目的:探讨天然化合物葫芦素B(Cucurbitacin B,CuB)对多柔比星(Doxorubicin,Dox)耐药的人乳腺癌细胞MCF-7/Dox的耐药逆转作用及机制。方法:台盼蓝计数实验及集落形成率实验检测CuB对细胞生长的抑制作用;MTT法检测CuB对MCF-7/Dox的抑制作用及逆转Dox耐受作用;核染色免疫荧光及免疫印迹法分析CuB诱导细胞凋亡作用及逆转MCF-7/Dox细胞Dox耐药的作用机理。结果:CuB可以显著抑制MCF-7/Dox细胞增殖、生长,诱导凋亡及逆转Dox耐药。机制研究发现,CuB能够抑制与肿瘤多药耐药相关蛋白的表达,包括P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药性相关蛋白(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)和细胞周期蛋白Cyclin D1。CuB可以诱导Caspase依赖性的细胞凋亡和降低Akt的磷酸化。CuB通过诱导蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)的活化实现对Akt活性的抑制,而下调蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子(Cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A)可以活化PP2A。结论:CuB能够逆转MCF-7/Dox对Dox的耐药并诱导其凋亡,其机制可能是抑制了CIP2A/PP2A/Akt信号级联。
