首都医科大学中心实验室
- 作品数：147 被引量：261H指数：6
- 相关作者：单若明单玉明田密更多>>
- 相关机构：北京中医药大学中医学院北京中医药大学生命科学学院首都医科大学三博脑科医院脑研所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金首都医科大学校长研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学理学更多>>
- 一种适用于蚊类扫描电镜样品简便快速的制备方法被引量：3
- 2017年
- 本文介绍一种适合蚊类研究的扫描电镜样品制备方法。以库蚊为样品,用四氧化锇直接单固定处理,适当缩短脱水时间,改进临界点干燥前的制样程序。此方法观察效果良好,提高了样品制备质量,为蚊类扫描电镜样品制备提供了一种简易而快速的方法。
- 姬曼赵君朋
- 关键词：库蚊扫描电镜
- 透射电镜生物样品冷冻保存方法的探讨被引量：2
- 2019年
- 利用透射电镜观察组织细胞的超微结构已成为生物医学领域重要的研究手段,并为临床诊断提供可靠的依据。固定良好、妥当保存的组织样品是电镜样品制备、电镜观察以及获得高质量图像的基础。目前,电镜技术工作者和研究者一般认为戊二醛固定的样品进行清洗后可短期保存于磷酸盐或砷酸盐缓冲液中,要尽快对样品进行脱水和树脂包埋。树脂块固然可以做到长期保存,但该方法限制了组织样品的多元化应用。因此建立一种简单易行的电镜样品冻存方法具有重要的意义。本研究采用含有蔗糖和乙二醇的冷冻保护剂对多种组织器官电镜样品进行-20℃和液氮环境冷冻保存,解冻后对样品进行常规制样、超薄切片以及电镜观察,结果显示各种组织样品超微结构完好。由此可得出结论:本研究采用的电镜样品冻存方法不改变超微结构,同时又可以有效延长样品保存时间,该方法为电镜样品的低温保存提供了一个解决方案。
- 杨慧金良韵姬曼孙竹林陈大兴赵君朋
- 关键词：电镜样品玻璃化
- 图像流式检测细胞周期有丝分裂中期细胞比例的方法被引量：1
- 2017年
- 图像流式技术结合图像采集与处理技术和流式分析技术检测,使流式检测的指标更加丰富,分析方法更加复杂,分析的数据对应图像验证更为客观可靠,不仅可以应用其进行更为客观精确的流式检测,也可以利用图像所提供的形态和位置信息开展传统流式无法完成的检测。将其应用于经典的流式细胞周期检测可以对同样的标记样品进行更加深入的分析,介绍了如何使用图像流式分析技术对经典碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色样品进行图像细胞周期分析,检测样品各周期细胞比例及确定有丝分裂中期细胞比例的方法,解决了经典流式细胞周期分析中仅凭荧光强度参数无法识别有丝分裂中期细胞的难题。
- 徐晓雪邹林樾户乃丽田蜜
- 关键词：细胞周期有丝分裂
- 基于MR图像的大鼠脑自定义模板的构建被引量：2
- 2018年
- 目的基于大鼠头部高分辨磁共振图像,探讨建立大鼠自定义脑模板的可能性,旨在对图像的基于体素的形态学分析(voxel-based morphometry,VBM)提供研究基础。方法应用首都医科大学中心实验室Micro MR成像仪对18只12周龄正常成年雄性SD大鼠头部成T2像;将公开的大鼠脑模板RAT97 T2W设为初始模板,对图像进行线性配准,得到一个模板;之后将该模板作为非线性配准的初始参考模板图像,进行非线性配准;经过以上两步,得到该组数据的大鼠脑自定义模板;最后将自定义脑模板与RAT97 T2W进行定量比较。结果相比较RAT97 T2W,自定义模板与原始图像整体相似度更高,并且更好地继承了原始图像的信息量。结论与RAT97 T2W相比,应用本方法构建的大鼠脑自定义模板图像结构清晰,保留了原始图像的特殊性,更能代表该组样本大脑的形态结构,适用于该组样本的分析与研究。
- 赵媛媛雷建峰王战京
- 关键词：MR
- 雷公藤甲素对脑胶质瘤细胞凋亡的影响及机制探讨被引量：1
- 2018年
- 目的研究雷公藤甲素(TP)对脑胶质瘤细胞u87的细胞凋亡、线粒体膜电位和ROS生成的影响,探讨其诱导细胞凋亡的机制。方法体外培养U87细胞,用10,50,250,1 250 nmol/L四个浓度雷公藤甲素作用于细胞24小时后,流式细胞仪检测细胞凋亡,细胞线粒体膜电位,以及活性氧。结果随着药物浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加,线粒体膜电位检测到绿色荧光区域细胞比例逐渐增多,细胞活性氧生成水平逐渐升高,与对照组比差异有统计学意义,TP对细胞凋亡的诱导作用与药物浓度呈正相关。结论雷公藤甲素可体外诱导U87细胞凋亡,机制可能与线粒体信号通路参与了TP诱导的细胞凋亡,同时通过细胞氧化应激反应,升高ROS,诱导细胞凋亡有关。
