童越
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金中华医学会临床医学科研专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 未成熟大鼠睾丸组织玻璃化冻存效果的比较性研究
- 2019年
- 目的采用三种浓度冷冻保护剂方案对两周龄未成熟大鼠睾丸组织进行玻璃化冻存,并对冻存效果做出评价。方法根据DMEM/F12培养基中所含二甲基亚砜(DMSO)和乙二醇(EG)的浓度差异,将冻存液分为A、B、C三组,其中DMSO和EG的浓度依次为7.5%、15%、25%。将大鼠睾丸分割为8 mm^3~9 mm^3大小的组织块,分别纳入对照组、A组、B组和C组中。对照组的睾丸组织不作冷冻处理,直接进行后续实验;A、B、C三组使用不同浓度的冷冻保护剂进行玻璃化冷冻。冻存2周后,取出样本进行复苏。比较各组睾丸组织的形态学改变,采用免疫荧光染色观察精原细胞标志物UCHL1、支持细胞标志物SOX9、睾丸间质Leydig细胞标志物StAR和细胞增殖核抗原PCNA表达的改变,观察细胞的凋亡情况。结果玻璃化冻存后,未成熟大鼠睾丸组织形态发生一定程度改变,生精细胞及支持细胞标志物表达下降,凋亡增加,与对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。三个冻存组中,B组形态学改变最小,细胞标志物表达水平与对照组相差最少,凋亡最少;A组的结构损伤明显,生精上皮与基底膜分离;C组的细胞标志物表达显著下降,凋亡增加最显著。结论冷冻保护剂浓度变化对未成熟睾丸组织玻璃化冻存效果有显著影响,15%DMSO和15%EG组合是玻璃化冻存未成熟大鼠睾丸组织较适宜的冷冻保护剂浓度方案,可为进一步的临床应用提供参考。
- 童越童越安琪傅龙龙张开舒贾艳飞周芳郭颖卢文红梁小薇唐文豪谷翊群
- 关键词：睾丸组织玻璃化冷冻保护剂DMSOEG
- 生物信息学方法研究高脂饮食诱导肥胖对雄性SD大鼠的影响被引量：2
- 2017年
- 目的应用生物信息学方法探寻高脂饮食诱导性肥胖雄性SD大鼠生理代谢改变及对生育力的影响。方法利用NCBI中的GEO基因芯片公共数据库进行芯片数据搜索,最终选择芯片数据(GSE8700)作为分析对象,使用bioconductor包中R工具的函数及Limma程序包识别差异性表达基因,应用DAVID数据库对差异表达基因进行GO富集分析和KEGG通路分析,选用String在线数据库构建差异表达基因的PPI网络。结果通过对GSE8700进行分析,得到1 014个表达差异基因,其中上调基因544个,下调基因470个;上调差异基因GO条目全部富集于生物过程(BP),主要为氧化还原、轴突生成、对肽类激素反应、对糖皮质激素反应过程;下调差异基因GO富集于生物过程(BP),主要为女性怀孕、对类固醇激素的反应、甘油三酯代谢等过程;富集于细胞组成(CC),主要为细胞外间质,细胞质,血液微球等组成;富集于分子功能(MF),主要为丝氨酸肽链内切酶活性、脂肪酸结合、磷脂质结合等功能;上调差异基因并未富集到任何KEGG通路,而下调差异基因富集到3条通路,分别为PPAR信号通路(过氧化物酶体增殖物激活型受体)、脂肪的消化和吸收通路、胰腺分泌通路,其中重要的节点基因为热休克蛋白90AB1(Hsp90ab1)、细胞外钙敏感受体(Casr)及趋化因子9(Ccl9)等。结论高脂饮食诱导肥胖雄性SD大鼠脂质代谢发生了紊乱,大鼠生殖功能可能受到影响,类固醇激素、肽类激素代谢异常可能是其影响途径。
- 贾艳飞郭颖张蔚张开舒傅龙龙安琪童越谷翊群
- 关键词：生物信息学肥胖生殖差异基因
- 左卡尼汀对冷冻精子运动参数和精子线粒体功能的影响被引量：7
