- CD59特异位点的短肽封条对HeLa细胞凋亡作用的研究被引量：5
- 2008年
- 目的:研究CD59特异位点的短肽封条对HeLa细胞凋亡相关基因(survivin、caspase-3及bax)的表达作用,探讨CD59特异位点的短肽封条促HeLa细胞凋亡的作用机制。方法:将CD59特异位点的短肽封条分别作用于HeLa细胞和转CD59基因的HeLa细胞。作用24 h后,采用MTT的方法来检测细胞增殖抑制率;并利用免疫组织化学方法检测sur-vivin,caspase-3及其bax的表达水平。结果:转CD59基因的HeLa细胞+短肽的细胞组增殖抑制率大于HeLa细胞+短肽组(P<0.01)。转CD59基因的HeLa细胞+短肽组和正常的HeLa细胞+短肽组相比较,survivin表达水平降低(P<0.05);而caspase-3表达水平增高(P<0.05);bax的表达量各组比较,差别无统计学意义。结论:CD59特异位点的短肽封条具有下调survivin的表达,活化caspase-3,从而促进HeLa细胞的凋亡。
- 李先平高美华
- 关键词：CD59HELA细胞细胞凋亡CASPASE-3BAX
- 人CD59 RNAi逆转录病毒载体系统的构建与鉴定
- 目的:构建并筛选携带针对CD59基因的pSUPER retro RNAi逆转录病毒载体以及稳定产毒的细胞克隆,从mRNA水平研究CD59在肿瘤细胞免疫逃逸及相关信号转导通路中的作用。方法:用DNA重组技术,将3条60bp...
- 高美华石学香李先平张蓓王秋波王冰
- 文献传递
- CD59基因siRNA表达载体的构建及CD59短肽封条对HeLa细胞凋亡作用的研究
- 目的：构建针对CD59基因的pSUPER retro RNAi逆转录病毒载体，为下一步研究肿瘤细胞内CD59 RNAi奠定基础。利用本课题组设计并合成的CD59短肽封条，检测其对HeLa细胞凋亡的作用，为肿瘤的治疗提供一...
- 李先平
- 关键词：CD59基因SIRNA表达载体HELA细胞凋亡肿瘤生物治疗
- 文献传递
- 烟曲霉磷脂酶D基因敲除及其功能研究
- 目的:烟曲霉是一种重要的机会致病真菌,它能引起免疫缺陷患者严重的感染。磷脂酶D是病原微生物的一种重要的致病因子。磷脂酶D在烟曲霉中的作用还没有研究和报道。本课题研究磷脂酶D在烟曲霉致病机制中的作用,为进一步探讨烟曲霉的致...
- 李先平
- 关键词：烟曲霉磷脂酶D基因敲除毒力因子致病机制
- 文献传递
- CD59位点短肽封条对HeLa细胞凋亡相关基因caspase-3和survivin作用被引量：7
- 2008年
- 目的检测CD59位点短肽封条对HeLa细胞凋亡相关基因caspase-3、survivin表达水平的影响,探讨CD59位点短肽封条促肿瘤细胞凋亡的可能机制。方法将CD59位点短肽封条作用于HeLa细胞,利用免疫组织化学方法检测短肽封条作用12 h和24 h后HeLa细胞caspase-3、survivin的表达水平。结果caspase-3表达随短肽封条剂量和作用时间的增加而增加;survivin表达随短肽封条的剂量和作用时间的增加而减少。结论CD59位点短肽封条能下调survivin的表达并活化caspase-3,从而可能导致HeLa细胞的凋亡。
- 李先平高美华石学香张蓓程颖
- 关键词：SURVIVINCASPASE-3
- siRNA介导的RNAi降低了CD59对补体溶破的抵抗作用被引量：9
- 2008年
- 目的:构建针对人CD59基因的siRNA表达载体并筛选稳定细胞系,观察CD59基因改变后对补体溶破的抵抗作用的变化,探讨CD59在肿瘤细胞免疫逃逸及相关信号转导通路中的作用。方法:应用siRNA表达载体介导的RNAi技术,构建含特异性CD59基因的重组载体,脂质体法转染A2780细胞,G418筛选建立稳定抑制的细胞克隆,RT-PCR和Western blot检测转染细胞中CD59基因的表达抑制效果,染料释放试验判断CD59基因抑制后对补体溶破的抵抗作用的影响。结果:重组载体经PCR及限制性内切酶酶切鉴定初步成功后送测序,结果表明序列正确;重组载体转染A2780细胞,可表达绿色荧光蛋白,经G418筛选,得到抗性细胞克隆,RT-PCR和Western blot表明,稳定转染后CD59基因的mRNA和蛋白水平降低,染料释放试验表明CD59基因受抑制后对补体溶破的抵抗作用降低。结论:特异性沉默CD59基因的siRNA表达载体以及稳定抑制的细胞系构建和筛选成功,CD59基因抑制后对补体溶破的抵抗作用降低,为后续进行肿瘤细胞的研究奠定了基础。
- 石学香高美华李先平张蓓王秋波
- 关键词：SHRNACD59A2780补体
