陈玉姣
- 作品数：2 被引量：11H指数：1
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肿瘤坏死因子-α对骨髓源性肥大细胞表达MMP-3、MMP-9、IL-17的影响被引量：11
- 2015年
- 目的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对骨髓源性肥大细胞(BMMCs)分泌MMP-3、MMP-9、IL-17的影响。方法原代培养小鼠BMMCs,将培养8周的BMMCs种植于12孔板中。细胞分为4个组:BMMCs+PBS组(对照组)、BMMCs+2 ng/m L TNF-α组(2 ng/m L组)、BMMCs+10 ng/m L TNF-α组(10 ng/m L组)、BMMCs+50 ng/m L TNF-α组(50 ng/m L组),不同浓度TNF-α与BMMCs作用后,在12、24 h收集细胞,用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR),在m RNA水平检测MMP-3、MMP-9、IL-17的表达。结果培养12 h后,2 ng/m L组、10 ng/m L组、50 ng/m L组MMP-3、MMP-9、IL-17 m RNA的表达均高于对照组(P<0.05),并且随着TNF-α浓度的上升m RNA的表达显著升高(P<0.05)。24 h结果与12 h结果一致,24 h与12 h之间比较,除50 ng/m L组MMP-3 m RNA的表达无差异(P>0.05),其余各组之间MMP-3、MMP-9、IL-17m RNA的表达显著升高(P<0.05)。结论 TNF-α可以上调BMMCS表达MMP-3、MMP-9、IL-17,且具有浓度依赖性和时间依赖性。
- 陈玉姣欧阳晴晴王然毋静赵进军杨敏
- 关键词：肿瘤坏死因子-ΑMMP-3MMP-9IL-17
- 小鼠滑膜成纤维细胞的原代培养
- 2016年
- 目的利用C57BL／6小鼠探索出一种改良的小鼠滑膜成纤维细胞（SF）的原代培养方法，以方便类风湿关节炎（RA）关于滑膜炎的研究。方法收集小鼠髋关节周围滑膜，去除内含的“蛋黄样”物，将滑膜移入含0．5%Ⅳ型胶原酶的EP管中，剪碎；置入37℃摇箱中振荡消化60min，然后在涡轮振荡仪上振荡1．5min，常规培养。结果细胞培养1周左右。进行第一次传代；大约在培养10d后滑膜巨噬细胞的数量达到最高峰，然后逐渐减少；在第3次传代（15～20d）后，滑膜巨噬细胞基本消失。用Vimentin标记的细胞免疫荧光化学染色显示SF细胞纯度超过95％；用Vimentin和CD90．2标记的流式细胞术显示其纯度达到95％，用CD54标记其纯度大约为80％。结论利用C57BL／6小鼠探索出一种改良的小鼠SF的原代培养方法是一种简便易行的小鼠SF的原代培幕方法。
- 赵进军胡子有欧阳晴晴毋静陈玉姣杨敏
- 关键词：滑膜细胞培养技术
