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- Bufalin在制备抗IHNV和IPNV的产品中的应用
- 本发明公开了Bufalin在制备抗IHNV和IPNV的产品中的应用。本发明提供了Bufalin或其衍生物或其药学上可接受的盐或以Bufalin或其衍生物或其药学上可接受的盐为活性成分的物质在制备用于抗鱼类病毒的产品中的应...
- 赵景壮徐黎明卢彤岩任广明邵轶智刘琪
- 抗IHNV和IPNV共感染海带提取物的制备与应用
- 本发明公开了抗IHNV与IPNV共感染海带提取物的制备与应用,属于提取物领域。本发明公开了海带提取物在制备病毒抑制剂或抗病毒药物中的应用,所述病毒为传染性造血器官坏死病毒和传染性胰腺坏死病毒,所述海带提取物按照包括如下步...
- 任广明徐黎明卢彤岩赵景壮邵轶智
- 抗IPNV的海带提取物及其应用
- 本发明属于提取物领域,具体涉及抗IPNV海带提取物及其应用。本发明公开了海带提取物,所述海带提取物按照包括如下步骤的方法制备:1)海带粗提物的制备:包括去除海带浸提液中的蛋白质,得到海带粗提物;所述海带浸提液是对海带进行...
- 任广明徐黎明卢彤岩赵景壮邵轶智
- 传染性胰腺坏死病(IPNV)的RAA恒温荧光检测方法及试剂
- 本发明公开了一种传染性胰腺坏死病(IPNV)RAA恒温荧光检测方法和检测试剂盒。检测试剂盒包括一条正向引物SEQ ID NO.1、一条反向引物SEQ ID NO.2、一条特异性荧光探针SEQ ID NO.3、反应液、逆转...
- 刘荭钱冬程奇贾鹏张建勋肖文余国君史秀杰郑晓聪王津津于力何俊强刘莹温智清
- 文献传递
- 虹鳟IPNV分离株VP2蛋白的表达及免疫原性检测被引量:6
- 2019年
- 为充分了解中国鱼类传染性胰腺坏死病病毒的系统进化,对流行病学调查分离出的虹鳟Oncorhynchus mykiss传染性胰腺坏死病病毒(IPNV)分离株进行了系统进化分析,利用软件综合分析了IPNV病毒表面蛋白VP2的跨膜区、亲水性、抗原性和表面可能性,对其特定区段进行了原核表达,并利用表达蛋白制备鼠抗血清及免疫学鉴定。结果表明:本实验室得到的分离株与中国已报道的毒株具有不同的来源;SDS-PAGE分析显示,表达纯化的VP2蛋白为单一条带,相对分子质量约为45 000;ELISA分析显示,利用表达蛋白制备的鼠抗血清与IPNV分离株细胞培养物的效价为1∶20 000,与VP2蛋白的效价为1∶40 000;间接免疫荧光分析显示,细胞感染IPNV病毒24、48 h后,该鼠抗血清均能与IPNV毒株发生特异性反应,并呈现出特异性绿色荧光。研究表明,本研究中表达的VP2蛋白与IPNV病毒的VP2蛋白具有相近的免疫原性,这一结果为IPNV检测方法的建立及疫苗的构建提供了重要的试验依据。
- 赵景壮贺文斌徐黎明纪锋曹永生胡朝卢彤岩
- 关键词:VP2蛋白
- IHNV-N蛋白和IPNV-VP2蛋白抗血清的制备与应用
- 传染性造血器官坏死病毒(Infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)和传染性胰腺坏死病毒(Infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)...
- 梁磊
- 关键词:鱼病学抗血清
- IHNV与IPNV免疫层析试纸条的制备及应用
- 2017年
- 本文制备传染性造血器官坏死病毒(Infectious haematopoietic necrosis virus, IHNV)、传染性胰脏坏死病毒(Infectious pancreatic necrosis virus, IPNV)胶体金快速检测试纸,并对其性能进行检测。以柠檬酸三纳作为还原剂制备胶体金颗粒,标记IHNV、IPNV单克隆抗体,将羊抗鼠IgG、羊抗兔IgG、兔抗鼠和纯化后的2种单克隆抗体包被于NC膜上,作为质控线和检测线来检测样品中的IHNV和IPNV。结果表明所研制的试纸特异性良好,分别对鲤春血症病毒(SVCV)、病毒性出血性败血症病毒(VHSV)、流行性造血器官坏死病毒(EHNV)等常见病原菌进行测试,未出现交叉反应;敏感度达到105 CFU/mL,反应时间仅需5 min^10 min,可以用于感染上述2种病原的病鱼腹水现场检测。
- 吴斌赵亮王红张琳关鹏
- 关键词:胶体金免疫层析试纸条
- 鱼源植物乳杆菌表达IPNV VP2-VP3重组蛋白及其口服免疫程序被引量:4
- 2017年
