李静
- 作品数：34 被引量：60H指数：4
- 供职机构：河南科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学化学工程医药卫生更多>>
- 鼠伤寒沙门氏菌SL1344株△crp△cya缺失株的构建及其生物学特性初步研究被引量：13
- 2012年
- 为研制更加安全并保持良好免疫原性的弱毒株鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)及疫苗活载体,本研究通过自杀性质粒介导的细菌同源重组技术,将已缺失cya基因的SL1344株进一步缺失crp基因,构建S.typhi-murium SL1344△crp△cya双基因缺失突变株,并对其生物学特性进行初步研究。双基因缺失株的构建是以含有重组自杀性质粒pRE△crp的大肠杆菌χ7213为供体菌,SL1344△cya为受体菌进行接合转移,两步法筛选crp/cya基因双缺失突变株,并通过PCR和测序鉴定。对双缺失菌株的生物学特性鉴定表明,SL1344△crp△cya血清型与亲本株SL1344△cya及野生株SL1344保持一致,并且能够稳定遗传缺失后的crp基因;其生化特性与亲本株基本相近,但与野毒株相比发生明显变化,生长速度也更为缓慢;对雏鸡致病性测定试验显示,双缺失株毒力比SL1344至少降低了约106倍。实验结果表明,S.typhimurium SL1344△crp△cya缺失株具有良好的遗传稳定性,毒力明显降低,为深入研究以S.typhimurium为载体的口服疫苗奠定了基础。
- 李正程相朝张春杰李银聚李静张明亮田芳华杨宁宁
- 德式乳酸杆菌对黄河鲤抗胁迫能力的影响被引量：3
- 2019年
- 为研究德式乳酸杆菌对黄河鲤应激前后抗应激指标、血液免疫指标、抗氧化指标和HSP70、HSP90基因表达的影响,选取黄河鲤450尾,随机分为5组(每组3个平行,每个平行30尾鱼),分别投喂在基础饲料中添加不同浓度乳酸菌(0、1×105、1×106、1×107、1×108CFU/g)的日粮,养殖8周后,进行拥挤胁迫。试验结果表明:应激前,皮质醇浓度在1×106、1×107CFU/g乳酸菌组显著低于对照组(P <0. 05),血糖和乳酸浓度在试验组显著低于对照组(P <0. 05),溶菌酶活性在1×106、1×107CFU/g乳酸菌组显著高于对照组(P <0. 05),C3和C4在1×106CFU/g乳酸菌组显著高于对照组(P <0. 05)。应激后,血液皮质醇、血糖和乳酸浓度都有不同程度的升高,这些指标在添加乳酸菌组的含量均显著低于对照组(P <0. 05),血液溶菌酶活性、C3和C4浓度也有升高趋势,且在1×106CFU/g乳酸菌组显著高于对照组(P <0. 05);应激前后SOD和CAT活性在1×106CFU/g乳酸菌组显著高于对照组(P <0. 05),MDA含量呈相反的趋势,在1×106、1×107CFU/g乳酸菌组显著低于对照组(P <0. 05),应激使HSP70和HSP90基因表达均有升高趋势,在应激前后试验组的HSP70和HSP90基因表达量大部分都显著高于对照组(P <0. 05)。该研究结果显示,饲料中添加1×106～1×107CFU/g德式乳酸菌能提高黄河鲤的免疫力、抗氧化和抗应激的能力。
- 关素华曾庆辉张晓飞李静李帅张安东马玉兴张春暖
- 关键词：黄河鲤免疫应激抗氧化
- 敲除aceE基因对猪链球菌丙酮酸代谢的影响
- 2022年
