达特征。最终成功构建csp9/pET-28a原核表达载体,并纯化获得与预测分子量一致的CSP9蛋白;成功制备了CSP9多克隆抗体。Western杂交结果表明,CSP9在家蚕不同时期和不同组织中都有特异表达。本研究成功表达纯化并制备了家蚕CSP9多克隆抗体,分析了CSP9在家蚕中的表达特征,为后续该蛋白在家蚕中的功能和调控研究奠定了基础。
- 魏博帆王景娅孙妍妍王露李晓哲邱礽乔惠丽
- 关键词：家蚕化学感受蛋白蛋白表达多克隆抗体
- Fusarium prolieratum胞外分泌物及其致病性研究
- 玉米(Zea mays L.)是世界重要的粮食与饲料作物,在我国属第一大粮食作物.河南是我国主要粮食产区之一,玉米在河南省是最主要的秋季粮食作物.根据笔者前期调查结果,层出镰刀菌F.prolieratum(Matsush...
- 焦铸锦黄思良
- 关键词：FUSARIUM玉米穗腐病胞外酶
- 不同肠道微生物对果蝇交配行为的影响被引量：1
- 2021年
- 通过构建黑腹果蝇的无菌和悉生体系,比较研究不同肠道微生物对无菌果蝇和正常果蝇交配行为的影响。对黑腹果蝇受精卵进行体外消毒处理并在无菌条件下培养获得无菌果蝇。在果蝇培养基中分别接种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、醋酸杆菌(Acetobacterium malorum)和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),然后对无菌果蝇或正常果蝇分别培养一定时间,获得不同微生物的悉生果蝇。解剖并提取果蝇肠道总RNA,反转录后利用实时荧光定量PCR检测不同微生物在接种前后无菌果蝇和正常果蝇肠道中的丰度,同时对不同处理的果蝇进行单对交配实验,比较不同处理果蝇的交配成功率和交配时间。结果表明:成功构建了无菌果蝇体系,通过与单一微生物共培养,使特定微生物在无菌果蝇和正常果蝇肠道中成功富集,而且植物乳杆菌L.plantarum可通过延长交配潜伏期影响果蝇的交配行为。
- 魏博帆王露李晓哲李小辉李苗苗乔惠丽
- 关键词：黑腹果蝇肠道微生物交配QRT-PCR
- Fusarium proliferatum胞外分泌物及其致病性研究
- 玉米（Zea mays L.）是世界重要的粮食与饲料作物,在我国属第一大粮食作物。河南是我国主要粮食产区之一,玉米在河南省是最主要的秋季粮食作物。根据笔者前期调查结果,层出镰刀菌F.Proliferatum（Matsus...
- 焦铸锦黄思良
- 关键词：玉米穗腐病胞外酶
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