荆晓光
- 作品数：7 被引量：15H指数：3
- 供职机构：佳木斯大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 激光微孔化脱细胞骨软骨支架的制备及表征
- 2018年
- 背景:如何制备出既具有软骨源性成分又具有良好初始力学强度的支架,是组织工程软骨研究的方向。目的:制备微孔化脱细胞骨软骨支架,评价其力学性能及细胞相容性。方法:取猪膝关节骨软骨,采用激光微孔化技术制作微孔化骨软骨支架,随后利用化学方法制作微孔化脱细胞骨软骨支架,扫描电镜观察支架结构,检测支架的压缩模量。分别采用微孔化脱细胞骨软骨支架浸提液(实验组)、含体积分数10%胎牛血清的L-DMEM(对照组)培养骨髓间充质干细胞,培养5 d内CCK-8法检测细胞增殖。将骨髓间充质干细胞接种于微孔化脱细胞骨软骨支架上,共培养28 d内进行苏木精-伊红染色与甲苯胺蓝染色,观察细胞生长情况。结果与结论:(1)扫描电镜:微孔化脱细胞骨软骨支架表面平整,孔与孔之间分布均匀,纵切面孔深达软骨下骨;(2)力学性能:微孔化脱细胞骨软骨支架的平均压缩模量为0.77 MPa,接近于正常骨软骨压缩模量(1.15 MPa);(3)CCK-8实验:实验组培养1,2,3,4,5 d的细胞增殖与对照组无差异;(4)共培养实验:苏木精-伊红染色和甲苯胺蓝染色显示,培养1 d后,大量骨髓干细胞在微孔化脱细胞骨软骨支架孔隙中生长,培养7 d后有少量细胞贴孔壁生长,孔隙中有少量细胞生长;培养21 d后,孔壁上有少量细胞贴壁生长,孔隙中有少量细胞生长;培养28 d后,孔壁上有少量细胞贴壁增殖,孔隙中有大量细胞成团增殖;(5)结果表明:微孔化脱细胞骨软骨支架具有良好的力学性能及细胞相容性。
- 刘雪剑刘士臣刘士臣张凯红孟昊业孟昊业黄绍代王玉王冲余文荆晓光赵跃余文彭江
- 关键词：软骨组织工程脱细胞共培养
- 骨软骨一体化仿生支架的研究现状与展望被引量：5
- 2017年
- 关节软骨在日常关节活动中发挥着重要的作用,而随着社会人口老龄化所导致的退行性软骨损伤与年轻患者不恰当的运动带来的运动损伤等,使得关节软骨损伤的发病率在不断地上升,且损伤患者也渐趋于年轻化。关节软骨虽有其相应的代谢活动,但因其缺乏神经、血管及淋巴组织,软骨一旦破坏便难以自我恢复与再生。如图1所示,常见的关节软骨损伤中,
- 张学亮刘舒云郭维民张雨陈明学荆晓光张增增张彬沈师李建伟郭全义
- 关键词：关节软骨损伤骨软骨透明软骨软骨细胞软骨支架细胞外基质
- 关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架的制备及评估被引量：3
- 2017年
- 背景:软骨组织工程主要包括种子细胞、支架材料、细胞因子及生物反应器等,其中支架材料是构建组织工程软骨的关键环节。目的:制备关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架,评估其理化特性及细胞相容性。方法:采用物理法分别制备猪关节软骨细胞外基质及人脐带Wharton胶,然后以冻融干燥法制备关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架,检测支架的孔隙率、吸水率、组织成分及纵向压缩弹性模量,并进行组织学染色。将关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架与兔软骨细胞共培养7 d,进行扫描电镜观察、活-死细胞染色及苏木精-伊红染色;分别采用关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架浸提液与细胞培养液培养兔软骨细胞6 d,MTT法检测细胞增殖。