- 【目的】探究缺失编码丙酮酸脱氢酶蛋白的aceE基因对猪链球菌生长特性、三羧酸循环和丙酮酸代谢的影响。【方法】通过测量菌液的OD600值,绘制野生型菌株与aceE基因缺失突变株的生长曲线;利用试剂盒测定三羧酸循环和丙酮酸代谢旁路中乙酰CoA、琥珀酸CoA、延胡索酸、草酰乙酸、丙酮酸、乳酸和ATP的含量,通过荧光定量qRT-PCR确定柠檬酸合酶基因、苹果酸脱氢酶基因、琥珀酸脱氢酶基因、异柠檬酸脱氢酶基因、丙酮酸脱羧酶基因、乳酸脱氢酶基因、乙醇脱氢酶基因和乙醛脱氢酶基因的表达水平。【结果】与野生株相比,菌株ΔaceE在平台期OD600值下降;添加1 g/L乙酸盐能够显著提升菌株ΔaceE平台期OD600值。菌株ΔaceE的丙酮酸含量上升,ATP含量下降;三羧酸循环代谢中乙酰CoA、琥珀酸CoA、延胡索酸含量降低;柠檬酸合酶基因和苹果酸脱氢酶基因表达水平上升,琥珀酸脱氢酶基因和异柠檬酸脱氢酶基因表达水平下调;在丙酮酸代谢旁路中丙酮酸脱羧酶基因、乳酸脱氢酶基因、乙醇脱氢酶基因和乙醛脱氢酶基因表达水平上升。【结论】结果显示,菌株ΔaceE三羧酸循环活性降低,虽然能够通过PDH旁路将部分丙酮酸分解为乙酸盐,进一步转化为乙酰CoA进入三羧酸循环,但ATP含量仍未恢复至野生株水平,这为进一步研究代谢改变与细菌表型的关系提供了理论基础。
- 毛晨龙樊擎莹左静薛冰倩李金朋李静张小玲汪洋
- 关键词：猪链球菌
- 鼠伤寒沙门菌超氧化物歧化酶SodA基因的原核表达
- 究利用PCR方法扩增鼠伤寒沙门菌的SodA基因,并将其克隆至原核表达载体pET28a,构建重组表达质粒pET28a-SodA.将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG进行诱导表达.通过双酶切和...
- 张建康梅晶晶张春杰余祖华何雷贾艳艳李静郁川程相朝汪洋
- 关键词：鼠伤寒沙门菌超氧化物歧化酶原核表达
- 鼠伤寒沙门菌六型分泌系统效应蛋白Clpv对巨噬细胞极化的影响被引量：1
- 2023年
- 【目的】探讨Ⅵ型分泌系统(typeⅥsecretion system,T6SS)效应蛋白Clpv在鼠伤寒沙门菌(Salmonella enterica serovar Typhimurium)致病过程中的功能。【方法】以鼠伤寒沙门菌SL1344基因组为模板克隆clpv基因,并比较与其他革兰氏阴性菌台湾假单胞菌(Pseudomonas taiwanensis)、植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)、鳗利斯顿氏菌(Listonella anguillarum)、菠萝多源菌(Pantoea ananatis)、粘放线菌(Actinomyces viscosus)和大肠埃希菌(Escherichia coli)的同源性;将clpv基因克隆至pEGFP-N1载体构建重组质粒pEGFP-Clpv,利用Western blotting、实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,q-PCR)、荧光显微镜以及流式细胞术检测蛋白表达、定位及诱导小鼠巨噬细胞M1型和M2型极化水平。【结果】clpv基因全长为2637 bp,与台湾假单胞菌的同源性最高;Western blotting、qPCR和免疫荧光检测表明重组蛋白大小约120 kDa,在细胞中有明显绿色荧光并且主要定位于细胞膜;q-PCR和流式细胞术结果发现Clpv转染组巨噬细胞M1型极化显著增加(P<0.01),M2型巨噬细胞极化显著减少(P<0.01)。【结论】成功克隆表达鼠伤寒沙门菌T6SS效应蛋白Clpv,并明确其胞内表达定位以及对巨噬细胞极化的影响。
