何洪彬
- 作品数：7 被引量：68H指数：5
- 供职机构：解放军农牧大学军事兽医研究所更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 犬瘟热病毒野毒株H蛋白基因的序列分析被引量：22
- 1999年
- 对引起长春某犬场犬死亡的犬瘟热病毒（ Ｃ Ｄ Ｖ）野毒株（ Ｌ Ｉ Ｕ）附着或血凝蛋白（ Ｈ）基因进行了全基因序列测定，并与疫苗弱毒 Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ 株作了比较。用 ４ 对引物对 Ｌ Ｉ Ｕ 株进行了 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 扩增，将扩增得到的 ４ 个阳性 Ｐ Ｃ Ｒ 片段纯化后直接测序。将所测序列拼接后，去掉侧翼的 Ｆ 基因和 Ｌ 基因序列，得到了 Ｈ蛋白的全基因序列。该基因全长为 １ ９４６ ｂｐ，开放阅读框架（ Ｏ Ｒ Ｆ）始于 ２１～２３ 位的 Ａ Ｔ Ｇ，终止于 １ ８４２～１ ８４４位的 Ｔ Ｇ Ａ，编码 ６０７ 个氨基酸。将 Ｌ Ｉ Ｕ 毒株与疫苗弱毒 Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ 株进行比较，二者 Ｈ 基因核苷酸序列的同源性为 ９１．７％ ，推导的 Ｈ 蛋白氨基酸序列的同源性为 ９０．２％ 。 Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ 株的 Ｈ 蛋白潜在的 Ｎ 联糖基化位点为 ４ 个，而 Ｌ Ｉ Ｕ 株 Ｈ 蛋白为 ８ 个。糖基化位点的不同可能对 Ｌ Ｉ Ｕ 株 Ｈ 蛋白的抗原性产生影响。２ 个毒株 Ｈ 蛋白的半胱氨酸残基数目均为 １２ 个，且位置是保守的；疏水性有一定的不同，但推测的穿膜区位置是相同的，位于 ３５～５５ 位氨基酸之间。
- 何洪彬李金中夏咸柱黄耕范泉水余春邱薇
- 关键词：犬瘟热病毒抗原性
- 犬瘟热病毒小熊猫株附着蛋白基因的序列分析被引量：13
- 1999年
- 为了从基因水平上研究我们分离的犬瘟热病毒（CDV）。熊猫（LP）毒株与疫苗弱毒Onderstepoort株的差别，本文对LP毒株附着蛋白（H）基因进行了序列测定。我们设计合成了4对引物，对LP株进行了RT-PCR扩增，将扩增得到的4个阳性PCR片段纯化后，直接进行测序，把所测序列拼接后，去掉侧翼的F基因和L基因序列，得到了H蛋白的全基因序列，该基因全长为1946bp，开放阅读框架（ORF）始于21-23位的ATG，终止于1842-1844位的TGA，编码607个氨基酸。将LP毒株与GenBank中疫苗弱毒Onderstepoort株进行比较，二者H基因核苷酸序列的同源性为92％，推导的H蛋白氨基酸序列的同源性为90％。Onderstepert株的H蛋白潜在的N-联糖基化位点为4个，其中2个位于N末端2／3处（一个位于推测的胞质部分，不能利用），另2个位于蛋白质C末端1／3处，而LP株H蛋白潜在的队联糖基化位点为8个，其中4个与Ondersttepoort的N-联糖基化位点完全相同，但另外4个是疫苗株所不具有的，糖基化位点的不同可能对LP株H蛋白的抗原性产生影响;两个毒株H蛋白的丰胱氨酸残基数目均为12个且位置是保守的;疏水性有一定的变化，但推测的穿膜区位置是相同的，约位于35-55位氨基酸之间。上述结果表明LP和Onderstepoort疫苗株的H蛋白及其基因是存在差别的，至?
