王芯
- 作品数:1 被引量:5H指数:1
- 供职机构:西南大学生物技术中心更多>>
- 发文基金:博士科研启动基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 球孢白僵菌T-DNA突变体库的构建及高温和高渗敏感型突变体的筛选(英文)被引量:5
- 2009年
- 【目的】筛选对高温和高渗等逆境胁迫敏感的球孢白僵菌T-DNA随机插入突变体,并克隆相关基因,为研究杀虫真菌适应逆境的分子机理奠定基础。【方法】利用逆境胁迫的方法从球孢白僵菌的T-DNA随机插入突变库中筛选对高温和高渗敏感的突变体,进而利用YADE(Y-shaped adaptor dependent extension)技术克隆相关基因。【结果】筛选得到5个对高温和高渗敏感的突变体。其中2个(212和2550)对高温敏感,在32℃下生长完全受抑;其它3个突变体对高渗胁迫敏感。突变体212的分生孢子对逆境胁迫的抗性也显著降低。与野生菌株相比,分生孢子经紫外线、高温和氧胁迫后,其存活率分别下降了23%、52%和21%。突变体212和2737对桃蚜的致死率(接种浓度为1×107个孢子/mL)分别下降了12%和40%。T-DNA侧翼序列分析显示,突变体212和2737的2个功能未知基因的编码框被T-DNA随机插入阻断,而其它3个突变体的T-DNA插入位点位于非编码区域。【结论】本研究结果表明,利用T-DNA随机插入突变筛选高温与高渗等逆境相关突变体,进而克隆相关基因是一种行之有效的方法。
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- 关键词:球孢白僵菌插入突变高温