- 为比较鱼源乳酸菌表达系统口服疫苗在不同免疫程序下诱导鱼免疫应答水平的差异,确定鱼源乳酸菌表达系统口服免疫虹鳟幼鱼的免疫程序。本研究构建了重组表达IPNV VP2-VP3蛋白的鱼源植物乳杆菌L1212,将重组菌pPG612-VP2-VP3/L1212包裹颗粒饲料,口服免疫虹鳟幼鱼。免疫程序分为连续免疫组、免疫1 d后间隔1 d再免疫1 d组、连续免疫4 d后32 d加强免疫1次组和间隔免疫后32 d加强免疫1次组。免疫后进行尾动脉采血,间接ELISA方法检测各组血清抗体效价,免疫接种66 d后,腹腔注射IPNV,计算各组相对免疫保护率。确定颗粒饲料按照1 mL/g比例与108 CFU/mL重组菌pPG612-VP2-VP3/L1212和2.5%海藻酸钠混合,于20℃烘干制备口服疫苗。间隔免疫组血清抗体效价和攻毒保护率均显著高于其他组,并且免疫2次的间隔免疫组的血清抗体效价和攻毒保护率均显著高于免疫1次间隔免疫组。采用重组菌包被颗粒饲料饲喂虹鳟幼鱼,间隔免疫的免疫程序和免疫保护率优于连续免疫的免疫程序,对IPNV的入侵起到保护作用。
- 刘佳琪高帅段可馨郭梦婷杜航康海燕张英唐立杰李一经刘敏
- 关键词:植物乳杆菌IPNV口服疫苗免疫程序
- 实时荧光定量RT-PCR检测鱼类传染性胰脏坏死病病毒方法的建立被引量:8
- 2011年
- [目的]建立Taqman探针荧光定量RT-PCR检测传染性胰脏坏死病病毒(IPNV)的方法。[方法]选取IPNV病毒的基因保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物与探针。以梯度稀释的含有IPNV目的扩增片段的质粒作为标准品,探索定量RT-PCR反应条件。[结果]当标准品浓度在102~106 copies/μl之间时,标准品浓度(X)与Ct的关系为Ct=-3.426 lgX+4.481,相关系数R2为0.999 8。该法对病毒性出血性败血症病毒(VHSV)、传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)、鲤春病毒血症病毒(SVC)和流行性造血器官坏死病病毒(EHNV),草鱼呼肠孤病毒(GCRV),大鳞大麻哈鱼胚胎细胞(CHSE-214)和虹鳟的核酸都没有扩增反应。[结论]该检测方法灵敏度高,特异性好,可用于鱼类传染性胰脏坏死病病毒的快速定量检测。
- 徐晔段宏安周毅刘亭歧姚燕林
- 关键词:荧光定量RT-PCRTAQMAN探针
- 传染性胰腺坏死病毒VP3基因的分段表达及其抗原表位区域分析被引量:3
- 2011年
- 采用PCR方法克隆了传染性胰腺坏死病毒(IPNV)VP3四段相互重叠的基因片段L1、L2、L3和L4,将PCR产物分别连接到原核表达载体pGEX-6P1和pET32a上,经酶切、PCR、测序鉴定,获得重组质粒pGEX-6P1-VP3(L1)、pET32a-VP3(L2)、pGEX-6P1-VP3(L3)和pGEX-6P1-VP3(L4);将其分别转化感受态菌Rosetta和BL21,经1.0mmol/L的IPTG诱导,分别得到大小为32 kD、26 kD、30 kD和31 kD的目的蛋白。经Western-blo-ting分析,4段目的蛋白中,只有VP3(L1)和VP3(L4)基因片段所表达的融合蛋白能与IPNV阳性血清反应,说明VP3蛋白的免疫优势区域集中在该蛋白的1~70和143~206氨基酸之间。该融合蛋白可以作为诊断抗原用于建立ELISA诊断方法。本实验为进一步精确定位VP3蛋白抗原表位奠定了基础。
- 刘巍巍赵丽丽赵永欣王健楠李一经葛俊伟乔薪瑗刘敏
- 关键词:VP3基因原核表达抗原表位
相关作者
- 刘敏

- 作品数:136被引量:378H指数:11
- 供职机构:东北农业大学
- 研究主题:单克隆抗体 干酪乳杆菌 传染性胰腺坏死 蓝舌病病毒 甲病毒
- 赵景壮

- 作品数:117被引量:128H指数:7
- 供职机构:中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
- 研究主题:虹鳟 核酸疫苗 病毒 造血器官 抗I
- 徐黎明

- 作品数:142被引量:133H指数:7
- 供职机构:中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
- 研究主题:虹鳟 病毒 造血器官 核酸疫苗 抗I
- 卢彤岩

- 作品数:348被引量:1,175H指数:18
- 供职机构:中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
- 研究主题:虹鳟 嗜水气单胞菌 鲤鱼 病毒 造血器官
- 李一经

- 作品数:500被引量:1,346H指数:17
- 供职机构:东北农业大学动物医学学院
- 研究主题:猪传染性胃肠炎病毒 单克隆抗体 猪流行性腹泻病毒 干酪乳杆菌 猪轮状病毒