- 何洪彬李金中夏咸柱黄耕邱薇余春范泉水
- 关键词：小熊猫瘟热病毒
- 基因序列分析确诊大熊猫的犬瘟热病毒感染被引量：23
- 1999年
- 直接从死亡大熊猫肝脏提取细胞总 Ｒ Ｎ Ａ，经反转录后用犬瘟热病毒的 １ 对引物扩增出了约 ３２０ ｂｐ 的片段。此产物经纯化、序列分析表明，其片段 ２ 个引物间长度为 ２８１ ｂｐ，与预计片段大小相同。此毒株在核苷酸和氨基酸水平与北京犬等 ４ 个野毒株、哈尔滨犬野毒株、某疫苗弱毒株、 Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ 弱毒株和海豹瘟热病毒 ２ 型毒 株的 同源 性分 别为 ９２２％ 和 ９８９％ 、９２５％ 和 ９８９％ 、９１５％ 和 ９４６％ 、９２９％ 和 ９８９％ 、９８２％ 和 １００％ 。这样就进一步确定了大熊猫的犬瘟热病毒感染。
- 李金中夏咸柱何洪彬余春胡贵学范泉水郑先春黄耕武银莲
- 关键词：大熊猫犬瘟热病毒PCR扩增
- 全文增补中
- 熊猫犬瘟热病毒的进化地位研究
- 本文对致死大、小熊猫和犬的各一个犬瘟热病毒株的H蛋白基因进行了研究,应用RT-PCR从病料或细胞培养物中,分3段扩增出了3个毒株H蛋白的前部分基因,经序列分析均为1641bp。将测定的3个毒株的序列与Genbank中现有...
- 李金中何洪彬胡贵学范泉水余春郑先春黄耕武银莲夏咸柱殷震
- 关键词：熊猫犬瘟热病毒进化
- 文献传递
- 大熊猫犬瘟热病毒融合蛋白基因3′端的序列测定被引量：7
- 1999年
- 从死亡大熊猫的肝脏中直接提取细胞总ＲＮＡ，经反转录后，用犬瘟热病毒的两对引物，分两段扩增出融合蛋白基因３′端的片段。经序列分析表明：此片段的长度为６９３ｂｐ；此毒株在核苷酸和氨基酸水平与某疫苗弱毒株、Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ弱毒株、海豹瘟热病毒２型毒株和海豹瘟热病毒１型的同源性分别为９７．５％和９６．２％、８８．６％和９４．５％、９２．９％和９５．６％、６３．２％和７６．５％；大熊猫毒株与其它毒株融合蛋白３′端疏水性和二级结构均有一定差异；其非编码区比国外报道的Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ弱毒株多９个碱基，在非编码区最后５８个碱基，两毒株仅有１７个相同。
- 李金中夏咸柱何洪彬胡桂学余春范泉水郑先春黄耕武银莲
- 关键词：大熊猫犬瘟热病毒
- 犬瘟热病毒小熊猫株(LP)的动物感染试验被引量：5
- 2000年
- 将从死亡小熊猫肝脏病料中分离到的ＣＤＶＬＰ株第９ 代ＭＤＣＫ 细胞培养毒，按不同剂量各接种７ 只２～３ 月龄的健康幼犬，接种犬全部发病。于接种后７ 天时各捕杀２ 只犬进行检测，电镜检查、ＣＤＶＲＴ－ ＰＣＲ、ＣＤＶ的分离及中和试验结果均为阳性，说明接种犬发生了ＣＤＶ 感染。结合接种犬出现的临床症状及病理解剖学变化结果进行的分析表明，ＣＤＶＬＰ株是一株强毒，并且具有很强的免疫原性。人工感染犬试验结果表明某动物园小熊猫发病及死亡是由ＣＤＶ引起的。
- 何洪彬夏咸柱范泉水李昭春钟志宏黄耕邱薇邹啸环武银莲
- 关键词：犬瘟热病毒
- 大熊猫犬瘟热病毒附着或血凝蛋白基因的序列分析被引量：14
- 2000年
- 首次对犬瘟热病毒 (CDV)大熊猫 (GP)毒株附着或血凝蛋白 (H)基因进行了序列测定并与疫苗株Onderstepoort进行了比较。我们设计合成了 4对引物 ,对GP株进行了RT PCR扩增与测序。H蛋白基因全长为 194 6bp ,开放阅读框架 (ORF)始于 2 1 2 3位的ATG ,终止于 184 2 - 184 4位的TGA ,编码 6 0 7个氨基酸 ,该基因序列已被GenBank收录。将GP毒株与GenBank中疫苗弱毒株Onderstepoort进行比较 ,二者核苷酸序列的同源性为 91.4 % ,推导的氨基酸序列的同源性为 90 .2 % ,GP和Onderstepoort株H蛋白的半胱氨酸残基数目均为 12个且相对位置不变 ;疏水性有一定的变化 ,但推测的穿膜区位置 (约 35 55位氨基酸 )是一致的 ;Onderstepoort株的H蛋白潜在的N 联糖基化位点为 4个 ,GP株H蛋白为 9个 ,糖基化位点的不同可能对GP株H蛋白的抗原性产生影响。
- 何洪彬李金中夏咸柱余春范泉水黄耕邱薇殷震
- 关键词：大熊猫犬瘟
