陕西省自然科学基金(2012JZ4002)
- 作品数：5 被引量：51H指数：2
- 相关作者：郭虹敏卞干兰王键薛茜鞠躬更多>>
- 相关机构：第四军医大学汉中市中心医院三原县医院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PB-GF转座子系统的构建及其在真核细胞中转座的研究被引量：1
- 2014年
- 目的构建能在真核细胞中发生转座的PB-GF(piggyBac gene-finder)转座子系统,作为发现和研究编码基因的工具。方法通过克隆技术,构建PB转座子载体pPB[CMV-neo]和PB转座酶表达载体pCAG-PBase,转染HeLa细胞,G418筛选和亚甲基蓝染色,验证PB转座酶在真核细胞中的转座能力。构建PB转座子载体pPB[β-Gal-pA/act-EGFP],使其包含两侧翼端加入PB转座酶识别位点反向末端重复序列(ITR),ITR1和ITR2,以及启动子陷阱和PolyA陷阱的DNA片段;同时与PB转座酶表达载体pCAG-PBase一起,构成PB-GF转座子系统。将PB-GF转座子系统转染HeLa细胞,通过荧光显微镜和流式细胞仪检测PolyA陷阱报告基因EGFP的表达;通过X-gal染色,观察启动子陷阱报告基因β-Gal的表达,明确PB-GF转座酶系统在真核细胞中的转座情况。结果成功构建成以转座子PiggyBac为基础的,含有启动子和PolyA陷阱的PB-GF转座子系统,并用该系统转染HeLa细胞24 h后观察到有相当数量的EGFP和LacZ阳性的细胞出现,转座效率高达26%。结论成功构建PB-GF转座子系统并可以在真核细胞中发生转座。
- 雷占翔刘芳芳于才勇卞干兰郭虹敏刘玲薛茜鞠躬王键
- 关键词：转座子基因组
- 醛糖还原酶通过cAMP反应元件结合蛋白通路调控小胶质细胞向M2型极化被引量：1
- 2014年
- 目的探讨醛糖还原酶(AR)调控小胶质细胞极化的机制。方法体外培养BV2小胶质细胞,给予醛糖还原酶抑制剂(ARI),通过免疫组织化学染色和酶标仪检测荧光强度的方法检测细胞4-羟基反式-2-壬烯酸(HNE)表达;体外培养N9小胶质细胞,分别用脂多糖(LPS)、HNE、醛糖还原酶抑制剂fidarestat(ARI)及其组合刺激后,利用Western blot法检测在不同刺激条件下N9细胞调控细胞极化和极化相关蛋白的变化;在上述刺激的条件下,联合应用cAMP反应元件结合蛋白(CREB)抑制剂KG-501,利用Western blot法检测极化相关蛋白的变化。结果阻断AR后使HNE在BV2细胞内堆积;Western blot法检测发现ARI通过增加磷酸化CREB的表达来调控N9细胞向M2型极化;应用CREB抑制剂后,能阻断上述过程。结论阻断AR可以使CREB的表达上调进而促进小胶质细胞向M2型极化。
- 张倩刘玲薛茜郭虹敏刘芳芳卞干兰于才勇鞠躬王键
- 关键词：醛糖还原酶脊髓损伤小胶质细胞CREB
- 小鼠PD-L1胞外段基因的原核表达及活性分析
- 2014年
- 目的原核表达小鼠程序性死亡分子1配体胞外段(exPD-L1)蛋白基因并在体外初步验证其生物学活性。方法应用小鼠脾脏细胞总RNA,反转录PCR克隆exPD-L1基因序列,将其克隆到pGEX-4T-1载体中构建原核表达载体pGEX-4T-1-exPD-L1,经酶切和测序鉴定正确后,转化到E.coli BL21(D3)中,经IPTG诱导表达后,对包涵体蛋白进行复性和纯化。对表达产物进行SDS-PAGE分析和Western blot法检测证明其正确后,采用GST pull-down检测融合蛋白和PD-1的相互作用,鉴定其生物学活性。结果成功构建重组质粒pGEX-4T-1-exPD-L1,并在宿主菌中成功表达相对分子质量(Mr)55 000的重组蛋白,包涵体成功复性和纯化后经Western blot法证明其正确表达,同程序性死亡分子1(PD-1)蛋白的GST pull-down结果表明融合蛋白具有生物学活性。结论成功克隆和表达小鼠exPD-L1蛋白,并证明其具有生物学活性。
- 郭虹敏陈琨于才勇卞干兰刘芳芳雷占翔薛茜鞠躬王键
- 关键词：原核表达
- 子宫肌瘤切除术患者围术期舒适护理被引量：16
- 2018年
- 目的探讨对子宫肌瘤切除术患者采取舒适护理的临床价值。方法选取拟行子宫肌瘤切除术患者45例为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组,对照组22例采取围术期常规护理,观察组23例在常规护理基础上给予舒适护理,比较2组患者护理效果。结果护理前2组焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS)得分无统计学差异(P>0.05);护理后2组评分均显著下降,且观察组低于对照组(P<0.05)。观察组在体位、术后疼痛、心理等方面的舒适度高于对照组(P<0.05);对照组并发症发生率高于观察组(P<0.05)。结论子宫肌瘤切除术患者围术期给予舒适护理,可改善其负性情绪、提高身心舒适度,有效减少并发症的发生。
- 刘冰峰
- 关键词：子宫肌瘤舒适护理妇科疾病
- 神经节苷脂联合长春西汀治疗方案对急性脑梗死患者康复期神经功能重建的影响被引量：33
- 2016年
- 目的:分析神经节苷脂联合长春西汀治疗方案对急性脑梗死患者康复期神经功能重建的影响。方法:选择在我院接受治疗的92例急性脑梗死患者康复期患者,随机分为观察组及对照组各46例。对照组接受基础治疗,观察组接受基础治疗+神经节苷脂联合长春西汀治疗,对比两组治疗后脑血流灌注参数及血清神经功能、出血转化、凝血功能等相关指标含量差异。结果:观察组治疗后脑血流灌注参数CBF、CBV值高于对照组,MTT、TTP值低于对照组;观察组治疗后血清神经生长相关因子MBP、GAP-43、TGF-β1含量低于对照组,BDNF、NGF、IGF-1含量高于对照组;观察组治疗后血清出血转化相关指标MMP-2、MMP-9、GFAP、FN含量低于对照组,PAI含量高于对照组;观察组治疗后血清凝血抗凝系统相关因子vWF、TM、PC、β-TG、PF4含量低于对照组(P<0.05)。结论:神经节苷脂联合长春西汀可以促进急性脑梗死患者康复期患者的神经功能重建、抑制脑出血及再次脑梗的发生。
- 陈琪李国强李惊涛
- 关键词：急性脑梗死神经节苷脂神经功能