- 杜付熙王文婕尚珂余祖华李静李静贾艳艳廖成水丁轲张春杰程相朝
- 关键词：鼠伤寒沙门菌极化
- gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞转录组的影响
- 2023年
- 旨在探讨gga-miR-155对马立克病病毒转化的肿瘤细胞系MDCC-MSB1细胞转录组水平变化的影响。本研究以MDCC-MSB1细胞为研究对象,首先将gga-miR-155模拟物及其阴性对照转染MDCC-MSB1细胞,在转染后48 h提取总RNA,用安捷伦2100核酸检测仪分析各组细胞总RNA的完整性,采用RT-qPCR分析gga-miR-155在MDCC-MSB1细胞中的过表达情况;然后利用高通量测序技术,分析gga-miR-155过表达后MDCC-MSB1细胞转录水平的变化,筛选差异表达基因,结合生物信息学分析预测差异表达基因中gga-miR-155靶mRNA。结果显示:制备了gga-miR-155在MDCC-MSB1细胞过表达样本并构建了高通量测序文库;与对照组相比,gga-miR-155过表达组的差异表达基因有87个,其中,上调表达的基因有47个,下调表达的基因有40个;GO与KEGG分析显示,这些差异表达基因显著富集于代谢和蛋白结合过程/信号通路;通过Targetscan和miRada软件预测下调表达基因中鸡BACH1为gga-miR-155的靶mRNA(P<0.05)。综上,过表达gga-miR-155可调控MDCC-MSB1细胞的转录组水平,差异表达基因中BACH1基因可能在gga-miR-155的作用下参与了MDCC-MSB1细胞的代谢过程。
- 余祖华余祖华何雷贾艳艳李静何雷陈建廖成水尚珂李静
- 关键词：马立克病转录组
- 细菌外膜囊泡结构、分泌特性及致病机制
- 2024年
- 外膜囊泡(outer membrane vesicles, OMVs)是革兰阴性菌在生长过程中释放到胞外的囊泡状结构,被认为是细菌的“远程武器”,其功能主要是攻击宿主组织并帮助细菌定植、损害宿主细胞功能、调节宿主的防御,因此OMVs在细菌致病过程中发挥着重要作用。囊泡中的物质通过与细菌释放出的自诱导物化学信号分子结合,可以驱使细菌或者囊泡在内环境中发挥特殊功能,如群体感应、生物膜形成、获取营养、抗生素抗性、应激反应、对抗其它微生物的竞争或防御、微生物群落状态、核酸转移、水平基因转移、毒素和毒力因子的递送等,且在细菌生长周期发挥着不可或缺的作用。本文主要综述OMVs结构、分泌特性及其致病机制的最新研究进展,为深入研究细菌的致病机制以及开发新的抗菌策略提供理论指导。
- 高远集刘畅刘畅陈松彪张俊峰陈松彪贾艳艳李静郭荣显李静贾艳艳尚珂
- 关键词：细菌致病机制
- 副猪嗜血杆菌国内流行血清型菌株的致病性比较研究
- 赵战勤王乐薛云廖成水李静龙塔
- 豫西地区畜牧业环保养殖发展探析——以洛阳市畜牧业为例被引量：3
- 2018年
- 为响应国家服务乡村振兴战略的号召,改善农村人居环境,推动畜牧业绿色发展,河南科技大学实践团队围绕畜禽养殖中较为突出的环境综合治理问题开展专项社会实践活动。通过对豫西地区畜牧业发展现状的调研,发现畜禽养殖业在养殖管理、卫生防疫、粪污处理、畜禽废弃物无害化处理等方面存在种种问题,严重制约着农村经济的发展,故对豫西地区畜禽养殖业的养殖管理、废弃物无害化处理等方面的未来发展之路提出合理化的分析与建议,助推绿色生态畜牧业的发展。
- 王宇栋程传腾杨红飞姬诺刘心怡胡权蔺丽丽李珂珂丁翔飞李静
- 关键词：社会实践畜牧业
- 猪源多杀性巴氏杆菌的病原流行病学及其毒力特性研究
- 赵战勤李静薛云刘志军王乐廖成水龙塔