结果与结论:(1)关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架横断面为均匀的多孔网状结构,孔壁上密布软骨纤维,纵断面为垂直管状结构,支架苏木精-伊红红染、番红O及甲苯胺蓝染色均呈阳性,含有胶原和糖胺多糖成分,支架的吸水率、孔隙率和纵向压缩弹性模量分别为(17.418 8±0.909 0)%、(81.495 1±6.621 0)%和(2.833 3±0.456 4)k Pa;(2)共培养7 d,兔软骨细胞在支架上黏附和增殖,并均匀长入支架孔隙内;(3)关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架浸提液对软骨细胞无毒性;(4)结果表明,关节软骨细胞外基质/人脐带Wharton胶复合多孔支架的理化性能及生化成分与天然软骨相似,具有良好的细胞相容性。
- 肖统光郝春香荆晓光刘雪剑郭岗岗杨建华郭全义
- 关键词：生物材料细胞外基质软骨细胞相容性
- PKH26荧光素标记脂肪间充质干细胞的生物学特性的研究被引量：1
- 2018年
- 目的研究PKH26荧光素染料对脂肪间充质干细胞(ADSCs)生物学特性的影响。方法分离培养新生SD大鼠的ADSCs,通过流式细胞仪、成脂、成骨、成软骨诱导鉴定ADSCs的免疫表型和多向分化的能力。用细胞膜荧光素染料PKH26对第二代脂肪干细胞进行标记,通过倒置相差显微镜、荧光显微镜以及CCK-8法评估标记后细胞的形态、荧光强度以及增殖活性的变化。结果成功分离和培养ADSCs,其纯度达95%以上,并成功将ADSCs诱导成脂肪、骨、软骨;PKH26标记24 h后,在荧光显微镜下可见细胞膜上均匀分布的强红色荧光,细胞的形态以及增殖活性与未标记的细胞无明显差异。结论 PKH26荧光素染料标记后对ADSCs的形态及增殖活性无明显影响,是一种理想的细胞标志物,能够很好的应用于示踪间充质干细胞的迁移转归及干细胞标记等方面的研究。
- 黄绍代王玉鲁长风陈鹏王冲刘雪剑孙百川张凯红荆晓光胡丹彭江田建伟
- 关键词：脂肪间充质干细胞PKH26细胞标记
- 新型脱细胞动脉基质的制备及理化性能评估被引量：1
- 2018年
- 目的探索新型脱细胞动脉基质的制备方法,并分析评估其各项理化性能。方法采用自主设计的三联脱细胞程序,逐步去除动脉血管中的细胞和抗原成分。通过甲苯胺蓝、HE及天狼猩红染色和羟脯氨酸定量分析,对比脱细胞前后血管基质成分与天然半月板之间的差异;并采用Hoechst33258荧光染色法观察脱细胞前后动脉中DNA残留情况;通过MTT法考察材料经脱细胞程序后的毒性强弱以及对细胞活性的影响;将兔半月板细胞接种到脱细胞血管基质后培养,观察两者的相容性。结果三联脱细胞方法制备的牛大动脉基质的组织学染色结果与正常半月板类似,进一步胶原定量证实,材料经脱细胞后胶原含量无明显统计学差异;通过Hoechst33258染色,未发现血管基质中细胞核和DNA残留;甲苯胺蓝及天狼猩红染色证实脱细胞血管基质支架可以很好地保留胶原成分;MTT结果显示脱细胞动脉基质无细胞毒性,具有良好的生物相容性。半月板细胞接种材料后扫描电镜结果显示,脱细胞血管基质能很好促进细胞黏附,并诱导细胞的增殖。结论自主设计的脱细胞程序能完全去除主要抗原成分,无DNA及细胞碎片的残留,并保留了大部分细胞外基质成分、完整组织结构和良好的力学性能,同时具有良好的细胞生物相容性。对比性分析研究得出,在结构和成分上,脱细胞血管基质与半月板具有高度相似性,是未来非常有应用潜力的组织工程半月板支架之一。
- 张增增张增增郝春香郭维民陈明学张学亮张学亮李旭荆晓光孙百川郝立波郝立波眭翔刘舒云郭全义
- 关键词：细胞外基质半月板修复
