新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室开放课题 作品数:38 被引量:131 H指数:7 相关作者: 薄新文 韩猛立 黄新 王正荣 钟发刚 更多>> 相关机构: 新疆农垦科学院 石河子大学 新疆生产建设兵团 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 新疆生产建设兵团科技攻关计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
绵羊颗粒细胞抑制素βA基因RNAi载体的构建 2014年 抑制素βA基因(Inhibin-βA,INHβA)的表达与绵羊(Ovisaries)的产羔数有一定关系。利用RNAi技术构建载体用来干扰INHβA的表达。根据GenBank上绵羊INHβA(GenBank:NW_004080167.1)mRNA的序列设计干扰片段4个PLLU2G-shINHβA-1(I-1)、PLLU2G--shINHβA-2(I-2)、PLLU2G-shINHβA-3(I-3)、PLLU2G-INHβA-4(I-4),其中I-2对INHβA表达的沉默效果最好。实验研究结果为绵羊繁殖性状和发情性状的研究奠定了良好的理论基础,构建的干扰载体有望进一步应用于提高绵羊繁殖性能的生产实践中。 林杉 田占伟 古丽汗.阿不都热木 陈宝麒 张文祥 赵宗胜关键词:绵羊 RNA干扰(RNAI) 卵巢颗粒细胞 羔羊口蹄疫母源抗体和免疫抗体消长情况的观察(初报) 被引量:1 2008年 李静 刘让 邢玫 张鲁安 周亚 陈少平 袁立刚 蒲敬伟 陆敬文 张怀生 李岩关键词:口蹄疫 抗体消长 母源抗体 羔羊 二价灭活疫苗 防制工作 扩展莫尼茨绦虫不同体节CREB和PICK基因mRNA转录水平研究 2013年 为研究CREB和PICK在扩展莫尼茨绦虫不同体节的mRNA转录水平,以beta-Tubulin基因作为内参基因,采用SYBR Green real-time RT-PCR方法检测该基因在扩展莫尼茨绦虫4个不同发育阶段即头节、幼节、成节、孕节中的表达差异。标准曲线分析显示,CREB、PICK基因和beta-Tubulin基因标准质粒实时定量扩增Ct值与标准质粒的质量浓度均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.99;熔解曲线分析表明,产物为特异的单峰,具有较高的特异性。同时结果还显示,CREB以及PICK基因在虫体各发育阶段中的表达丰度存在差异。CREB基因在扩展莫尼茨绦虫头颈节、幼节、成节和孕节的表达水平依次呈上升趋势,而PICK基因在扩展莫尼茨绦虫成节以及孕节的表达水平较高。 王正荣 薄新文 赵文娟 何延华 康立超 王新华关键词:CREB PICK 扩展莫尼茨绦虫 胚胎附植期GRB7基因在绵羊子宫内膜中的表达 引言/目的哺乳动物的胚胎附植是妊娠建立的标识,是胚胎与母体复杂的多基因双向调控的结果。研究表明,生长因子受体结合蛋白7(GRB7)对细胞迁移和肿瘤转移具有调控作用,而早期胚胎附植与肿瘤侵袭过程具有极大的相似性。汤军等在早... 巩斌 熊燊源 石国庆 万鹏程文献传递 新疆肉用绵羊颗粒细胞抑制素βA基因RNAi载体的构建及其干扰效率验证 2015年 抑制素βA基因(inhibin-βA,INHβA)的表达与绵羊(Ovis aries)的产羔数有一定关系。为了观察INHβA对绵羊发情性状的影响以及在目的基因沉默后,引起的发情性状相关激素变化的情况,本研究利用RNAi技术构建载体干扰INHβA的表达。根据GenBank上绵羊INHβA(GenBank:NW_004080167.1)mRNA的序列设计干扰片段,通过酶切和测序验证,成功构建了4个INHβA基因RNAi质粒载体PLLU2G-shINHβA-1(I-1)、PLLU2G-shINHβA-2(I-2)、PLLU2G-shINHβA-3(I-3)、PLLU2G-shINHβA-4(I-4)和1个空载体(赛亚公司的PLLU2G)阴性对照;在成功分离卵巢颗粒细胞并建立培养体系后,利用Lip2000介导干扰载体转染细胞,通过荧光定量RT-PCR检测干扰前后INHβA的表达量。结果显示,4个干扰载体的干扰效率依次为34%,58%,39%,19%,其中I-2对INHβA表达的沉默效果最好。通过卵巢注射干扰载体I-2,检测干扰后绵羊血清INHβA、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和雌二酮(E2)的含量。