浙江省科技厅公益技术研究农业项目(2010R21A52D03)
- 作品数：1 被引量：8H指数：1
- 相关作者：徐国娟周洁李亚丽刘中来瞿绍洪更多>>
- 相关机构：浙江省农业科学院浙江师范大学更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅公益技术研究农业项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 转mCherry基因水稻的遗传分析及T-DNA整合位点的研究被引量：8
- 2012年
- 为了建立转基因水稻的高通量遗传分析系统,本研究以粳稻成熟胚诱导的愈伤组织为受体材料,潮霉素磷酸转移酶(HPT)为抗性筛选标记,通过农杆菌介导的方法将红色荧光蛋白基因mCherry导入水稻。在水稻转化愈伤组织、转化植株(T0)和转基因后代(T1)均检测到红色荧光,证实mCherry在转基因水稻中稳定表达。139个独立转化株系的遗传分析表明,mCherry在转基因后代表现多种遗传模式,54%的转基因株系呈单位点遗传。TAIL-PCR进一步验证转基因整合到水稻基因组。根据T-DNA整合位点DNA序列分析结果,T-DNA左边界发生碱基缺失、增加和替换,右边界只发生碱基缺失,说明左边界比右边界有更多的碱基变异类型。此外,对T2代植株mCherry和HPT的转录水平进行实时定量逆转录PCR分析,结果表明,mCherry和HPT转录水平因T-DNA在水稻基因组中的整合位置而变化,表现位置效应。本研究在mCherry荧光蛋白和其它相关方法的基础上,为转基因水稻遗传及分子分析建立了一个高效的流程体系。
- 李亚丽刘中来周洁徐国娟瞿绍洪
- 关键词：水稻MCHERRY转基因T-DNA整合位点