- 2018年
- 目的:探讨左卡尼汀(LC)对人冷冻精子的影响。方法:将每份供精志愿者精液分为6组:新鲜精液组(FE组);常规冷冻组(Non-LC组,冷冻保护剂中未添加LC); LC 1～4组,冷冻保护剂中LC浓度分别为:1、2. 5、5、10 mmol/L。通过观察冷冻复苏后精子活力和运动参数改变,筛选最佳LC工作浓度。伊红-苯胺黑染色法评估精子质膜完整性(PMI),JC-1法评估精子线粒体膜电位(MMP),DCFH-DA法评估活性氧(ROS),探索LC对精子冷冻损伤的影响机制。结果:与FE组相比,冷冻复苏后精子(Non-LC组和LC各组),前向运动精子百分率(PR%)和运动参数(VAP、VSL、VCL)均明显下降(P <0. 05)。与Non-LC组相比,LC 3组PR%[(47. 0±4. 3)%vs(41. 9±4. 6)%,P=0. 0261)]和VAP [(38. 9±4. 2)μm/s vs (34. 9±2. 6)μm/s,P=0. 0152)]改善明显,确定5 mmol/L为实验最佳LC工作浓度。与FE组比较,Non-LC组冷冻复苏后精子PMI[(52. 7±5. 7)%vs (75. 5±5. 4)%]、MMP[(44. 5±3. 5)%vs(57. 3±4. 4)%]明显降低(P <0. 01),ROS[(12. 5±3. 9)%vs(6. 8±2. 4)%]明显升高(P <0. 01);与Non-LC组比较,LC组精子PMI[(70. 1±8. 2)%]和MMP[(50. 3±3. 4)%]明显升高(P <0. 01、<0. 05),ROS[(8. 4±5. 3)%]明显降低(P <0. 05)。结论:LC可能通过降低精子ROS,提高精子MMP,保护精子质膜,改善冷冻后精子活力和运动参数。
- 傅龙龙张林媛张林媛周芳童越童越卢文红梁小薇常兵谷翊群
- 关键词：左卡尼汀线粒体膜电位氧化应激
- 冷冻保存对人类精子线粒体DNA的影响被引量：2
- 2018年
- 目的探讨常规精液冷冻技术对人类精子线粒体DNA的影响。方法收集符合精子库捐精条件的正式志愿者精液样品,将每份样品分为2份:1份进行精液冷冻复苏处理,为实验组;1份新鲜精液,为对照组。采用Markler计数板联合CASA法评估冷冻复苏前后精子活力;两组精液均采用实时荧光定量PCR和长链PCR技术,分别检测精子线粒体DNA的拷贝数和完整性。结果共收集22份精液标本,纳入志愿者年龄为(27.8±3.0)岁,禁欲天数(6.1±0.9)d;精液体积(5.0±1.5)ml,精子浓度(75.8±15.8)×106/ml,前向运动精子百分比为(68±6)%,总活动精子复苏率为(72±8)%。冷冻保存后,精子活力显著降低:前向运动精子百分比减少[(49.0±6.5)%vs.(68.0±6.1)%,P<0.05),平均路径速率(VAP)[(35.8±6.8)vs.(46.8±9.5),P<0.05]、直线速率(VSL)[(27.3±3.3)vs.(35.1±8.3),P<0.05]和曲线速率(VCL)[(57.6±6.9)vs.(91.8±10.2),P<0.05]较前下降。与新鲜精液相比,冷冻复苏后精子的线粒体DNA拷贝数显著增加[(10.12±8.41)vs.(5.66±5.53),P<0.05],完整性比较无统计学差异[(29.69±15.04)vs.(32.78±16.0),P=0.077]。结论在正式捐精志愿者人群内,常规精液冷冻技术降低精子活力,增加人类精子mtDNA的拷贝数,但未显著改变mtDNA的完整性。
- 傅龙龙傅龙龙安琪张开舒童越许剑锋童越郭颖李鸿袁冬卢文红梁小薇谷翊群
- 关键词：线粒体DNA