结果显示,注射干扰载体后INHβA和FSH分别呈现明显的下降和上升波峰,而血清中LH和E2水平没有发生明显变化。 林杉 陈宝麒 田占伟 刘贤侠 杨华 赵宗胜关键词:绵羊 RNA干扰(RNAI) 卵巢颗粒细胞 绵羊口蹄疫AsiaⅠ-O型双价疫苗免疫抗体消长情况的观察 2008年 李静 张鲁安 陈少平 周林 袁立刚 王忠山 李岩关键词:O型口蹄疫 ASIA 绵羊 抗体消长 双价灭活疫苗 绵羊IFN-γ基因的克隆与序列分析 被引量:6 2006年 将无菌采集的绵羊(湖羊)脾脏淋巴细胞进行体外培养,利用刀豆蛋白(ConA)刺激24 h后提取总RNA,采用RT-PCR扩增绵羊IFNγ-基因,并将其克隆到pMD18-T载体中,经PCR和双酶切鉴定后进行测序。测序结果表明,扩增的cDNA全长554 bp,包含501 bp开放阅读框,编码166个氨基酸,分子质量约为18.4 ku。克隆的绵羊IFNγ-基因与GenBank上已公布的人、牛、山羊、马鹿、马、骆驼、猪、狗、猫和鸡的IFNγ-核苷酸序列进行比较,其同源性分别为75.2%,96.6%,99.0%,95.8%,83.0%,88.8%,86.6%,82.4%,53.9%和32.9%,与其他品种绵羊的核苷酸同源性为100%;氨基酸序列同源性分别为61.7%,94.6%,98.2%,92.2%,77.8%,86.8%,77.8%,76.0%,39.5%和6.7%,这为进一步研究绵羊IFNγ-基因的表达、生物学活性和应用奠定了一定基础。 夏伦斌 连宏军 王新华 闫丽辉 薄新文 钟发刚 荣光 王运宏 郭燕关键词:绵羊 IFN-Γ基因 克隆 牛病毒性腹泻病毒持续感染的免疫学研究进展 2006年 牛病毒性腹泻病毒(BVDV)是危害养牛业的重要病原之一。BVDV感染能够引起广泛的临床症状,包括牛病毒性腹泻-黏膜病、持续感染、免疫耐受、繁殖障碍、血小板减少与出血综合征等。由于其病原的复杂性,给该病的控制及疫苗研制带来了一定的困难。近年来,对其免疫学的研究取得了一定进展,特别是在病原的基本免疫学特征、体液免疫、细胞免疫、免疫耐受和免疫调节方面做了深入研究,同时也在参与免疫应答的细胞因子方面做了研究,这些都为牛病毒性腹泻-黏膜病的预防和控制研究提供了新的思路。 钟发刚 王新华 程安春关键词:牛病毒性腹泻病毒 细胞免疫 体液免疫 免疫耐受 扩展莫尼茨绦虫wnt基因在虫体不同发育体节的差异表达 被引量:4 2016年 研究扩展莫尼茨绦虫(Moniezia expansa)wnt基因家族wnt1、wnt2、wnt4、wnt5和wnt11B5个基因在虫体不同发育体节的差异表达及组织分布规律,为进一步揭示Wnt信号通路在扩展莫尼茨绦虫发育中的作用奠定基础。作者采用SYBR GreenⅠqRT-PCR方法分析了wnt1、wnt2、wnt4、wnt5和wnt11B在虫体头颈节、幼节、成节和孕节的mRNA相对转录情况;采用核酸原位杂交方法分析上述5个基因在虫体头颈节、幼节、成节和孕节的mRNA分布情况。结果显示,wnt基因家族成员在虫体各发育体节均有表达,wnt1、wnt4、wnt5和wnt11B基因在虫体头颈节的mRNA转录水平相对较高,而在虫体孕节的mRNA转录水平最低;与之相反,wnt2基因在虫体头颈节的mRNA转录水平最低,而在虫体幼节的转录水平较高。原位杂交的结果表明,在虫体的头颈节,wnt基因主要表达于虫体的吸盘部位;在幼节和孕节,主要表达于虫体的节间腺,而在成节,wnt基因在虫体的雌雄生殖系统(如卵巢、睾丸)均有表达,并且在虫体的节间腺以及表皮也有一定的表达。综上,扩展莫尼茨绦虫5个wnt基因在虫体头颈节以及幼节的mRNA转录水平较高,且在虫体的吸盘、节间腺以及雌雄生殖细胞均有分布,因此初步推测Wnt信号通路可能参与扩展莫尼茨绦虫体节以及生殖细胞的发育过程,当然这一假说还有待进一步验证。 王正荣 张艳艳 薄新文 徐雪平 徐春生关键词:扩展莫尼茨绦虫 羔羊肺炎病原的鉴定与分析 被引量:2 2014年 为了解羔羊肺炎病原感染状况,试验采用病原分离、纯化和16S rRNA序列分析的方法,对5个地点的15只肺炎羔羊进行了研究。结果表明:分离得到38株病原菌和2株支原体。优势病原有溶血性曼氏杆菌、化脓隐秘杆菌、多杀性巴氏杆菌、粪肠球菌和Streptococcus minor。说明羔羊肺炎新老病原混合感染,加大了防控难度。 康立超 杨华 王国红关键词:羔羊 肺炎 病原 纯化