谢超
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：上海市卫生局科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IA-2基因的克隆及原核表达研究被引量：1
- 2001年
- 目的 应用基因工程技术获取足量且具有免疫活性的IA 2重组蛋白 ,为建立IA 2抗体检测方法奠定基础。方法 通过逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)法从小鼠脑组织RNA中扩增编码IA 2胞内结构域的cDNA ,构建表达型重组质粒 ,经DNA序列分析确证后 ,在大肠杆菌中表达 ,用亲和层析纯化融合目的蛋白 ,并以斑点印迹技术 (Dotblot)鉴定其免疫原性。结果 所获特异PCR产物正确重组至PinpointXa 1表达载体中。经异丙基硫代半乳糖苷诱导的原核表达及亲和层析得到了纯度较高、相对分子质量约 5 6 0 0 0的融合目的蛋白 ,表达量约 1mg蛋白 /升菌液 ,且表达产物与谷氨酸脱羧酶抗体阳性的糖尿病患者血清及健康对照血清发生的显色反应差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 原核表达的IA 2融合蛋白具有免疫学活性 ,可用于糖尿病患者血清中相关抗体的检测。
- 宗阳罗敏丁伟金群燕陈源陈刚蔡东升刘优萍谢超
- 关键词：自身抗原基因表达糖尿病DM
- 甲状腺激素调控脑发育分子机制的系列研究
- 罗敏苏青蔡东升谢超陈源李果宗阳陈家伦
- 本研究旨在探讨甲状腺激素调控脑发育的分子机制。在国际上首先纯化成大鼠肝核T3受体并制备成功核T3受体单克隆抗体，并阐明核T3受体的器官、组织、细胞的分布和发生规律。首次将DD-PCR技术用于脑甲状腺激素反应基因的研究。首...
- 关键词：
- 关键词：甲状腺激素脑发育分子机制
- 糖尿病性高血压大鼠肾损害相关基因cDNA片段的克隆与初步鉴定被引量：4
- 2002年
- 为筛选大鼠糖尿病性高血压病所致的肾损害相关基因 ,自发性高血压大鼠以STZ 5 0mg/kg一次性尾静脉注射 ,建立糖尿病性高血压大鼠模型 ,4周后该模型大鼠尿蛋白持续阳性 ,电镜观察到肾小球基质增生、足突融合或扁平 .应用荧光标记的差异显示反转录聚合酶链反应 (DDRT PCR)及RNA印迹技术 ,比较两种模型大鼠肾皮质的基因表达差异 ,并进行差异条带的cDNA序列生物信息学分析 .其中 4个差异条带与Genbank数据库比较 ,2个为未知基因 ,2个为已知基因 ,即成淀粉样糖蛋白 (amyloidogenicglycoprotein ,AGG)、CDK10 9,两者可能与糖尿病性高血压肾损害的发生相关 ,对它们的进一步研究将为肾损害发病机理的发现提供思路 .
- 张芳林李果叶传忠丁伟刘优萍谢超张迪孙卫华罗敏
- 关键词：糖尿病性高血压肾损害相关基因CDNA片段克隆
- 人血清IA-2抗体检测方法的建立及应用
- 2006年
- 目的建立糖尿病患者血清中IA-2自身抗体的检测方法。方法以原核表达的人IA-2融合蛋白作为抗原建立人血清IA-2抗体的固相酶联免疫吸附检测方法（ELISA），该方法经优化后用于糖尿病患者血清中IA-2抗体的检测。结果该文所建立方法的平均批内和批间变异系数分别为6．8％和7．7％；回收率为99．2％～105％。所测定的1型和2型糖尿病患者血清中IA-2抗体的阳性率分别为49％和3．6％。结论应用原核表达的人IA-2蛋白为抗原所建立的ELISA方法简单且可靠，为糖尿病患者血清中IA-2抗体的检测提供了条件。
- 贾秀娟谢晓雁李果谢超张迪周文中罗敏
- 关键词：糖尿病自身抗体IA-2
- 人胰岛素瘤相关蛋白-2基因的克隆及原核表达研究被引量：2
- 2003年
- 目的 克隆1型糖尿病自身抗原人胰岛素瘤相关蛋白-2(IA-2)的编码基因,并从大肠杆菌中表达具有免疫原性的人IA-2重组蛋白。 方法 抽提胎脑总RNA,通过RT-PCR获得编码IA-2胞内结构域的cDNA,与Pinpoint Xa-1T质粒相连接,构建表达型重组质粒,经转化、筛选并鉴定后,从大肠杆菌诱导表达生物素酰化融合蛋白,进而用亲和层析纯化之,以dot-blot鉴定其免疫原性。 结果 重组质粒转化的大肠杆菌经IPTG诱导表达及亲和层析后得到了纯度较高、分子量约为59kd的融合蛋白,表达产物用dot-blot证明具有免疫原性。 结论 原核表达的生物素酰化人IA-2胞内段融合蛋白具有正确的免疫学构象。
- 贾秀娟陈战许光武谢超谢晓雁罗敏
- 关键词：原核表达1型糖尿病自身抗原大肠杆菌RT-PCR