- 半月板细胞外基质-海藻酸水凝胶的制备及其对半月板细胞的影响被引量：2
- 2017年
- 目的制备脱细胞半月板细胞外基质-海藻酸(AMECM-Alg)水凝胶,并研究AMECM-Alg水凝胶对半月板细胞增殖、再分化的影响。方法联合物理化学方法制备AMECM,以AMECM和海藻酸为原料制备5种不同浓度的AMECM-Alg水凝胶(0%、0.5%、1%、2%和4%);复合P_3代半月板细胞,通过细胞死活染色、CCK8实验、DNA定量评估水凝胶促进细胞增殖的能力,通过胶原、糖胺多糖定量,RT-PCR评估水凝胶促进细胞再分化的能力。结果死活细胞染色、CCK8实验和DNA定量实验表明AMECM-Alg水凝胶均能促进细胞的增殖,其中以2%浓度组作用最强;胶原和糖胺多糖定量结果表明AMECM-Alg水凝胶均能促进半月板细胞分泌细胞外基质,其中2%浓度组明显优于其他组。RT-PCR结果显示半月板细胞在2%浓度组水凝胶中collagen Ia2、collagen IIa1、SOX9和aggrecan基因表达量明显高于其他组。结论 AMECM-Alg水凝胶具有良好的细胞相容性,既能促进细胞增殖,又能促进细胞再分化,其中以2%浓度组的作用最强,在未来组织工程半月板生物材料研究方面具有很好的应用前景。
- 陈明学郭维民沈师王振勇王泽昊张增增李旭张学亮荆晓光刘舒云郝立波韩纲郭全义
- 关键词：半月板胫骨水凝胶细胞外基质海藻酸
- 可注射性乙二醇壳聚糖/双醛功能化聚乙二醇水凝胶的细胞相容性被引量：3
- 2019年
- 背景:课题组前期研究自主研发了可注射性乙二醇壳聚糖/双醛功能化聚乙二醇水凝胶(glycolchitosan/dibenzaldehyde-terminated poly-ethyleneglycol,GCS/DF-PEG),研究显示其具有较好的可注射性和自愈性。目的:进一步检测可注射性GCS/DF-PEG的物理学性质及细胞相容性。方法:将质量分数1.5%的乙二醇壳聚糖溶液与质量分数分别为2%,4%,8%的双醛功能化聚乙二醇溶液等体积混合,制备3组可注射性GCS/DF-PEG水凝胶,检测其弹性模量。将3组可注射性水凝胶分别浸入PBS中4周,检测凝胶的体外降解。提取第2代SD乳鼠脂肪间充质干细胞,实验组加入可注射性GCS/DF-PEG水凝胶浸提液,对照组常规培养,MTT法检测细胞增殖。将质量分数3%的乙二醇壳聚糖溶液与第2代SD乳鼠脂肪间充质干细胞混合,再与质量分数为4%的双醛功能化聚乙二醇溶液混合,培养第1,5天,采用死活染色法检测细胞在水凝胶内死活状态。将质量分数3%的乙二醇壳聚糖溶液与第2代SD乳鼠脂肪间充质干细胞混合,再与质量分数分别为2%,4%,8%的双醛功能化聚乙二醇溶液混合,MTT法检测细胞增殖。结果与结论:(1)质量分数分别为2%,4%,8%双醛功能化聚乙二醇组水凝胶的弹性模量分别为13.48,22.21,33.19kPa;(2)随时间的延长,3组水凝胶的降解率均逐渐增加,质量分数2%双醛功能化聚乙二醇组水凝胶的降解速率明显快于其他两组;(3)培养7d内,实验组细胞增殖与对照组比较无差异;(4)死活染色显示,脂肪间充质干细胞在水凝胶内呈球形,存活率在90%以上,且随时间延长细胞数量明显增多;(5)随着时间的延长,脂肪间充质干细胞在含不同质量分数双醛功能化聚乙二醇GCS/DF-PEG水凝胶内的数量逐渐增多,且含质量分数2%双醛功能化聚乙二醇组水凝胶内的细胞增殖快于含质量分数4%,8%双醛功能化聚乙二醇组(P <0.05);(6)结果表明,可注射性GCS/DF-PEG水凝胶的细胞相容性良好,力学
- 荆晓光刘舒云郭维民李旭吕奥刘士臣孟昊业陈明学张学亮张增增张增增刘雪剑王泽浩高超高超陶磊张彬郭全义
- 关键词：脂肪间充质干细胞细胞增殖水凝胶细胞增殖