- 邹林樾徐晓雪户乃丽
- 关键词：雷公藤甲素脑胶质瘤细胞细胞凋亡线粒体膜电位活性氧
- 细胞色素p450对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响被引量：28
- 1999年
- 目的：通过观察细胞色素ｐ４５０抑制剂对大鼠在体心肌缺血／再灌注损伤的影响，了解细胞色素ｐ４５０与心肌缺血／再灌注损伤的关系，并初步分析作用机制。方法：观察给予细胞色素ｐ４５０抑制剂或１１，１２－ＥＥＴ后，大鼠在体心肌缺血／再灌注室性心律失常、心肌梗塞范围及超微结构的变化，及ＴＥＡ与ｇｌｉｂｅｎｃｌａｍｉｄｅ对ＥＥＴｓ作用的影响。结果：细胞色素ｐ４５０抑制剂ｃｌｏｔｒｉｍａｚｏｌｅ（０．９ｍｍｏｌ／Ｌ）和ＳＫＦ５２５Ａ（０．５４ｍｍｏｌ／Ｌ）减轻、而外源性１１，１２－ＥＥＴ加重缺血／再灌注心律失常、心肌梗塞范围及心肌超微结构病变；ＴＥＡ与ｇｌｉｂｅｎｃｌａｍｉｄｅ可拮抗１１，１２－ＥＥＴ的作用。结论：细胞色素ｐ４５０参与了心肌缺血／再灌注损伤；其作用与ＥＥＴｓ释放并开通钙敏感性及ＡＴＰ敏感性钾通道有关。
- 张立克王雯陈瑞芬王民丁鼎武
- 关键词：细胞色素P450再灌注损伤心肌缺血
- 基于MS2和SPS-MS3的iTRAQ标记定量方法比较
- 引言：多重iTRAQ标记，是目前定量蛋白质研究中应用最广的一种同位素标记方法。该方法通过质谱谱图碎裂后产生的碎片峰中，报告离子强度来确定蛋白质的含量信息。通常使用的报告离子谱来自于二级谱图碎裂，但是二级碎裂定量存在许多不...
- 李蕾李静宜薛冰
- 关键词：ITRAQ
- 基于SPR技术高通量检测YEATS与组蛋白多肽相互作用的研究
- 2019年
- 目的采用Biacore T200分析系统建立高通量检测蛋白与组蛋白多肽相互作用的表面等离子共振(SPR)方法。方法将生物素标记的牛血清白蛋白BSA和YEATS2蛋白分别固定在SA芯片的参比和样品通道上,将不同修饰的组蛋白多肽H3K27cr(巴豆酰化)、H3K27ac(乙酰化)和H3K27(未修饰)稀释成3.9,7.8,15.6,31.2,62.4,125,250μmol/L,依次注入芯片表面,所得数据经Biacore T200分析软件处理,计算YEATS2蛋白与多肽相互作用的亲和力。结果参比通道固定BSA有效地降低了H3K27cr多肽与芯片基质的非特异性吸附。BSA与H3K27cr无特异性结合。YEATS2与组蛋白多肽的亲和力为H3K27cr>H3K27ac>H3K27,与等温滴定微量热(ITC)技术所得结果相吻合。结论优化的SPR方法适用于高通量筛选与特定蛋白相互作用的组蛋白多肽,并可进行亲和力的检测。
- 杨颖胡家李蕾殷爱红李慎涛
- 关键词：组蛋白翻译后修饰
- 基于SPR-MS联合法鉴定Mas的互作蛋白
- 2024年
- 目的基于表面等离子共振(SPR)和质谱(MS)的联用技术从细胞裂解液中鉴定Mas互作蛋白。方法将重组蛋白GST-Mas-CT和GST分别高水平固定在2张CM5芯片的4个通道上,将细胞裂解液(总蛋白质量浓度0.5 mg·mL-1)注入芯片表面,回收蛋白经超滤辅助样品制备(FASP)后,进行MS鉴定。使用韦恩图分析Mas-CT和GST的差异互作蛋白,利用DAVID数据库对Mas-CT的差异互作蛋白进行GO和KEGG分析。结果回收蛋白中共有785个Mas-CT的差异互作蛋白;生物信息学分析显示Mas互作蛋白主要富集在免疫反应、钙离子应答、感染、血小板激活等生物学过程或通路。结论SPR-MS联合法适用于从细胞裂解液等复杂体系中捕获和鉴定靶蛋白的互作蛋白。
- 胡家李蕾殷爱红杨颖
- 关键词：质谱技术MAS受体蛋白质相互作用
- 基于荧光定量PCR技术的ADH1B基因多态性分型教学实验设计
- 2024年
- 该实验设计旨在指导学生使用不同的PCR衍生技术进行基因分型检测。实验设计了高分辨率熔解曲线分析(PCR-HRM)、等位基因特异性PCR(AS-PCR)和TaqMan探针三种PCR方法,检测了ADH1B rs1229984位点的基因多态性。三种PCR检测结果与Sanger测序结果一致。通过该实验,学生能够学习基因多态性的分子机制和相关检测技术,提高动手实操能力,还能学习利用软件和算法设计复杂PCR引物和探针方法及其在临床诊断中的应用。
- 赵焕英张天乐张玉雪张赛董衡蓓马延敏
- 关键词：TAQMAN探针基因多态性
